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蓝萼甲素调控NOD样受体蛋白3对大鼠心肌细胞缺血再灌注细胞焦亡的影响
1
作者
席镇
隽兆东
+7 位作者
刘天宇
郝俊文
夏斌
任冠桦
艾合顺
王明玲
刘永新
孙忠东
《中华实验外科杂志》
CAS
北大核心
2023年第3期494-497,共4页
目的探究蓝萼甲素(GLA)调控NOD样受体蛋白3对H9C2心肌细胞缺血再灌注诱发细胞焦亡的影响。方法将H9C2心肌细胞分为对照组(control组);缺氧复氧组(H/R),建立大鼠心肌细胞体外缺血再灌注模型(缺氧4 h,复氧4 h),GLA低剂量(5μmol/L)组和高...
目的探究蓝萼甲素(GLA)调控NOD样受体蛋白3对H9C2心肌细胞缺血再灌注诱发细胞焦亡的影响。方法将H9C2心肌细胞分为对照组(control组);缺氧复氧组(H/R),建立大鼠心肌细胞体外缺血再灌注模型(缺氧4 h,复氧4 h),GLA低剂量(5μmol/L)组和高剂量(10μmol/L)组分别预处理大鼠心肌细胞24 h后,在进行H/R处理。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、检测乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞活性;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测焦亡相关蛋白:NOD样受体蛋白3(NLRP3)、裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cleaved-Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Gasdermin蛋白家族D(GSDMD)以及N端GSDMD(N-Gasdermin D,N-GSDMD)的表达。通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NLRP3 mRNA的表达水平;组间比较采用单因素方差分析。结果H/R组细胞活性低于对照组(1.000比0.401±0.026,F=916.488,P<0.05),GLA低剂量组、高剂量组细胞比H/R组细胞活性高于对照组(0.469±0.014、0.520±0.009比0.401±0.026,F=916.488,P<0.05);Western blot结果显示:NLRP3/β-肌动蛋白(β-actin)在对照组、H/R组、GLA低剂量组和高剂量组中比值分别为0.763±0.103、1.223±0.049、0.820±0.054、0.807±0.161,差异有统计学意义(F=13.093,P<0.05);cleaved-Caspase-1/β-actin在对照组、H/R组、GLA低剂量组和高剂量组中比值分别为0.525±0.050、0.944±0.059、0.789±0.621、0.705±0.069,差异有统计学意义(F=24.900,P<0.05);ASC/β-actin在对照组、H/R组、GLA低剂量组和高剂量组中比值分别为0.630±0.204、1.027±0.235、0.731±0.199、0.652±0.255,差异有统计学意义(F=10.202,P<0.05);GSDMD/β-actin在对照组、H/R组、GLA低剂量组和高剂量组中比值分别为0.640±0.148、1.202±0.173、0.852±0.196、0.638±0.073,差异有统计学意义(F=8.797,P<0.05),N-GSDMD/β-actin在对照组、H/R组、GLA低剂量组和高剂量组中比值分别为0.455±0.083、1.169±0.187、0.936±0.124、0.675±0.171,差异有统计学意义(F=22.2
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关键词
蓝萼甲素
NOD样受体蛋白3
缺血再灌注损伤
细胞焦亡
Gasdermin蛋白家族D
原文传递
热休克蛋白70对H9C2细胞免受氧糖剥夺损伤的保护作用及分子机制
被引量:
1
2
作者
刘天宇
夏斌
+4 位作者
任冠桦
席镇
刘永新
孙忠东
隽兆东
《中华实验外科杂志》
CAS
北大核心
2021年第4期689-691,共3页
目的观察热休克蛋白70(HSP70)在对抗氧糖剥夺中的作用和发挥抗凋亡中的分子机制,寻找HSP70发挥作用的靶点。方法应用转染的技术将质粒和小干扰RNA(siRNA)转染入H9C2细胞内来过表达和沉默HSP70在细胞内的表达,将细胞分为对照组(control组...
