雌性食蟹猴去卵巢(OVX)诱导骨质疏松动物模型建立及评价 被引量：3

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作者 陈刚 史美枢 +6 位作者 刘萧 付炜骅 储忞扬 胡锦烨 刘兵 朱莉芸 崔立 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2019年第1期87-94,共8页

为了探索建立食蟹猴骨质疏松模型的可行性并评价阿仑膦酸钠(ALN)的治疗效果,将12只成年雌性食蟹猴随机分为卵巢切除(OVX)模型组、OVX阳性组、假手术(Sham)组。造模1个月后,OVX模型组和Sham组口服生理盐水(10 mL/周),OVX阳性组口服ALN(5 ... 为了探索建立食蟹猴骨质疏松模型的可行性并评价阿仑膦酸钠(ALN)的治疗效果,将12只成年雌性食蟹猴随机分为卵巢切除(OVX)模型组、OVX阳性组、假手术(Sham)组。造模1个月后,OVX模型组和Sham组口服生理盐水(10 mL/周),OVX阳性组口服ALN(5 mg/周)。结果表明:OVX术后1个月,血清雌二醇(E2)水平较术前下降。OVX模型组血清骨代谢物骨特异性碱性磷酸酶(sALP)、I型胶原羧基末端肽(CTx-I)明显高于OVX阳性组和Sham组(P<0.01)。OVX模型组骨密度(BMD)明显低于OVX阳性组和Sham组(P<0.01)。骨组织形态计量学分析显示OVX模型组骨体积分数、骨小梁厚度及骨小梁数量均减少,骨小梁分离度增大,与OVX阳性组和Sham组相比差异有统计学意义(P<0.05)。OVX阳性组的松质骨骨强度参数明显低于OVX模型组(P<0.05)。以上结果表明,雌性食蟹猴去卵巢后因雌激素降低导致的骨质疏松,与人类临床上绝经后女性骨质疏松的各项指标相符。本研究成功建立了雌性食蟹猴去卵巢(OVX)后诱导建立骨质疏松动物模型,并通过经阿仑膦酸钠治疗效果的评价验证。此模型为研究绝经后骨质疏松发病机理、评价药物疗效等提供重要的基础。 展开更多

关键词 食蟹猴 去卵巢(OVX) 骨质疏松 动物模型 阿仑膦酸钠

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重组特立帕肽注射液对去卵巢所致大鼠骨质疏松模型的药效学观察

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作者 毕道钰 罗启剑 +1 位作者 袁红江 耿雨红 《临床合理用药杂志》 2020年第7期98-100,共3页

目的观察重组特立帕肽注射液对去卵巢大鼠骨质疏松治疗作用,并对市售原研产品复泰奥进行比较。方法选择60只雌性SD大鼠,依据动物的体质量、骨密度分为Sham组和双侧去卵巢(OVX)组,OVX组动物切除双侧卵巢;手术8周后,对OVX组再随机分为6组... 目的观察重组特立帕肽注射液对去卵巢大鼠骨质疏松治疗作用,并对市售原研产品复泰奥进行比较。方法选择60只雌性SD大鼠,依据动物的体质量、骨密度分为Sham组和双侧去卵巢(OVX)组,OVX组动物切除双侧卵巢;手术8周后,对OVX组再随机分为6组,分别接受赋形剂或不同剂量受试药及复泰奥治疗,连续治疗8周;取各组动物第L1~L4截段进行BMD检测,取L4腰椎和左股骨进行生物力学评价。结果治疗结束时赋形剂亚组BMD显著低于假手术组及受试药和复泰奥各组,相同剂量的受试药物和复泰奥均无显著性差异。结论重组特立帕肽注射液可显著改善去卵巢动物的BMD及腰椎最大荷载,受试药和复泰奥的药效表现相似。 展开更多

