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精细定位和克隆9p21-22区域内鼻咽癌候选抑瘤基因 被引量:34
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作者 阳剑波 宾亮华 +7 位作者 李忠花 张小慧 钱骏 张必成 周鸣 谢奕 邓龙文 李桂源 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第1期6-9,共4页
目的:进一步精细限定鼻咽癌9p21-22区域等位基因杂合性丢失的频率和范围,筛选和克隆其共同缺失区内鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法:应用11个定位于 9p21-22区域的高密度微卫星位点,检测 25例低分化鼻咽癌患者的... 目的:进一步精细限定鼻咽癌9p21-22区域等位基因杂合性丢失的频率和范围,筛选和克隆其共同缺失区内鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法:应用11个定位于 9p21-22区域的高密度微卫星位点,检测 25例低分化鼻咽癌患者的杂合性丢失,确定其共同缺失区;用RT-PCR和Northern筛出在鼻咽癌细胞株HNE1和鼻咽癌活检组织中表达下调的、定位于共同缺失区内的 3’末端ESTs(Express Sequence Tags);采用 RACE技术和生物信息学资源克隆出候选EST的全长cDNA。结果: 25例患者中有17例(68%)存在一个或多个位点的杂合性丢失,其中D9s161(35.0%,7/20),D9S1678(31.5%,6/19),D9S263(3.3%,6/18)和D9S1853(33.3%,7/21)四个紧邻位点的丢失频率相对较高,并发现六位患者在该四个位点表现为连续性缺失;筛选D9S161-D9S1853区域内25个代表新基因的3’末端ESTs序列,发现一个EST(dbEST:208825)在鼻咽癌细胞株HNE1及73%(11/15)的活检组织中表达降低, Multiple Tissue Nort 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 染色体 9p21-22 杂合性丢失 克隆
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一个新鼻咽癌抑瘤候选基因的克隆及其功能初步分析 被引量:32
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作者 余鹰谢 奕曹利 +3 位作者 张必成 周鸣 李桂源 public.cs.hn.cn 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第3期319-324,共6页
从cDNA代表差异分析法 (cDNArepresentationaldifferenceanalysis ,cDNARDA)分离的新cDNA片段入手 ,进一步采用RT PCR验证 ,其中发现AF152 60 5片段在 74 %鼻咽癌 (nasopharyngealcarcinoma ,NPC)活检组织中表达下调和缺失 ,DNA印迹显... 从cDNA代表差异分析法 (cDNArepresentationaldifferenceanalysis ,cDNARDA)分离的新cDNA片段入手 ,进一步采用RT PCR验证 ,其中发现AF152 60 5片段在 74 %鼻咽癌 (nasopharyngealcarcinoma ,NPC)活检组织中表达下调和缺失 ,DNA印迹显示其代表一转录本为 2 1kb的基因 ,结合生物信息学 ,运用文库筛选克隆该基因 ,命名为NAG4基因 ,GenBank登录号AF1792 85,定位于 6q2 2 1~ 2 2 33 ,至少含有两个外显子 ,并在第一外显子的上游有TATA盒样序列 ,编码一个 50 8个氨基酸组成的、分子质量为 57 4ku的蛋白质 ;功能预测NAG4基因产物与小鼠溴区蛋白BP75有 84 %同源 ,是含有多个磷酸化位点和溴区结构域的核内转录因子 ;突变分析表明NAG4基因在HeLa细胞株中发生整码突变 .以上结果说明NAG4基因是鼻咽癌抑瘤基因的良好候选者 。 展开更多
关键词 抑瘤基因 鼻咽癌 基因克隆 CDNARDA
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兔实验性急性高眼压模型视网膜谷氨酸的变化 被引量:25
