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乳腺癌上皮-间质转化后引发BCRP介导的多药耐药的研究 被引量：15
1
作者 陈伟娟 王辉 +3 位作者 唐勇 刘传亮 李洪利 李文通 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第2期159-165,共7页
背景与目的:研究发现肿瘤的侵袭浸润和转移增强是上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)所致,而EMT的发生也与肿瘤细胞多药耐药现象的发生密切相关。本研究通过分析乳腺癌组织和细胞中EMT与乳腺癌耐药蛋白表达的相关性... 背景与目的:研究发现肿瘤的侵袭浸润和转移增强是上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)所致,而EMT的发生也与肿瘤细胞多药耐药现象的发生密切相关。本研究通过分析乳腺癌组织和细胞中EMT与乳腺癌耐药蛋白表达的相关性,探讨EMT对乳腺癌中乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistant protein,BCRP)介导多药耐药的影响。方法:免疫组织化学方法检测乳腺癌组织中Snail、BCRP的表达;构建Snail真核表达载体pCDNA3.1-Snail,转染至MCF-7细胞,采用免疫荧光、Westernblot、Real-timePCR检测转录抑制因子snail、上皮标志物E-钙粘素、间质标志物vimentin以及多药耐药蛋白BCRP的表达;MTT法检测细胞对米托蒽醌的耐药指数。结果:免疫组化结果显示乳腺癌组织中Snail、BCRP的表达呈显著相关;免疫荧光、Westernblot、Real-timePCR显示与亲本MCF-7细胞相比,转染Snail后的MCF-7细胞中E-cadherin表达水平明显降低,而snail、vimentin和BCRP的表达水平明显增加;MTT结果显示细胞对米托蒽醌的耐药指数增加至9.93。结论:转染snail真核表达载体pCDNA3.1-snail可使乳腺癌MCF-7细胞发生EMT,并导致细胞中BCRP表达增加,引发BCRP介导的多药耐药。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 多药耐药 上皮-间质转化
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EMT经p38-MAPK调节乳腺癌MCF-7细胞P-gp介导的多药耐药 被引量：4
2
作者 唐勇 王辉 +3 位作者 陈伟娟 李文通 李洪利 赵修世 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期144-148,共5页
目的:探讨乳腺癌细胞中上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与P-糖蛋白(P-glucoprotein,P-gp)介导的多药耐药(multidrug resistance,MDR)的关系及其可能的机制。方法:将携Snail基因的真核表达载体pcDNA-Snail转染人乳... 目的:探讨乳腺癌细胞中上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与P-糖蛋白(P-glucoprotein,P-gp)介导的多药耐药(multidrug resistance,MDR)的关系及其可能的机制。方法:将携Snail基因的真核表达载体pcDNA-Snail转染人乳腺癌细胞MCF-7,用多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导各组细胞耐药。免疫细胞荧光检测上皮标志物E-钙黏素(E-cadherin)、间质标志物波形蛋白(vimentin)以及P-gp的表达,MTT检测耐药细胞的增殖,RT-PCR检测Snail、MDR1、p38-MAPK mRNA的表达。结果:细胞免疫荧光显示,转染pcDNA-Snail载体后,MCF-7细胞发生EMT,E-cadherin表达显著降低,vimentin表达显著升高;P-gp在发生EMT的MCF-7细胞中表达显著升高。经DOX诱导,MCF-7/Snail细胞的耐药能力较MCF-7/DOX细胞显著增强(P<0.05)。RT-PCR显示,MCF-7细胞发生EMT后,p38-MAPK表达显著升高(P<0.05),MDR1表达较亲本细胞明显升高(P<0.01)。结论:MCF-7细胞发生EMT后,可能通过p38-MAPK引发P-gp介导的MDR。 展开更多
关键词 SNAIL基因 乳腺肿瘤 上皮间质转化 多药耐药 P-糖蛋白
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Snail增强乳腺癌细胞MCF-7中P-gp介导的多药耐药 被引量：4
3
作者 刘传亮 王辉 +4 位作者 陈伟娟 王晓杰 李洪利 赵修世 李文通 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期87-90,共4页