关键词 重组特立帕肽 去卵巢 BMD 荷载强度

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ELISA法检测人血清中重组人信号调节蛋白α-抗CD20人鼠嵌合抗体融合蛋白IMM0306的方法学建立和验证

3

作者 靖钰 姚慕蓉 +5 位作者 李松 陈典泽 张力 杨勇 钟勘 宗山海 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2367-2371,共5页

IMM0306是重组人信号调节蛋白α-抗CD20人鼠嵌合抗体融合蛋白,拟在临床中治疗难治或复发性CD20阳性B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)。本文建立了ELISA法(酶联免疫吸附法)用于评价人血清中IMM0306的药代动力学。该实验获得中国医学科学院肿... IMM0306是重组人信号调节蛋白α-抗CD20人鼠嵌合抗体融合蛋白,拟在临床中治疗难治或复发性CD20阳性B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)。本文建立了ELISA法(酶联免疫吸附法)用于评价人血清中IMM0306的药代动力学。该实验获得中国医学科学院肿瘤医院伦理委员会批准(批准号:CTR20192612)。用重组人CD47蛋白包被过夜, 5%脱脂奶粉封闭2 h,洗涤板后,按照板位图每孔加入100μL样本孵育1.5 h,洗涤后加入生物素标记的检测抗体anti-IMM0306-biotin并孵育1 h,随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素孵育1 h,显色并检测。捕获试剂的最佳包被浓度为2μg·mL^(-1),检测试剂anti-IMM0306-biotin和链霉亲和素-HRP的最佳稀释度分别为1∶500和1∶5 000。该方法的定量下限为4 ng·mL^(-1),标准曲线范围是4~100 ng·mL^(-1)。方法的验证结果均满足相应的接受标准,可以用于IMM0306临床药代动力学研究。 展开更多

关键词 CD47 抗体融合蛋白 ELISA 药代动力学

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抗体药物现状及发展趋势 被引量：3

4

作者 田文志 朱祯平 《生物产业技术》 2013年第5期7-21,共15页

治疗性抗体作为一种具有独特优势的生物靶向治疗药物，已成为目前全球药物研发的热点。截止到2013年2月，已有34个治疗性抗体获得美国FDA批准上市，用于各种疾病的治疗。据统计，目前有多达350余种抗体产品正处于临床试验阶段，其中29... 治疗性抗体作为一种具有独特优势的生物靶向治疗药物，已成为目前全球药物研发的热点。截止到2013年2月，已有34个治疗性抗体获得美国FDA批准上市，用于各种疾病的治疗。据统计，目前有多达350余种抗体产品正处于临床试验阶段，其中29个已进入III期临床试验。开发抗体新靶点和新适应证，研究和设计更为安全有效的新型抗体分子及抗体组合疗法，寻找生物标记指导抗体对病人的有效治疗，是当前和今后一段时期内该领域发展的主要方向。本文将综述国际抗体药物研发现状和发展趋势，并对国内抗体药物现状及发展策略予以简要陈述。 展开更多

关键词 抗体药物 发展趋势 治疗性抗体 治疗药物 药物研发 临床试验 生物标记 美国FDA

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2种定量PCR法与探针杂交法在检测重组白介素1受体拮抗剂中宿主DNA残留量的比较 被引量：2

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作者 李京敬 郜尽 韩伟 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期140-145,共6页

