用磁珠富集法分离亚麻基因组微卫星分子标记 被引量：16

1

作者 邓欣 陈信波 +5 位作者 龙松华 王孝纯 高原 何东锋 王进 王玉富 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2099-2105,共7页

应用Dynal磁珠-生物素标记的微卫星探针(CT)15与亚麻基因组DNA酶切片段杂交,捕获300～1500bp含有微卫星序列的DNA片段,连接到pMD18-T载体中,构建富集微卫星序列的小片段插入文库。利用接头引物和根据微卫星核心序列设计的引物VRV(CT)15... 应用Dynal磁珠-生物素标记的微卫星探针(CT)15与亚麻基因组DNA酶切片段杂交,捕获300～1500bp含有微卫星序列的DNA片段,连接到pMD18-T载体中,构建富集微卫星序列的小片段插入文库。利用接头引物和根据微卫星核心序列设计的引物VRV(CT)15使用PCR方法直接对文库筛选,从422个转化子中获得了104个阳性克隆,对其进行测序分析,获得了97个微卫星序列,微卫星序列的富集效率达到22.99%,PCR扩增筛选效率93.27%。对97个微卫星序列进行比对分析,其中51个重复序列的两端序列高度相似,据其设计的特异引物对阳性克隆进行2次筛选,能淘汰相似度高的同类序列,提高筛选亚麻微卫星标记的效率。 展开更多

关键词 亚麻 微卫星 磁珠富集

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油菜菌核病及抗病育种研究进展 被引量：9

2

作者 双桑 阮颖 +1 位作者 彭冬平 刘春林 《作物研究》 2006年第5期552-556,共5页

综述了油菜菌核病的生物学特性及各种生态因子对其生长发育的影响,从油菜菌核病的发病原因、侵染过程及侵染方式,菌核菌致病机理及油菜抗菌核病机理等方面,介绍了油菜菌核病的抗性遗传及抗菌核病的育种研究进展情况。

关键词 油菜 菌核病 抗性机理 抗性育种

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miRNA研究进展 被引量：2

3

作者 伍林涛 阮颖 +2 位作者 彭琦 张源 刘春林 《作物研究》 2006年第5期572-576,共5页

m iRNA是一类长约22 n t的小分子非编码单链RNA,它能与mRNA的特定位点结合抑制蛋白质的合成,因此,它在调节基因转录与表达,调控生物体正常发育等生理过程中扮演重要角色。总结了m iRNA的发现、特征功能以及m iRNA的作用机制与应用。

关键词 MIRNA 基因表达调控 靶基因

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芥菜种子颜色调控基因TT8的等位变异及其地理分布分析 被引量：1

4

作者 张钰坤 陆赢 +2 位作者 崔看 夏石头 刘忠松 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1325-1332,共8页

在芸薹属植物中TT8基因是种子颜色的调控基因。异源四倍体芥菜TT8基因有2个拷贝,分别位于A09与B08染色体上。本研究针对不同拷贝设计特异引物,对749份芥菜进行扩增、测序或酶切检测,发现BjuA09.TT8和BjuB08.TT8各有7个和6个等位变异。... 在芸薹属植物中TT8基因是种子颜色的调控基因。异源四倍体芥菜TT8基因有2个拷贝,分别位于A09与B08染色体上。本研究针对不同拷贝设计特异引物,对749份芥菜进行扩增、测序或酶切检测,发现BjuA09.TT8和BjuB08.TT8各有7个和6个等位变异。与野生型相比, BjuA09.TT8.a1-a5和BjuB08.TT8.b1-b4等位基因都发生了大片段插入,而BjuA09.TT8.a6出现了删除,但BjuB08.TT8.b5仅在第7外显子处有1个碱基替换。使用Repeatmasker软件对等位基因序列与甘蓝型油菜注释库进行重复序列比对,发现BjuA09.TT8.a1-a4和BjuB08.TT8.b1-b4等位基因主要含有Ⅰ类转座子,少量为Ⅱ类转座子及Helitron类转座子插入。统计还发现, BjuA09.TT8.a4-BjuB08.TT8.b5单倍型为主要的黄籽单倍型,占所分析黄籽材料的89.49%(247/276),其次为BjuA09.TT8.a4-BjuB08.TT8.b3单倍型,占6.52%。地理分布分析结果显示,中国尤其是新疆芥菜黄籽突变等位基因频率显著高于世界其他地区,这与历史记载相印证,说明芥菜黄籽性状可能起源于中国新疆。本研究结果为油菜黄籽育种选用优异基因资源提供了依据。 展开更多