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作者 王平宝 蒋幼芹 +1 位作者 黄佩刚 陈主初 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期378-380,共3页
目的 研究兔实验性急性高眼压状态下视网膜谷氨酸含量的变化 ,探讨谷氨酸在青光眼视神经损害中的作用。方法 应用邻苯二甲醛衍生法、高效液相色谱仪测定视网膜谷氨酸的含量。将 18只大白兔分成 3组 ,其中 2个实验组 ,1个正常对照组 ,... 目的 研究兔实验性急性高眼压状态下视网膜谷氨酸含量的变化 ,探讨谷氨酸在青光眼视神经损害中的作用。方法 应用邻苯二甲醛衍生法、高效液相色谱仪测定视网膜谷氨酸的含量。将 18只大白兔分成 3组 ,其中 2个实验组 ,1个正常对照组 ,每组均 6只兔 (6只眼 )。实验 1组 :每只兔随机选取 1只眼行生理盐水前房内高压灌注 ,6 0mmHg(1mmHg=0 .133kPa)持续 4h。另 1只眼生理盐水前房内灌注 ,方法同前 ,但压力为 2 0mmHg作自身对照。实验 2组 :每只兔随机选 1只眼用 30mmHg压力前房生理盐水灌注 ,另 1只眼 2 0mmHg灌注作自身对照 ,持续 4h。正常对照组不做前房灌注 ,每只兔任选 1只眼。以上各组均在摘除眼球后做视网膜谷氨酸测定。结果 实验 1、2组兔的高眼压眼 (6 0mmHg,30mmHg)均较对侧眼 (2 0mmHg)谷氨酸水平明显增高 (P <0 .0 5 )。结论 急性高眼压可导致视网膜谷氨酸水平增高 。 展开更多
关键词 谷氨酸 视网膜 青光眼 急性高眼压
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益气解毒片对鼻咽癌细胞端粒酶和端粒酶RNA抑制作用的实验研究 被引量:20
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作者 唐发清 田道法 +2 位作者 易红 谌兵来 吴尚辉 《湖南中医学院学报》 2000年第1期15-17,共3页
为研究益气解毒片对鼻咽癌细胞端粒酶和端粒酶 RNA的影响,先用 MTT法检测其杀伤鼻咽癌细胞(HNEI)的半抑制浓度(IC_(50)),再用10×IC_(50)、1×IC_(50)、0.5×IC_(50)作用 HNE1 ... 为研究益气解毒片对鼻咽癌细胞端粒酶和端粒酶 RNA的影响,先用 MTT法检测其杀伤鼻咽癌细胞(HNEI)的半抑制浓度(IC_(50)),再用10×IC_(50)、1×IC_(50)、0.5×IC_(50)作用 HNE1 12 h、24 h、48 h、72 h、96 h,然后检测HNE1端粒酶(Telomerase)活性和端粒酶RNA的表达。结果:10×IC_(50)作用 HNE1 24 h,端粒酶活性下降为阴性,同时端粒酶RNA的表达受到抑制;1×IC_(50)作用后,端粒酶活性稍有下调,但端粒酶RNA表达无明显改变;0.1×IC_(50)作用后,端粒酶活性没有明显变化,但低于白空对照组。这提示较高浓度益气解毒片在体外能抑制端粒酶的活性和端粒酶 RNA表达,可能通过对鼻咽癌细胞及其端粒酶的活性抑制而发挥抑瘤效应。 展开更多
关键词 益气解毒片 端粒酶 端粒酶RNA 鼻咽癌 实验研究
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cDNA代表性差异分析法分离鼻咽癌上皮细胞株HNE_1表达差异cDNA序列的初步研究 被引量:26
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作者 湛凤凰 江宁 +5 位作者 曹利 邓龙文 谭国林 周鸣 谢奕 李桂源 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期341-344,共4页