目的：建立Taqman探针技术的定量PCR方法，对大肠杆菌E.coli/BL21菌株生产的重组白介素1受体拮抗剂（rhIL^-1ra）中的残留宿主DNA进行了定量分析，并与SYBR Green法和地高辛探针杂交法进行比较。方法：以BioRad Chromo 4荧光定量PCR仪... 目的：建立Taqman探针技术的定量PCR方法，对大肠杆菌E.coli/BL21菌株生产的重组白介素1受体拮抗剂（rhIL^-1ra）中的残留宿主DNA进行了定量分析，并与SYBR Green法和地高辛探针杂交法进行比较。方法：以BioRad Chromo 4荧光定量PCR仪为平台，选择大肠杆菌23S核糖体RNA基因为靶基因，设计引物和Taqman探针，以纯化的宿主基因组DNA为标准品，对供试品中残留DNA进行定量。同时在重复性，精密度，检测限等方面与SYBR Green方法和地高辛探针杂交法进行比较。结果：本实验建立的Taqman探针法检测限为0.01 ng·mL^-1，在0.01～1000 ng·mL^-1区间同样具有良好的线性（r=0.997），回收率89.7%～136.0%。测定4批次供试品中残留DNA浓度为0.052、0.092、0.096、0.025 ng·mL^-1。结论：Taqman探针法与SYBR Green法检测灵敏度均达到0.01 ng·mL^-1，在重复性与精密度方面效果一致，且均优于探针杂交方法。 展开更多

关键词 大肠杆菌 定量PCR 宿主残留DNA 重组白介素1受体拮抗剂 质量控制 Taqmen探针

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重组人Midkine真核表达载体的构建以及蛋白表达和纯化 被引量：1

6

作者 徐杨琪 李京敬 +5 位作者 关文 郜尽 贾世香 屠平 韩伟 俞雁 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期228-233,共6页

Midkine(MK)是一种肝素结合型生长因子,在胚胎早期的分化发育、肿瘤、炎症、再生等方面发挥着重要的调控作用。本研究将人MK(hMK)全长基因构建到pPICZa(B)表达载体上,通过化学转染方法,转染质粒至不同酵母菌株中进行筛选,利用毕赤酵母... Midkine(MK)是一种肝素结合型生长因子,在胚胎早期的分化发育、肿瘤、炎症、再生等方面发挥着重要的调控作用。本研究将人MK(hMK)全长基因构建到pPICZa(B)表达载体上,通过化学转染方法,转染质粒至不同酵母菌株中进行筛选,利用毕赤酵母的高密度发酵进行表达,纯化出高纯度的重组人Midkine(rhMK),并通过试验证明,纯化的rhMK具有趋化UMR106细胞的活性。rhMK的真核表达与纯化方法的建立为后续的药效学试验奠定了基础,并对其它蛋白的真核表达、纯化也有一定的参考意义。 展开更多

关键词 中期因子 毕赤酵母 发酵 离子交换层析 高效液相色谱

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rhIL-1ra蛋白质的HPLC法测定 被引量：1

7

作者 毕引歌 张如亮 +2 位作者 贾世香 屠平 韩伟 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期592-594,共3页

建立了分子排阻色谱-高效液相色谱法测定重组人白介素-1受体拮抗剂(rhIL-1ra)蛋白。使用凝胶色谱柱,流动相为0.01 mol/L枸橼酸缓冲液-0.1 mol/L氯化钠溶液,检测波长280 nm。rhIL-1ra蛋白在0.018～2.4 mg/mm浓度范围内线性关系良好。回... 建立了分子排阻色谱-高效液相色谱法测定重组人白介素-1受体拮抗剂(rhIL-1ra)蛋白。使用凝胶色谱柱,流动相为0.01 mol/L枸橼酸缓冲液-0.1 mol/L氯化钠溶液,检测波长280 nm。rhIL-1ra蛋白在0.018～2.4 mg/mm浓度范围内线性关系良好。回收率为99.1%,RSD为1.09%。 展开更多

