目的探讨蛋白酶体抑制剂(EPO)诱导前列腺癌DU145细胞凋亡机制是否与内质网应激(Er-stress)有关。方法用不同浓度的EPO处理DU145细胞,MTS检测细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测Er-stress...目的探讨蛋白酶体抑制剂(EPO)诱导前列腺癌DU145细胞凋亡机制是否与内质网应激(Er-stress)有关。方法用不同浓度的EPO处理DU145细胞,MTS检测细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测Er-stress相关分子同源蛋白质(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、X盒结合蛋白1(XBP-1)、剪接型X盒结合蛋白1信使核糖核酸(XBP-1s m RNA);Western blot检测CHOP和GRP78的表达。结果 EPO抑制DU145细胞生长,并且呈现浓度梯度依赖性,处理组细胞凋亡率高于未处理组,高剂量组凋亡率高于低剂量组。EPO处理后,CHOP、剪接型X盒结合蛋白1(XBP-1s)、GRP78 m RNA明显升高,72 h最明显。低剂量组与高剂量组48 h CHOP和XBP-1s的表达比较差异均有统计学意义,两组48和72 h GRP78比较差异均有统计学意义。EPO处理后,XBP-1和XBP-1s基因转录水平升高,而XBP-1s随处理时间增长基因转录水平变化不明显。EPO处理后,CHOP和GRP78不断增加,72 h两种蛋白质均达到最高值,并且低剂量组与高剂量组在72 h比较差异有统计学意义。结论 EPO能抑制DU145细胞生长,诱导凋亡,其机制可能与激活Er-stress,诱发内质网的相关分子CHOP、XBP-1s、XBP-1、GRP78的表达有关。展开更多
目的:探讨糖尿病与非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)临床病理因素的关系及对放射性肺炎发生率的影响。方法:回顾性分析2007年1月至2009年8月入住中南大学湘雅三医院肿瘤科的332例NSCLC患者的临床资料,将其分为糖尿病(dia...目的:探讨糖尿病与非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)临床病理因素的关系及对放射性肺炎发生率的影响。方法:回顾性分析2007年1月至2009年8月入住中南大学湘雅三医院肿瘤科的332例NSCLC患者的临床资料,将其分为糖尿病(diabetesmellitus,DM)组(n=45)和非糖尿病(non-diabetesmellitus,NDM)组(n=287),比较两组间临床病理因素的差异;并将其中接受放射治疗的216例患者分为糖尿病放射组(DMR组,n=33)和非糖尿病放射组(NDMR组,n=183),比较两组放射性肺炎发生率的差异。结果:DM组与NDM组患者在体质量指数(bodymass index,BMI)、年龄、是否合并高血压方面差异均有统计学意义(P<0.05);两组在肿瘤病理类型、分化程度、TNM分期方面差异均无统计学意义(P>0.05)。接受放射治疗的DMR组和NDMR组患者照射面积差异无统计学意义(P>0.05),但放射性肺炎的发生率分别为42.42%和21.31%,差异有统计学意义(P<0.05);伴有糖尿病的NSCLC患者放射性肺炎的发病危险是非糖尿病组的2.721倍(95%CI为1.253～5.910)。结论:糖尿病为NSCLC患者发生放射性肺炎的易感因素。展开更多
文摘目的探讨蛋白酶体抑制剂(EPO)诱导前列腺癌DU145细胞凋亡机制是否与内质网应激(Er-stress)有关。方法用不同浓度的EPO处理DU145细胞,MTS检测细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测Er-stress相关分子同源蛋白质(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、X盒结合蛋白1(XBP-1)、剪接型X盒结合蛋白1信使核糖核酸(XBP-1s m RNA);Western blot检测CHOP和GRP78的表达。结果 EPO抑制DU145细胞生长,并且呈现浓度梯度依赖性,处理组细胞凋亡率高于未处理组,高剂量组凋亡率高于低剂量组。EPO处理后,CHOP、剪接型X盒结合蛋白1(XBP-1s)、GRP78 m RNA明显升高,72 h最明显。低剂量组与高剂量组48 h CHOP和XBP-1s的表达比较差异均有统计学意义,两组48和72 h GRP78比较差异均有统计学意义。EPO处理后,XBP-1和XBP-1s基因转录水平升高,而XBP-1s随处理时间增长基因转录水平变化不明显。EPO处理后,CHOP和GRP78不断增加,72 h两种蛋白质均达到最高值,并且低剂量组与高剂量组在72 h比较差异有统计学意义。结论 EPO能抑制DU145细胞生长,诱导凋亡,其机制可能与激活Er-stress,诱发内质网的相关分子CHOP、XBP-1s、XBP-1、GRP78的表达有关。
文摘目的探讨LncRNA MIR4435-2HG对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及作用机制。方法培养正常人胃黏膜上皮细胞GES-1和胃癌细胞系AGS、SGC7901、BGC823和BGC803,AGS细胞分为对照组(正常培养细胞)、si-con组(转染乱序无意义阴性序列)、si-MIR4435-2HG组(转染MIR4435-2HG小干扰RNA)、miR-con组(转染模拟物对照序列)、miR-138-5p组(转染miR-138-5p模拟物)、si-HMGA1组(转染HMGA1小干扰RNA)、si-MIR4435-2HG+pcDNA组(共转染MIR4435-2HG小干扰RNA与空载体)和si-MIR4435-2HG+pcDNA-HMGA1组(共转染MIR4435-2HG小干扰RNA与HMGA1过表达载体)。qRT-PCR检测细胞中MIR4435-2HG和高迁移率族蛋白A1(HMGA1)mRNA表达,Western blot检测细胞中HMGA1蛋白表达。双荧光素酶实验验证AGS细胞中MIR4435-2HG与miR-138-5p以及miR-138-5p与HMGA1之间关系。MTT检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测Ki67、CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达。裸鼠分为对照组(接种正常培养的AGS细胞)、sh-MIR4435-2HG组(接种转染携带MIR4435-2HG基因短发夹RNA慢病毒的AGS细胞)和sh-con组(接种转染携带无关序列片段shRNA慢病毒的AGS细胞),接种21 d后测量肿瘤重量,观察MIR4435-2HG对裸鼠移植瘤生长的影响。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验。结果与GES-1细胞比较,胃癌细胞AGS、SGC7901、BGC823、BGC803中MIR4435-2HG表达水平升高,HMGA1 mRNA和蛋白表达水平升高(P均<0.05),选择AGS细胞进行后续实验。MIR4435-2HG靶向负调控miR-138-5p表达,miR-138-5p靶向负调控HMGA1表达。与si-con组比较,si-MIR4435-2HG组AGS细胞48 h OD值(1.13±0.12比0.86±0.09)、迁移数量[(179.23±18.01)个比(60.15±6.05)个]、侵袭数量[(81.26±8.16)个比(25.64±2.59)个]、Ki67、CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达水平均降低(P均<0.05)。与miR-con组比较,miR-138-5p组AGS细胞48 h OD值(1.28±0.13比0.85±0.09)、迁移数量[(178.26±17.59)个比(69.35±