目的寻找鼻咽癌中差异性表达基因,包括与鼻咽癌发病相关的候选抑瘤基因。方法应用cDNA代表性差异分析法(RDA),分离原代培养的正常人鼻咽上皮细胞与鼻咽癌细胞株HNE1中差异表达的cDNA序列,Southern杂交和N... 目的寻找鼻咽癌中差异性表达基因,包括与鼻咽癌发病相关的候选抑瘤基因。方法应用cDNA代表性差异分析法(RDA),分离原代培养的正常人鼻咽上皮细胞与鼻咽癌细胞株HNE1中差异表达的cDNA序列,Southern杂交和Northern杂交被用来分析差异性表达产物的来源,最后,将这些序列克隆到pGEM-Teasy载体中,并用链终止法测序。结果在第4轮杂交及扩增反应后,获得4条差异性条带。Southern杂交及Northern杂交证明,这些差异性片段来自作为“检测”扩增子的正常人鼻咽上皮,在鼻咽癌细胞株HNE1中不表达或表达降低。序列分析这些差异性片段的克隆,发现一些序列是与已知基因高度同源的基因,包括一些看家基因;另有一些基因则为新基因序列。结论鼻咽癌的发生是一个多基因参与的过程,所获得的差异性片段中,与之同源的一些已知基因具有抑瘤功能。 展开更多
关键词 鼻咽癌 抑瘤基因 CDNA 差异分析法
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鼻咽癌研究的回顾与展望(纪念湖南医科大学80周年校庆) 被引量:22
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作者 姚开泰 《湖南医科大学学报》 CSCD 1995年第2期99-102,共4页
鼻咽癌研究的回顾与展望(纪念湖南医科大学80周年校庆)湖南医科大学肿瘤研究所姚开泰关键词鼻咽肿瘤;癌;研究;发展趋势1实验动物模型时期(1972~1980)1.1选题根据鼻咽癌(NPC)是我国南方和东南亚国家相对高发... 鼻咽癌研究的回顾与展望(纪念湖南医科大学80周年校庆)湖南医科大学肿瘤研究所姚开泰关键词鼻咽肿瘤;癌;研究;发展趋势1实验动物模型时期(1972~1980)1.1选题根据鼻咽癌(NPC)是我国南方和东南亚国家相对高发的恶性肿瘤,尤以广东最为突出,是世... 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 研究 发展趋势
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一株受四环素及其衍生物诱导表达的Tet-on鼻咽癌细胞系 被引量:23
7
作者 廖伟 易红 +2 位作者 顾焕华 苏涛 曹亚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期132-135,共4页
Tet-on基因表达系统是新近发展的一种真核生物体外表达系统.该系统利用四环素及其衍生物对所感兴趣基因进行诱导表达.这种诱导表达具有严密、高效、可控性强、表达泄露小等优点.对于研究一些致死基因及毒性强的基因在细胞或体... Tet-on基因表达系统是新近发展的一种真核生物体外表达系统.该系统利用四环素及其衍生物对所感兴趣基因进行诱导表达.这种诱导表达具有严密、高效、可控性强、表达泄露小等优点.对于研究一些致死基因及毒性强的基因在细胞或体内的表达提供了极好的工具.利用Tet-on基因表达系统,构建了一株鼻咽癌细胞系,该细胞系的建立为进一步研究一些鼻咽癌发病相关基因,如EB病毒潜伏膜蛋白基因、瘤基因、抑瘤基因等与鼻咽癌的相关性,提供了理想的细胞模型. 展开更多
关键词 四环素 诱导表达 鼻咽癌细胞系
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一个与人鼻咽癌相关新基因的克隆 被引量:21
8
作者 何志巍 谢鹭 +7 位作者 许亮国 蓝轲 刘卫东 张玲 任彩萍 史建凌 周文 姚开泰 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第11期1168-1173,共6页
利用高密度cDNA微阵列表达检测技术,筛选出在成人正常鼻咽组织高表达而在成人鼻咽低分化鳞状细胞癌组织中低表达的EST N27741,用 RT-PCR技术证实之,进而由该EST克隆出长度为1096bp的新基因.利用生物信... 利用高密度cDNA微阵列表达检测技术,筛选出在成人正常鼻咽组织高表达而在成人鼻咽低分化鳞状细胞癌组织中低表达的EST N27741,用 RT-PCR技术证实之,进而由该EST克隆出长度为1096bp的新基因.利用生物信息学分析发现,该序列含有完整的阅读框架,编码 256个氨基酸,在5’端起始密码子上游有终止密码子TAA,3’端有加尾信号AATAAA和 polyA尾.该新序列在非冗余的核酸序列数据库中比较,无同源的已知基因存在,被认为是一个新的与鼻咽癌相关的基因. 展开更多
关键词 鼻咽癌 基因克隆 致病基因 cDNA微阵列表达检测
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Epstein-Barr病毒潜伏状态与鼻咽癌的关系 被引量:21
9