关键词 白介素 1受体拮抗剂 高效液相色谱 测定

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一例犬乳腺肿瘤病的诊疗报告

8

作者 刘广庆 谭婷婷 +1 位作者 杜薇 华修国 《亚洲兽医病例研究》 2017年第3期29-34,共6页

近年来根据动物医院就诊病例调查犬乳腺肿瘤病例占全部肿瘤病例的30%左右,仍属于较高发的严重威胁犬生活质量甚至生命的一大疾病。本文介绍了一例具体病例,该病例经临床症状、细胞学检查等方法来进行诊断,通过手术摘除肿瘤的方法进行治... 近年来根据动物医院就诊病例调查犬乳腺肿瘤病例占全部肿瘤病例的30%左右,仍属于较高发的严重威胁犬生活质量甚至生命的一大疾病。本文介绍了一例具体病例,该病例经临床症状、细胞学检查等方法来进行诊断,通过手术摘除肿瘤的方法进行治疗,使病犬康复出院。随后取肿瘤组织做病理切片,分析病理变化,并对犬乳腺肿瘤的治疗方法进行了讨论。 展开更多

关键词 犬 乳腺肿瘤 诊疗 病理变化 离子导入

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重组人白介素1受体拮抗剂(rhIL-1Ra)重复给药导致大鼠和食蟹猴产生结合抗体

9

作者 杨敏敏 陆海波 +1 位作者 韩伟 郜尽 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2014年第4期14-18,共5页

限制大分子药物使用的关键因素之一为诱导抗体产生。新药安全性评价时往往不得不采用多种动物评价人源蛋白的安全性,因此,测定动物产生抗体水平是正确评价大分子药物的前提。为了检验重组人白介素1受体拮抗剂(rhIL-1Ra)在动物体内的安全... 限制大分子药物使用的关键因素之一为诱导抗体产生。新药安全性评价时往往不得不采用多种动物评价人源蛋白的安全性,因此,测定动物产生抗体水平是正确评价大分子药物的前提。为了检验重组人白介素1受体拮抗剂(rhIL-1Ra)在动物体内的安全性,采用间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定rhIL-1Ra结合抗体,以纯化抗原作为包被载体,加入供试品后再加酶标抗体,用底物显色并在酶标仪上读取结果。结果显示,抗原包被浓度为10μg/mL、酶标二抗工作浓度为1∶5 000、阳性对照工作浓度为1∶10 000、待检血清样品稀释度从1∶100开始较为合适。SD大鼠肌肉注射给予rhIL-1Ra 4周试验中,剂量分别为0、5、15和30mg/kg。结果表明,剂量≥5mg/kg时给药2周后可诱导产生结合抗体。食蟹猴每天1次连续给药4周,剂量分别采用0、2.5、7.5和15.0mg/kg,当剂量≥2.5mg/kg时可诱导产生结合抗体。 展开更多

关键词 重组人白介素1受体拮抗剂 结合抗体 酶联免疫吸附测定法

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美国英语反映出的美国文化探析

10

作者 朱文君 《魅力中国》 2013年第19期7-7,共1页

语言是传递文化的载体。不同的语言都蕴含着国家不同的历史文化，美国的英语承载着美国的文化，表现在方方面面，反映出了美国文化的各种特点，通过英语就能解读美国文化，进行文化的交流，本文主要对美国英语中反映出的美国文化进行探析。

关键词 关键词{美鹤英语 英语词汇 美国文化

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评估母猪肢蹄病的新方法

11

作者 王建花 《今日养猪业》 2014年第11期22-22,共1页

加拿大种猪研发集群Swine Innovation Porc声称,通过管理改革可以尽早检测并及时治疗母猪肢蹄病,从而延长母猪在种猪群的生产寿命。 猪肉行业的价格波动是司空见惯的事。生产商一直在寻求方法来提高他们的底线价格。如果我们提高种猪... 加拿大种猪研发集群Swine Innovation Porc声称,通过管理改革可以尽早检测并及时治疗母猪肢蹄病,从而延长母猪在种猪群的生产寿命。 猪肉行业的价格波动是司空见惯的事。生产商一直在寻求方法来提高他们的底线价格。如果我们提高种猪群的生产性能将会发生什么呢？具体而言,可以通过管理的改革及早检测并治疗肢蹄病,从而延长母猪在种猪群的生产寿命。 展开更多

