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miR-200b通过靶向CD133抑制胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞的生长 被引量：8
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作者 赵文健 杨亮 何汉江 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期231-237,共7页
目的 :明确微RNA(microRNA,miRNA)miR-200b是否能通过靶向调控CD133的表达而抑制胶质瘤细胞生长和侵袭的能力,从而揭示miR-200b在抑制肿瘤生长中的分子机制。方法 :首先构建CD133 mRNA3’-非翻译区(3’-untranslated region,3’-UTR)荧... 目的 :明确微RNA(microRNA,miRNA)miR-200b是否能通过靶向调控CD133的表达而抑制胶质瘤细胞生长和侵袭的能力,从而揭示miR-200b在抑制肿瘤生长中的分子机制。方法 :首先构建CD133 mRNA3’-非翻译区(3’-untranslated region,3’-UTR)荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告系统观察miR-200b对CD133 mRNA 3’-UTR荧光素酶活性的影响;随后采用脂质体法将miR-200b模拟物(mimics)转入胶质瘤U251细胞中,同时以转入CD133-小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)为阳性对照;采用蛋白质印迹法检测CD133蛋白表达水平的改变;MTS法检测miR-200b mimics对U251细胞增殖活性的影响,Transwell小室法检测对细胞袭侵袭能力的影响;最后,通过干细胞成球实验检测miR-200b mimics对胶质瘤U251干细胞微球体形成的影响。结果 :双荧光素酶报告检测结果显示,miR-200b能特异性地与CD133 mRNA 3’-UTR结合,抑制其荧光素酶的活性。过表达miR-200b的U251细胞中CD133蛋白表达水平明显降低,可显著抑制U251细胞的侵袭能力,而过表达CD133可拮抗miR-200b对U251细胞增殖和侵袭的影响;干细胞成球实验证实,miR-200b能抑制胶质瘤U251干细胞的微球体形成能力。结论 :miR-200b通过靶向调控CD133的表达而抑制胶质瘤细胞增殖、侵袭及干细胞的形成。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 微RNA 受体 细胞表面 细胞增殖 细胞迁移分析
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