作者 游绍进 姚开泰 +1 位作者 曹亚 胡维新 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期23-26,共4页
应用非同位素原位杂交和图像分析法,研究鼻咽癌和慢性鼻咽炎活检标本中,Epstein-Barr病毒(EBV)DNA的分布以及EB病毒潜伏基因BNLF1和BamH1W序列的表达。结果显示,高拷贝数的EB病毒基因组和Bam... 应用非同位素原位杂交和图像分析法,研究鼻咽癌和慢性鼻咽炎活检标本中,Epstein-Barr病毒(EBV)DNA的分布以及EB病毒潜伏基因BNLF1和BamH1W序列的表达。结果显示,高拷贝数的EB病毒基因组和BamH1W序列的表达,后者与EB病毒核抗原1的转录和病毒复制的启动有关,几乎都发生于低分化或未分化鼻咽癌。此外,潜伏基因BNLF1的转录产物即LMPmRNA,在非典型增生的鼻咽上皮中也有表达。以上结果提示,EBV游离体的大量复制发生于鼻咽癌演进过程,可能由于低分化或未分化鼻咽癌中病毒启动子的激活;LMP的不适当表达可能具有启动鼻咽上皮细胞异型增生的作用。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 癌发生 病毒复制 致癌因素
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茶多酚诱导鼻咽癌细胞caspase-3活化 被引量:17
10
作者 罗非君 胡智 +2 位作者 邓锡云 顾焕华 曹亚 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第12期1082-1086,共5页
目的:探讨茶多酚能否诱导鼻咽癌细胞系 CNE1-LMP1凋亡及凋亡发生的分子机制。方法:用不同浓度的茶多酚处理 CNE1-LMP1细胞,分别用荧光显微镜、 DNA琼脂糖凝胶电泳、 MTT和流式细胞仪等方法,观察细胞生化和形态学改变;同时,确定茶... 目的:探讨茶多酚能否诱导鼻咽癌细胞系 CNE1-LMP1凋亡及凋亡发生的分子机制。方法:用不同浓度的茶多酚处理 CNE1-LMP1细胞,分别用荧光显微镜、 DNA琼脂糖凝胶电泳、 MTT和流式细胞仪等方法,观察细胞生化和形态学改变;同时,确定茶多酚诱导细胞凋亡过程中 caspase-3活性的动力学变化。结果:茶多酚处理后,荧光显微镜下可见 CNE1-LMP1细胞在形态学上出现细胞核固缩、核碎裂、凋亡小体等凋亡细胞的形态学改变;琼脂糖凝胶电泳 DNA呈典型的“梯状”条带; MTT测定发现茶多酚处理后细胞生长受到不同程度的抑制。同时, CNE1-LMP1细胞在凋亡过程中 caspase-3活性的升高,呈明显的时效关系。结论:茶多酚能诱导 CNE1-LMP1细胞凋亡,可能通过 caspase-3的活化诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 CASPASE-3 细胞凋亡 茶多酚
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核转录因子NF-κB的研究进展 被引量:14
11
作者 潘雷 王英华 +2 位作者 曾锦旗 章锁江 曹亚 《现代实用医学》 2002年第4期205-207,共3页
关键词 核转录因子 NF-кB 研究进展
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茶多酚诱导鼻咽癌细胞cyclin D1表达下调 被引量:21
12
作者 罗非君 胡智 +4 位作者 赵晓荣 邓锡云 易薇 顾焕华 曹亚 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期358-362,共5页
目的:探索茶多酚及其单体抑制鼻咽癌细胞增殖的分子机制。方法:应用光学显微镜、 MTT测定、流式细胞仪、报告基因和 Western blot分析等方法,研究茶多酚及其单体对细胞增殖和细胞周期的影响及分子机理。结果:茶多酚处理鼻咽癌细胞 C... 目的:探索茶多酚及其单体抑制鼻咽癌细胞增殖的分子机制。方法:应用光学显微镜、 MTT测定、流式细胞仪、报告基因和 Western blot分析等方法,研究茶多酚及其单体对细胞增殖和细胞周期的影响及分子机理。结果:茶多酚处理鼻咽癌细胞 CNE1- LMP1 24 h后,分裂相细胞显著减少,细胞增殖受到抑制,细胞的生存率从 100%下降到 38.1% (200μ g/ml); S期细胞明显减少,从 22.20%下降至 13.16% (200μ g/ml), G0/G1细胞所占百分率增加,从 68.50%上升至 74.08%,细胞出现 G1/S阻滞。