关键词 芥菜 黄籽 TT8 等位变异 转座子 种质资源 地理分布

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甘蓝型油菜LPAT4基因的克隆与表达 被引量：2

5

作者 肖旦望 刘聪 +3 位作者 胡学芳 陈社员 官春云 熊兴华 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1748-1755,共8页

植物溶血磷脂酸酰基转移酶(lysophospholipid acid actyltransferase,LPAT)是三酰甘油生物合成过程中的一个关键酶,在脂质的合成、种子的发育以及生物膜的流动性等方面有重要作用。本研究采用同源克隆的方法,获得LPAT4基因的2条全长CDS... 植物溶血磷脂酸酰基转移酶(lysophospholipid acid actyltransferase,LPAT)是三酰甘油生物合成过程中的一个关键酶,在脂质的合成、种子的发育以及生物膜的流动性等方面有重要作用。本研究采用同源克隆的方法,获得LPAT4基因的2条全长CDS,长度分别为1143 bp和1140 bp。生物信息学分析表明,它们均具有LPLAT_LCLAT1样结构域,同属于LPLAT超基因家族,并分别被命名为BnLPAT4-1和BnLPAT4-2。时空表达分析表明,它们均为组成型表达基因,其中BnPAT4-1在叶中的表达量最高,而BnLPAT4-2在胚中的表达量最高。逆境分析表明,BnLPAT4-1和BnLPAT4-2在NaCl、PEG-4000、水渍、6BA和ABA的胁迫下呈现出不同的表达模式。极差分析显示,ABA对BnLPAT4-1的表达影响较大,而BnLPAT4-2的表达对PEG-4000更敏感。本试验为进一步研究油菜BnLPAT4基因功能奠定了基础。 展开更多

关键词 LPAT4 甘蓝型油菜 时空表达 非生物逆境 表达分析

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甘蓝型油菜甘油三磷酸脱氢酶(BnaGPDH)基因的克隆与表达 被引量：2

6

作者 刘少锋 刑蔓 +4 位作者 汪慧慧 邬克彬 官春云 肖钢 熊兴华 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1772-1780,共9页

甘油三磷酸脱氢酶(GPDH)是三酰甘油(TAG)合成的关键酶。为了阐明甘蓝型油菜(Brassica napus)GPDH(BnaGPDH)的表达特性,本研究采用反转录PCR(RT-PCR)方法,获得BnaGPDH基因的3条全长编码序列(CDS),分别命名为BnaGPDH1、BnaGPDH2、BnaGPDH3... 甘油三磷酸脱氢酶(GPDH)是三酰甘油(TAG)合成的关键酶。为了阐明甘蓝型油菜(Brassica napus)GPDH(BnaGPDH)的表达特性,本研究采用反转录PCR(RT-PCR)方法,获得BnaGPDH基因的3条全长编码序列(CDS),分别命名为BnaGPDH1、BnaGPDH2、BnaGPDH3,长度分别为1395、1395、1389 bp。生物信息学分析表明,BnaGPDHs具有GPDH基因家族的特征,BnaGPDHs与其他植物GPDHs有高度同源性。时空表达分析表明,BnaGPDHs是组成型表达基因,在花中的表达量最高,叶中的表达量最低。BnaGPDHs在幼嫩种子发育的第5周表达量普遍提高,在果荚发育到第5周表达量明显降低。逆境分析表明,BnaGPDHs响应多种逆境胁迫,可能与植物抗逆机制有关。 展开更多