目的观察热休克蛋白70(HSP70)在对抗氧糖剥夺中的作用和发挥抗凋亡中的分子机制,寻找HSP70发挥作用的靶点。方法应用转染的技术将质粒和小干扰RNA(siRNA)转染入H9C2细胞内来过表达和沉默HSP70在细胞内的表达,将细胞分为对照组(control组)、缺氧复氧组(H/R组)、过表达组(H/R+HSP70)、过表达阴性对照组(H/R+NC)、沉默组(H/R+siRNA)、沉默阴性对照组[H/R+NC(siRNA)]。建立心肌细胞的缺氧复氧模型。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞凋亡率,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、基质相互作用分子1(STIM1)的RNA表达水平。蛋白质印迹法(Western blot)检测bax、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、基质相互作用分子1(STIM1)的表达,组间比较采用单因素方差分析。结果过表达组的凋亡细胞及凋亡蛋白bax(1.97±0.01)明显低于单纯缺氧复氧组bax(2.15±0.03,F=356.275,P<0.05),差异有统计学意义,而沉默组的凋亡细胞和凋亡蛋白bax(6.09±0.17)明显高于单纯缺氧复氧组bax(2.15±0.03,F=356.275,P<0.05),差异有统计学意义;过表达组STIM1的表达量(3.14±0.14)明显低于单纯缺氧复氧组(4.46±0.20,F=26.602,P<0.05),差异有统计学意义,而沉默组STIM1的表达量(8.58±0.24)明显高于单纯缺氧复氧组(4.46±0.20,F=26.602,P<0.05),差异有统计学意义。结论HSP70可能通过STIM1调节内质网钙失衡发挥抗凋亡作用。
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关键词
热休克蛋白70
心肌缺血
凋亡
基质相互作用分子1
原文传递
题名
蓝萼甲素调控NOD样受体蛋白3对大鼠心肌细胞缺血再灌注细胞焦亡的影响
1
作者
席镇
隽兆东
刘天宇
郝俊文
夏斌
任冠桦
艾合顺
王明玲
刘永新
孙忠东
机构
潍坊
医学院
临床
医学院
潍坊
医学院
麻醉
学院
潍坊
医学院
麻醉
学院
山东省医药卫生临床麻醉重点实验室
潍坊
医学院
第一
附属
医院
心外科
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
北大核心
2023年第3期494-497,共4页
基金
2022年潍坊市科技发展计划项目(医学类)(2022YX081)。
文摘
目的探究蓝萼甲素(GLA)调控NOD样受体蛋白3对H9C2心肌细胞缺血再灌注诱发细胞焦亡的影响。方法将H9C2心肌细胞分为对照组(control组);缺氧复氧组(H/R),建立大鼠心肌细胞体外缺血再灌注模型(缺氧4 h,复氧4 h),GLA低剂量(5μmol/L)组和高剂量(10μmol/L)组分别预处理大鼠心肌细胞24 h后,在进行H/R处理。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、检测乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞活性;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测焦亡相关蛋白:NOD样受体蛋白3(NLRP3)、裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cleaved-Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Gasdermin蛋白家族D(GSDMD)以及N端GSDMD(N-Gasdermin D,N-GSDMD)的表达。通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NLRP3 mRNA的表达水平;组间比较采用单因素方差分析。