同时, cyclin D1基因启动子转录活性显著下调,与对照组比下降 4~ 5倍,但相同浓度的茶多酚与 (- )- epigallocatechin- 3- gallate(EGCG)处理没有显著性差别, cyclin D1蛋白表达水平明显降低。采用荧光酶双报告基因系统分析,发现茶多酚处理 12~ 14 h后, AP- 1、 NFκ B的反式激活活性均显著下降,与对照组 (0μ g/ml)比分别下降 5~ 6倍、 7~ 8倍,且呈明显的量效关系。结论:茶多酚能抑制鼻咽癌细胞 CNE- LMP1增殖,茶多酚诱导所致 cyclin D1基因的转录和表达下调可能在其中起着重要作用。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 AP-1 NFKB 茶多酚 EGCG 细胞增殖 cyclinD1
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鼻咽癌、宫颈癌和肺癌中p53基因突变和表达的对比研究 被引量:24
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作者 谢奕 姚开泰 胡维新 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期229-232,共4页
目的对比研究p53在鼻咽癌、宫颈癌、肺癌中的表达及其与p53基因突变的关系,为进一步研究p53在癌变过程中的作用奠定基础。方法应用免疫组化结合PCR-SSCP银染技术检测24例鼻咽癌、9例宫颈癌、10例肺癌中p53基... 目的对比研究p53在鼻咽癌、宫颈癌、肺癌中的表达及其与p53基因突变的关系,为进一步研究p53在癌变过程中的作用奠定基础。方法应用免疫组化结合PCR-SSCP银染技术检测24例鼻咽癌、9例宫颈癌、10例肺癌中p53基因的表达与突变。结果23/24例鼻咽癌、6/9例宫颈癌、9/10例肺癌有p53的过表达,在两种发病与DNA致瘤病毒有关的鼻咽癌、宫颈癌中未能检测到p53基因突变;而发病与化学致癌物有关的肺癌中有5/10例检测到有p53基因突变,其中1例发生在外显子8,4例发生在外显子5。这5例均有p53的过表达。结论(1)鼻咽癌、宫颈癌、肺癌中存在着p53蛋白的过表达。(2)肺癌中p53的过表达大部分与p53基因突变有关,而鼻咽癌与宫颈癌中p53过表达与p53基因突变关系不大,其与致瘤性DNA病毒的作用是否有关有待进一步研究。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 宫颈肿瘤 肺肿瘤 P53 基因突变
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DNA微阵列(或芯片)技术原理及应用 被引量:20
14
作者 何志巍 姚开泰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第5期507-510,共4页
DNA微阵列或芯片(DNAmicroarray orchip) 技术是近年发展起来的又一新的分子生物学研究工具. 它是利用光导化学合成、照相平板印刷以及固相表面化学合成等技术, 在固相表面合成成千上万个寡核苷酸探针,或将... DNA微阵列或芯片(DNAmicroarray orchip) 技术是近年发展起来的又一新的分子生物学研究工具. 它是利用光导化学合成、照相平板印刷以及固相表面化学合成等技术, 在固相表面合成成千上万个寡核苷酸探针,或将液相合成的探针由微阵列器或机器人点样于尼龙膜或硅片上, 再与放射性同位素或荧光物标记的DNA 或cDNA杂交, 用于分析DNA突变及多态性、DNA测序、监测同一组织细胞在不同状态下或同一状态下多种组织细胞基因表达水平的差异。 展开更多
关键词 DNA微阵列(或芯片) 原理 应用
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鼻咽癌中EB病毒潜伏膜蛋白1对p53表达的调控 被引量:15
15
作者 廖伟 唐敏 +2 位作者 殷莉群 邓锡云 曹亚 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期199-201,共3页