关键词 肢蹄病 种猪群 SWINE 群体饲养 加拿大农业 猪群健康 生产性能 分离板 曼尼托巴大学 威胁因素

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健脾补肾方对肌萎缩侧索硬化小鼠的干预效果及作用机制

12

作者 潘昊 刘特 +5 位作者 张祯 吕星航 刘逸舟 王明哲 段继峰 费智敏 《上海中医药杂志》 2025年第1期66-71,94,共7页

目的探索健脾补肾方对肌萎缩侧索硬化(ALS)模型小鼠运动功能的影响及其机制。方法将12只采取转基因法繁育的保留部分运动功能的ADAR2flox/flox/VAChT-Cre小鼠(AR2小鼠)随机分为模型组和治疗组,每组6只;以6只同批次野生型(WT)小鼠为对照... 目的探索健脾补肾方对肌萎缩侧索硬化(ALS)模型小鼠运动功能的影响及其机制。方法将12只采取转基因法繁育的保留部分运动功能的ADAR2flox/flox/VAChT-Cre小鼠(AR2小鼠)随机分为模型组和治疗组,每组6只;以6只同批次野生型(WT)小鼠为对照组。治疗组小鼠灌胃给予健脾补肾方[30 g/(kg·d)],对照组和模型组小鼠灌胃给予0.2 mL氯化钠溶液(9 g/L),每日1次,连续干预8周。每周观察小鼠活动状况、体质量以及抓力、抗疲劳能力(滚轮测试)等行为学功能。第24周后取样,采用苏木精-伊红(HE)染色法、尼氏染色法观察各组小鼠脊髓前角组织病理变化,采用Western blot法检测各组小鼠脊髓组织中作用于RNA的腺苷脱氨酶2(ADAR2)、转录反应DNA结合蛋白-43(TDP-43)的蛋白表达量,透射电镜观察小鼠脊髓组织超微结构。结果与对照组比较,模型组小鼠体质量随周龄逐渐增长;与模型组比较,治疗组小鼠体质量降低。与对照组比较,模型组小鼠与治疗组小鼠抗疲劳程度均有所下降,但是治疗组小鼠的抗疲劳能力下降相对模型组有所延缓。与对照组比较,模型组小鼠抓力下降;与模型组比较,治疗组抓力下降相对减缓。与对照组相比,模型组TDP-43表达量显著降低(P<0.001);与模型组相比,治疗组TDP-43表达量显著升高(P<0.05)。与对照组相比,模型组ADAR2表达量显著降低(P<0.01),治疗组与模型组之间ADAR2表达量没有显著差异(P>0.05)。与对照组相比,模型组脊髓前角运动神经元损伤严重,神经元结构不完整;与模型组相比,治疗组神经细胞凋亡数量减少。透射电镜下,模型组与对照组比较出现明显的线粒体肿胀凋亡、髓鞘脱散现象;治疗组与对照组相比较存在部分髓鞘脱散、线粒体肿胀,相对于模型组,存在肿胀凋亡现象的神经细胞数量有所减少。结论健脾补肾方能延缓ALS模型小鼠运动功能的减退,减少脊髓运动神经元的凋� 展开更多

关键词 肌萎缩侧索硬化 健脾补肾方 作用机制 小鼠模型 中药研究

贝伐珠单抗注射液对食蟹猴皮肤伤口愈合的影响 被引量：1

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作者 杨平 崔立 +1 位作者 俞诚 温智越 《实验动物与比较医学》 CAS 2023年第1期21-29,共9页