结果H/R组细胞活性低于对照组(1.000比0.401±0.026,F=916.488,P<0.05),GLA低剂量组、高剂量组细胞比H/R组细胞活性高于对照组(0.469±0.014、0.520±0.009比0.401±0.026,F=916.488,P<0.05);Western blot结果显示:NLRP3/β-肌动蛋白(β-actin)在对照组、H/R组、GLA低剂量组和高剂量组中比值分别为0.763±0.103、1.223±0.049、0.820±0.054、0.807±0.161,差异有统计学意义(F=13.093,P<0.05);cleaved-Caspase-1/β-actin在对照组、H/R组、GLA低剂量组和高剂量组中比值分别为0.525±0.050、0.944±0.059、0.789±0.621、0.705±0.069,差异有统计学意义(F=24.900,P<0.05);ASC/β-actin在对照组、H/R组、GLA低剂量组和高剂量组中比值分别为0.630±0.204、1.027±0.235、0.731±0.199、0.652±0.255,差异有统计学意义(F=10.202,P<0.05);GSDMD/β-actin在对照组、H/R组、GLA低剂量组和高剂量组中比值分别为0.640±0.148、1.202±0.173、0.852±0.196、0.638±0.073,差异有统计学意义(F=8.797,P<0.05),N-GSDMD/β-actin在对照组、H/R组、GLA低剂量组和高剂量组中比值分别为0.455±0.083、1.169±0.187、0.936±0.124、0.675±0.171,差异有统计学意义(F=22.2
关键词
蓝萼甲素
NOD样受体蛋白3
缺血再灌注损伤
细胞焦亡
Gasdermin蛋白家族D
Keywords
Glaucocalyxin A
Nod-like receptor protein 3
Ischemia and reperfusion
Pyroptosis
Gasdermin D
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
原文传递
题名
热休克蛋白70对H9C2细胞免受氧糖剥夺损伤的保护作用及分子机制
被引量:
1
2
作者
刘天宇
夏斌
任冠桦
席镇
刘永新
孙忠东
隽兆东
机构
维坊
医学院
临床
医学院
潍坊
医学院
麻醉
学院
潍坊
医学院
第一
附属
医院
心外科
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
北大核心
2021年第4期689-691,共3页
文摘
目的观察热休克蛋白70(HSP70)在对抗氧糖剥夺中的作用和发挥抗凋亡中的分子机制,寻找HSP70发挥作用的靶点。方法应用转染的技术将质粒和小干扰RNA(siRNA)转染入H9C2细胞内来过表达和沉默HSP70在细胞内的表达,将细胞分为对照组(control组)、缺氧复氧组(H/R组)、过表达组(H/R+HSP70)、过表达阴性对照组(H/R+NC)、沉默组(H/R+siRNA)、沉默阴性对照组[H/R+NC(siRNA)]。建立心肌细胞的缺氧复氧模型。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞凋亡率,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、基质相互作用分子1(STIM1)的RNA表达水平。蛋白质印迹法(Western blot)检测bax、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、基质相互作用分子1(STIM1)的表达,组间比较采用单因素方差分析。结果过表达组的凋亡细胞及凋亡蛋白bax(1.97±0.01)明显低于单纯缺氧复氧组bax(2.15±0.03,F=356.275,P<0.05),差异有统计学意义,而沉默组的凋亡细胞和凋亡蛋白bax(6.09±0.17)明显高于单纯缺氧复氧组bax(2.15±0.03,F=356.275,P<0.05),差异有统计学意义;过表达组STIM1的表达量(3.14±0.14)明显低于单纯缺氧复氧组(4.46±0.20,F=26.602,P<0.05),差异有统计学意义,而沉默组STIM1的表达量(8.58±0.24)明显高于单纯缺氧复氧组(4.46±0.20,F=26.602,P<0.05),差异有统计学意义。结论HSP70可能通过STIM1调节内质网钙失衡发挥抗凋亡作用。
关键词
热休克蛋白70
心肌缺血
凋亡
基质相互作用分子1
Keywords
Heat shock protein 70
Myocardial ischemia
Apoptosis
Stromal interaction molecule 1
分类号
R541 [医药卫生—心血管疾病]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蓝萼甲素调控NOD样受体蛋白3对大鼠心肌细胞缺血再灌注细胞焦亡的影响
席镇
隽兆东
刘天宇
郝俊文
夏斌
任冠桦
艾合顺
王明玲
刘永新
孙忠东
《中华实验外科杂志》
CAS
北大核心
2023
0
原文传递
2
热休克蛋白70对H9C2细胞免受氧糖剥夺损伤的保护作用及分子机制
刘天宇
夏斌
任冠桦
席镇
刘永新
孙忠东
隽兆东
《中华实验外科杂志》
CAS
北大核心
2021
1
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