目的 探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)是否通过NF κB在鼻咽癌细胞中促进p5 3蛋白的表达 ,为阐明LMP1促进细胞凋亡的机制提供实验依据。方法 利用四环素诱导表达系统 ,建立受四环素调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系。用报道基因检测法和West... 目的 探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)是否通过NF κB在鼻咽癌细胞中促进p5 3蛋白的表达 ,为阐明LMP1促进细胞凋亡的机制提供实验依据。方法 利用四环素诱导表达系统 ,建立受四环素调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系。用报道基因检测法和Western印迹技术 ,观察LMP1过量表达对NF κB的功能性活化及p5 3、bcl 2表达的影响。结果 在鼻咽癌细胞中 ,LMP1能活化NF κB。过量表达的LMP1促进p5 3基因的表达 ,这种促表达可以被硫代磷酸化修饰的LMP1及p6 5反义寡聚脱氧核苷酸阻断。LMP1和p6 5对bcl 2的表达则没有影响 ,LMP1过表达对bcl 2的表达无影响。结论鼻咽癌中LMP1通过活化核转录因子NF κB调节p5 3的表达 ;而在LMP1过表达时 ,bcl 2介导的抗凋亡机制未被启动 ,至少是未被上调的。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 爱泊斯坦一巴尔病毒 潜伏膜蛋白1 P53基因
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鼻咽癌染色体9p21~22区域精细缺失图谱的构建 被引量:14
16
作者 阳剑波 唐湘娜 +5 位作者 邓龙文 谭国林 周鸣 曾朝阳 曹莉 李桂源 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期419-421,共3页
目的 进一步精细限定鼻咽癌9p21 ~22 区域等位基因杂合性丢失的频率和范围,为发现和分离克隆该区域内的鼻咽癌抑瘤基因提供新线索和依据。方法 应用11 个定位于9p21 ~22 区域的高密度微卫星位点,检测25 例低分化鼻咽癌患者的杂合性... 目的 进一步精细限定鼻咽癌9p21 ~22 区域等位基因杂合性丢失的频率和范围,为发现和分离克隆该区域内的鼻咽癌抑瘤基因提供新线索和依据。方法 应用11 个定位于9p21 ~22 区域的高密度微卫星位点,检测25 例低分化鼻咽癌患者的杂合性丢失。结果 25 例患者中,有17 例存在一个或多个位点的杂合性丢失,占68-0 % 。其中D9S161(35 .0 % ) 、D9S1678(31 .6 % ) 、D9S263(33 .3 % ) 和D9S1853(33 .3 % )4 个紧邻位点的丢失频率相对较高,并发现有6 例患者在这些位点表现为连续性缺失。结论 鼻咽癌染色体9p21 ~22 区域D9S161 ~D9S1853 位点之间(2 .7 cM) 是鼻咽癌患者的一个较小共同缺失区,该区域内的抑瘤基因失活可能是鼻咽癌发生发展过程中的重要事件。 展开更多
关键词 鼻咽癌 染色体9p21-22 杂合性丢失
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视网膜母细胞瘤细胞系HXO-Rb_(44)的建立及其生物学特性的检测 被引量:16
17
作者 徐和平 王成业 +5 位作者 刘双珍 许雪亮 蒋幼芹 祝和成 李桂源 姚开泰 《眼科研究》 CSCD 1994年第3期183-186,共4页
对22例眼球摘除的视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma,Rb)取材进行体外培养,从中建成一个连续细胞系(HXO-Rb44),在体外已生存近21个月,传至180代。生物学特性显示其在体外悬浮生长,排列成团状或链... 对22例眼球摘除的视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma,Rb)取材进行体外培养,从中建成一个连续细胞系(HXO-Rb44),在体外已生存近21个月,传至180代。生物学特性显示其在体外悬浮生长,排列成团状或链状,群体倍增时间为44小时,细胞形态、免疫组化与原实体瘤相似,染色体为非整倍体,众数为60条,在双层软琼脂上可形成克隆,具有较强的异体致瘤性。 展开更多
关键词 视网膜 母细胞瘤 细胞培养