目的探讨乳腺癌细胞中Snail过表达与P-gp之间的关系,揭示EMT对乳腺癌细胞多药耐药的影响。方法构建Snail真核表达载体pCDNA3.1-Snail,将载体转染人乳腺癌细胞MCF-7后用阿霉素对细胞进行诱导。利用细胞毒性实验(MTT)、阿霉素外排实验对... 目的探讨乳腺癌细胞中Snail过表达与P-gp之间的关系,揭示EMT对乳腺癌细胞多药耐药的影响。方法构建Snail真核表达载体pCDNA3.1-Snail,将载体转染人乳腺癌细胞MCF-7后用阿霉素对细胞进行诱导。利用细胞毒性实验(MTT)、阿霉素外排实验对耐药细胞系的耐药状况进行评价;通过流式细胞术和Real-time PCR分别测量耐药细胞系中P-gp和MDR1 mRNA,Snail mRNA的表达。结果由细胞毒性实验和阿霉素外排实验的结果显示,MCF-7/Snail细胞经阿霉素诱导后相对耐药指数升高至109.2,细胞内荧光强度降至7.1(P<0.05);Real-time PCR显示相对于MCF-7,MCF-7/Snail细胞中的MDR1 mRNA,Snail mRNA的表达明显升高与流式细胞术显示的P-gp升高相一致。结论转染Snail真核表达载体后,MCF-7/Snail细胞的耐药性较MCF-7细胞明显升高。 展开更多
关键词 多药耐药 SNAIL 乳腺癌 P糖蛋白 基因克隆 上皮间质转化
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流体剪切应力对肝星状细胞的活化和相关基因表达的影响 被引量：1
4
作者 崔晓栋 尹青令 +5 位作者 张晓芸 李宏 官秀梅 李鑫 王建英 成敏 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2012年第32期3135-3139,共5页
目的:探讨不同大小的流体剪切应力对大鼠肝星状细胞株HSC-T6的活化和基因表达的影响.方法:对种植于鼠尾胶原上的HSC-T6细胞施以剪切应力处理,剪切应力的大小分别为6、12、20dyn/cm2,干预时间为3h.TRIzol法提取mRNA,采用SYBR Green荧光定... 目的:探讨不同大小的流体剪切应力对大鼠肝星状细胞株HSC-T6的活化和基因表达的影响.方法:对种植于鼠尾胶原上的HSC-T6细胞施以剪切应力处理,剪切应力的大小分别为6、12、20dyn/cm2,干预时间为3h.TRIzol法提取mRNA,采用SYBR Green荧光定量RT-PCR方法分别检测各组-SMA、Collogen-Ⅰ、Collogen-Ⅲ、MMP-2及MMP-9基因的表达情况,流式细胞术检测细胞内蛋白-SMA的表达.结果:剪切应力处理3h后,与对照组相比,6dyn/cm2剪切应力组-SMA、Collogen-Ⅲ的表达降低,但随着剪切应力的增加(12dyn/cm2、20dyn/cm2),-SMAmRNA较对照组表达升高;20dyn/cm2剪切应力组Collogen-Ⅲ基因表达较对照组升高;3种剪切应力组之间Collogen-ⅠmRNA的表达无统计学差异;3种剪切应力均上调MMP-2mRNA的表达.结论:低剪切应力对HSC-T6的活化有一定的抑制作用,相反高剪切应力可以促进HSC-T6的活化,促进Collogen-Ⅲ、MMP-2的表达. 展开更多
关键词 肝星状细胞 剪切应力 肝纤维化
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Snail促进乳腺癌MCF-7细胞移植瘤对多柔比星的耐药及其机制
5
作者 王琳 李洪利 +4 位作者 赵修世 赵云 赵一诺 李文通 张式暖 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期38-41,共4页
目的:探讨Snail在乳腺癌MCF-7细胞移植瘤对多柔比星耐药中的作用及其可能的机制。方法:构建Snail基因真核表达载体pcDNA3.1-Snail,转染至MCF-7细胞,筛选稳定表达Snail的MCF-7/Snail细胞,以转染空质粒pcDNA3.1的MCF-7细胞(MCF-7/pcDNA)... 目的:探讨Snail在乳腺癌MCF-7细胞移植瘤对多柔比星耐药中的作用及其可能的机制。方法:构建Snail基因真核表达载体pcDNA3.1-Snail,转染至MCF-7细胞,筛选稳定表达Snail的MCF-7/Snail细胞,以转染空质粒pcDNA3.1的MCF-7细胞(MCF-7/pcDNA)为对照。构建小鼠MCF-7/Snail及MCF-7/pcDNA细胞移植瘤模型,注射多柔比星,观测移植瘤生长,计算抑瘤率。免疫组织化学方法检测移植瘤组织中Snail、多药耐药基因-1(multidrug resistance-1,MDR-1)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达。结果:成功构建pcDNA3.1-Snail表达载体,转染MCF-7细胞后获得MCF-7/Snail和MCF-7/pcDNA细胞,并制备小鼠移植瘤。多柔比星治疗后,MCF-7/Snail细胞移植瘤的瘤重明显高于MCF-7/pcDNA细胞移植瘤[(1.413±0.674)g vs(1.257±0.576)g,P<0.05],多柔比星对MCF-7/Snail移植瘤抑瘤率明显低于MCF-7/pcDNA移植瘤(18.42%vs30.18%,P<0.05),MCF-7/Snail细胞移植瘤的组织中Snail、MDR-1、MMP-9的表达均显著高于MCF-7/pcDNA移植瘤(408.08±20.39vs67.67±16.56,363.50±26.56vs55.08±12.23,396.25±16.03vs56.92±7.35;均P<0.01),且Snail与MDR-1和MMP-9的表达均呈正相关(r1=0.89,P<0.01;r2=0.81,P<0.01)。结论:Snail促进乳腺癌MCF-7细胞移植瘤对多柔比星的耐药,其机制与增强MDR-1和MM9-9表达有关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 多柔比星 SNAIL MDR-1 MMP-9
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