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题名大鼠脂肪源性干细胞来源的施万细胞特性分析
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作者
郑玲
邓佳茜
胡莹
刘杏
管海辰
饶利兵
鞠晓军
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机构
湖南医药学院临床技能实训中心
湖南医药学院人体解剖学教研室
湖南医药学院影像诊断教研室
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出处
《解剖学研究》
CAS
2023年第5期405-410,共6页
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基金
湖南省教育厅科学研究项目(湘教通[2022]323号-22B1033)
湖南省教育厅大学生创新创业训练计划项目(湘教通[2020]191号-4272)
湖南省中医药科研计划项目(湘中医药[2021]2号-2021095)。
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文摘
目的探讨脂肪源性干细胞(ADSCs)及其分化的施万细胞(SCs)在形态、活性和标志物表达上的区别。方法取SD大鼠腹股沟处脂肪制备ADSCs,用流式细胞术检测细胞表面标志;钙钴金属盐沉淀法检测碱性磷酸酶(ALP),茜素红染色观察矿化结节;油红O染色观察脂滴;随机分对照组和诱导组,加入条件培养基向SCs诱导分化;MTT法检测诱导后第2、4、6和8 d各时间点的细胞活性;扫描电镜及免疫染色观察S100的表达。结果光镜下可见ADSCs呈梭形贴壁生长;ADSCs表达抗原分化簇90(CD90)和抗原分化簇105(CD105),不表达抗原分化簇45(CD45);成骨诱导后可见ALP呈强阳性表达,茜素红染色可见橘红色矿化结节,油红O染色可见胞内红染脂滴聚集;向SCs诱导后第4 d,可见多数细胞呈纺锤形,第8 d纺锤状细胞增多;MTT检测显示第4 d诱导组的吸光度明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);组内相比,诱导组和对照组的吸光度均随着时间的延长而逐渐增大,差异有统计学意义(P<0.05);第6、第8 d诱导组与对照组吸光度差异无统计学意义(P>0.05);扫描电镜可见诱导后第8 d细胞细长,细胞外成分多,S100阳性表达;ADSCs表面呈山脊状,纤毛密集,细胞外成分少,不表达S100。结论ADSCs与其分化的SCs形态差异显著,分化而来的SCs活性良好,表达SCs标志蛋白。
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关键词
脂肪源性干细胞
诱导分化
施万细胞
大鼠
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Keywords
Adipose-derived stem cells
Induced differentiation
Schwann cells
Rat
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分类号
R329.2
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名脂肪源性干细胞向成纤维细胞的分化
被引量：2
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作者
鞠晓军
牛友芽
饶利兵
易黎明
向莎
张英俊
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机构
湖南医药学院人体解剖学教研室
湖南医药学院细胞学与遗传学教研室
湖南医药学院影像诊断学教研室
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出处
《解剖学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期513-519,共7页
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基金
湖南省教育厅科学研究项目(湘教通〔2019〕353号-19C1340)
湖南省自然科学基金(2019JJ40202)。
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文摘
目的探讨脂肪源性干细胞(ADSCs)向成纤维细胞分化的可能,为解决皮肤组织工程种子细胞提供有效途径。方法取健康成年SD大鼠10只,体重280~320 g,雌雄不限,麻醉、脱毛、消毒,于腹股沟处获取脂肪后进行ADSCs的体外分离、培养和传代,观察原代细胞的生长特点;取第3代细胞,成骨诱导后第16天行碱性磷酸酶(ALP)检测,成骨诱导后第23天行茜素红染色,成脂诱导后第12天行油红O染色;流式细胞术检测细胞表面标志;加入条件培养基向成纤维细胞诱导分化,于诱导后第2天、第4天、第6天、第8天摄片记录细胞形态变化过程,MTT检测各时相点的细胞活性;诱导后第6天和第8天行扫描电子显微镜检测;诱导后第8天行免疫细胞化学染色,检测成纤维细胞主要标志物波形蛋白(vimentin)的表达。结果原代ADSCs呈长梭形贴壁生长,成骨诱导后可见ALP强阳性表达,茜素红染色可见红色矿化结节;成脂诱导后可见胞内红染脂滴聚集;流式细胞术检测显示,间充质干细胞相关标志物CD90阳性表达,造血干细胞标记物CD45呈阴性表达;ADSCs向成纤维细胞诱导后第2天可见形态开始改变,部分细胞漂浮;诱导后第4天细胞呈水滴形或短棒状;诱导后第6天细胞呈有突起的多边形或三角形混杂;诱导后第8天细胞拥挤并铺满瓶底,呈细长纤维状;MTT检测表明,诱导后第2天的细胞活性要显著低于对照组(P<0.01);诱导后第4天、第6天和第8天细胞活性与对照组均无明显差异(P>0.05);扫描电子显微镜检测可见,诱导后第6天细胞呈三角形,表面纤毛较多;诱导后第8天细胞呈细长纤维状,有小突起,表面纤毛密集;诱导后第8天绝大多数细胞vimentin呈阳性表达。结论ADSCs在体外经诱导分化后可以具备成纤维细胞的形态特征;能表达成纤维细胞的标志蛋白。
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关键词
脂肪源性干细胞
诱导分化
组织工程
流式细胞术
扫描电子显微术
大鼠
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Keywords
Adipose-derived stem cell
Induced differentiation
Tissue Engineering
Flow cytometry
Scanning electron microscopy
Rat
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分类号
R3
[医药卫生—基础医学]
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