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细胞角蛋白基因13在鼻咽癌中的表达研究 被引量:16
18
作者 邱元正 田勇泉 +3 位作者 肖健云 陶正德 赵素萍 李桂源 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期129-131,共3页
目的 探讨细胞角蛋白基因 13(Cytokeratin 13,CK13)在人鼻咽癌 (NPC)中的表达。方法应用免疫组化检测了 40例NPC组织和 8例慢性鼻咽炎 (CINE)组织中CK13蛋白水平的表达 ,同时应用Northern杂交对其中 32例NPC和 8例CINE组织进行了mRNA... 目的 探讨细胞角蛋白基因 13(Cytokeratin 13,CK13)在人鼻咽癌 (NPC)中的表达。方法应用免疫组化检测了 40例NPC组织和 8例慢性鼻咽炎 (CINE)组织中CK13蛋白水平的表达 ,同时应用Northern杂交对其中 32例NPC和 8例CINE组织进行了mRNA水平检测 ,并分析了CK13表达与NPC临床特征的关系。结果 在NPC中 ,CK13在蛋白质水平和mRNA水平均较CINE显著降低 (P <0 0 1) ,且CK13表达与NPC颈淋巴结转移有显著相关性 (P <0 0 5 ) ,与肿瘤的T分期无显著相关性(P >0 0 5 )。结论 CK13基因的表达可能与NPC组织分化以及颈淋巴结转移有关。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 CKB 基因表达 免疫组织化学
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鼻咽及其邻近部位各类型癌组织中EBV DNA的原位检测 被引量:19
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作者 蒋晓群 姚开泰 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期85-88,T021,共5页
改进了生物素标记探针与石蜡组织切片的DNA-DNA原位杂交技术,采用EB病毒的BamHI-W片段为探针,检测鼻咽部及其邻近部位各种不同组织学和分化类型的癌组织及慢性炎症标本中EBV的存在与分布情况。结果表明:EB病毒... 改进了生物素标记探针与石蜡组织切片的DNA-DNA原位杂交技术,采用EB病毒的BamHI-W片段为探针,检测鼻咽部及其邻近部位各种不同组织学和分化类型的癌组织及慢性炎症标本中EBV的存在与分布情况。结果表明:EB病毒的存在与癌的组织类型和分化程度密切相关,并不局限于鼻咽部。在鼻咽部的低、中、高分化鳞状细胞癌标本,EBVDNA阳性例数分别为39/41个、1/7个和0/3个;胯部及扁桃体低鳞癌标本的阳性例数分别为3/4个和2/9个;少部分鼻咽低分化腺癌(2/8个)标本中也发现EBVDNA;头颈部其它部位的中、高分化鳞癌及良性肿瘤中未见EBVDNA的存在。在阳性标本,EBVDNA存在于几乎所有的癌细胞胞核中,而标本的间质细胞、浸润的淋巴细胞、癌旁上皮细胞和慢性鼻咽炎症的上皮细胞为阴性。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 头颈部肿瘤 杂交 E-B病毒
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运用生物信息学方法快速获取与肿瘤基因同源的EST及其新基因克隆的策略 被引量:7
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作者 田芳 陈主初 《生命科学》 CSCD 2000年第2期72-75,共4页
如何更多更快地克隆肿瘤基因,探索肿瘤发病机制是研究工作者努力的方向。利用人类基因组研究的现存数据,从EST即cDNA的部分序列入手,通过同源筛选;直接搜寻新基因不失为一种在“基因抢夺战”中获胜的捷径。本文通过实例综述... 如何更多更快地克隆肿瘤基因,探索肿瘤发病机制是研究工作者努力的方向。利用人类基因组研究的现存数据,从EST即cDNA的部分序列入手,通过同源筛选;直接搜寻新基因不失为一种在“基因抢夺战”中获胜的捷径。本文通过实例综述了怎样运用生物信息资源进行EST筛选及其新基因克隆的策略。 展开更多
关键词 生物信息学 EST 同源性分析 肿瘤基因 基因克隆
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