目的通过观察贝伐珠单抗注射液对食蟹猴背部皮肤伤口愈合速度及损伤皮肤组织中CD34表达的影响,验证贝伐珠单抗注射液对食蟹猴伤口愈合的延迟作用,为临床肿瘤手术患者使用贝伐珠单抗治疗时提供剂量和频次的用药参考。方法6只雄性食蟹猴... 目的通过观察贝伐珠单抗注射液对食蟹猴背部皮肤伤口愈合速度及损伤皮肤组织中CD34表达的影响,验证贝伐珠单抗注射液对食蟹猴伤口愈合的延迟作用,为临床肿瘤手术患者使用贝伐珠单抗治疗时提供剂量和频次的用药参考。方法6只雄性食蟹猴采用背部全层皮肤切除术建立伤口愈合评估模型,随机选取3只食蟹猴作为生理盐水组,其余3只食蟹猴为贝伐珠单抗组。贝伐珠单抗组食蟹猴在手术后第0、4、8、11天静脉注射30 mg/kg贝伐珠单抗注射液,生理盐水组静脉注射等量生理盐水;术后进行血常规检测,并观察各组食蟹猴的伤口愈合情况,Image J软件分析伤口愈合率,用评分法对伤口状态的严重程度进行评价。4周后对6只食蟹猴伤口愈合皮肤取材,通过免疫组织化学法检查皮肤组织中CD34的表达水平。结果成功构建食蟹猴伤口愈合评估模型。术后第3天的食蟹猴血液中白细胞、中性粒细胞数量明显升高(P<0.05),第7天后白细胞数量逐渐恢复正常,而红细胞、血红蛋白、红细胞压积没有明显变化,提示动物营养状态良好。与生理盐水组相比,贝伐珠单抗组的伤口愈合率在术后7 d、28 d明显降低(P<0.01,P<0.001),愈合皮肤组织中CD34表达水平明显降低(P<0.01)。结论贝伐珠单抗注射给药可能通过抑制食蟹猴伤口新生皮肤组织中的微血管生成,延缓伤口愈合。临床中患者手术后使用贝伐珠单抗注射液时应该权衡利弊,科学合理地选择干预时间点、剂量、频次。 展开更多

关键词 贝伐珠单抗注射液 伤口愈合 伤口评分 CD34 食蟹猴

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抗人SIRPα抗体制备及抗肿瘤活性研究

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作者 刘思瑾 李松 +5 位作者 郭慧琴 陈典泽 白星 朱文琪 田文志 喻红 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2023年第16期1795-1800,共6页

目的:制备抗人信号调节蛋白α(signal regulatory protein alpha,SIRPα)抗体并进行抗肿瘤活性评价。方法:通过杂交瘤技术获得高亲和力鼠抗人SIRPα抗体。采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)和毛细管凝胶... 目的:制备抗人信号调节蛋白α(signal regulatory protein alpha,SIRPα)抗体并进行抗肿瘤活性评价。方法:通过杂交瘤技术获得高亲和力鼠抗人SIRPα抗体。采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)和毛细管凝胶电泳检测抗体纯度;采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)及荧光激活细胞分选法(fluorescence activated cell sorting,FACS)检测抗体抗原结合活性及抗体依赖性细胞介导的吞噬(antibody-dependent cell-mediated phagocytosis,ADCP)活性;采用生物干涉膜技术(bio-layer interferometry,BLI)检测嵌合抗体与人SIRPα结合动力学;利用转基因Balb/c小鼠皮下移植CT26-hCD47/hPD-L1肿瘤细胞的模型进行候选抗体药效学评价。结果:制备出纯度高于90%的3种抗体14C4、59G5及4C10。3种抗体都能特异性地与人源不同水平的多基因型SIRPα结合,同时能协同增强Rituximab或IMM40H(CD70抗体)的ADCP活性。体内药效实验显示,抗体14C4与PD-L1抗体联合用药具有显著抑制实体瘤生长的效果。结论:该研究获得了具有高亲和力和特异性结合不同SIRPα并阻断CD47/SIRPα结合的3株抗肿瘤候选抗体。 展开更多

关键词 SIRPα抗体 CD47/SIRPα信号轴 巨噬细胞 吞噬

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