关键词 GPDH 甘蓝型油菜 基因克隆 表达分析

原文传递

甘蓝型油菜GPAT6基因启动子的克隆与表达载体构建 被引量：1

7

作者 胡学芳 刘聪 +1 位作者 肖旦望 熊兴华 《作物研究》 2014年第5期467-471,共5页

通过同源PCR克隆的方法,首次从甘蓝型油菜中克隆了甘油-3-磷酸酰基转移酶6(sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase 6,GPAT6)基因长1 110 bp的启动子,并将其成功构建到植物表达载体pBI121上。重组载体可用于转化拟南芥,探究甘蓝型油菜... 通过同源PCR克隆的方法,首次从甘蓝型油菜中克隆了甘油-3-磷酸酰基转移酶6(sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase 6,GPAT6)基因长1 110 bp的启动子,并将其成功构建到植物表达载体pBI121上。重组载体可用于转化拟南芥,探究甘蓝型油菜GPAT6基因的组织表达特征。 展开更多

关键词 甘蓝型油菜 GPAT6基因 启动子 基因克隆 表达载体构建

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小麦Germin蛋白的研究现状 被引量：1

8

作者 彭琦 阮颖 +2 位作者 张源 伍林涛 刘春林 《作物研究》 2006年第5期568-571,共4页

小麦G erm in蛋白是一种具有草酸氧化酶活性的糖蛋白。已经被广泛的研究应用。综述了G erm in蛋白的发现及其结构特点与功能的关系。详细介绍了G erm in蛋白及其蛋白家族的结构特点的异同,以及它在植物发育、抗逆和防御过程中的作用。

关键词 Germin 草酸氧化酶 蛋白家族 植物防御 小麦

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化学诱导激活系统的研究进展 被引量：1

9

作者 魏然 阮颖 +1 位作者 王莹 刘春林 《作物研究》 2006年第5期586-588,共3页

以雌激素为基础的化学诱导激活系统是一种有效的基因分离和鉴定的方法。它通过雌激素的使用量严格控制内源基因的表达而产生显性功能获得型突变,从而克服了不能筛选鉴定植物生长发育中的关键基因和一些功能冗余基因的问题。同时该系统... 以雌激素为基础的化学诱导激活系统是一种有效的基因分离和鉴定的方法。它通过雌激素的使用量严格控制内源基因的表达而产生显性功能获得型突变,从而克服了不能筛选鉴定植物生长发育中的关键基因和一些功能冗余基因的问题。同时该系统在植物转基因中具有高效和可靠的化学诱导机制并有着广泛的应用前景。综述了化学诱导激活系统原理、特点和研究现状。 展开更多

关键词 化学诱导激活系统 雌激素 突变体

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油菜高效转化系统的研究 被引量：18

10

作者 林良斌 官春云 +3 位作者 李栒 王国槐 周小云 陈信波 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期447-450,共4页

以甘蓝型油菜湘油13为试验材料,运用子房注射法将BT毒蛋白基因导入油菜。在授粉后第20小时至第30小时用自制的微玻针从子房中部注射0.5～1.5μg外源DNA,以高达12.8％的频率获得抗卡那霉素植株。分子杂交分析证明BT毒蛋白基因已整合到油... 以甘蓝型油菜湘油13为试验材料,运用子房注射法将BT毒蛋白基因导入油菜。在授粉后第20小时至第30小时用自制的微玻针从子房中部注射0.5～1.5μg外源DNA,以高达12.8％的频率获得抗卡那霉素植株。分子杂交分析证明BT毒蛋白基因已整合到油菜基因组中,转化频率为1.6％,表明子房注射法是一种有效、实用的油菜遗传转化方法。 展开更多

关键词 甘蓝型油菜 遗传转化 BT毒蛋白基因 油菜

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子房注射法与农杆菌介导法转化甘蓝型油菜的比较研究 被引量：10

11

作者 林良斌 官春云 +2 位作者 李恂 周小云 何业华 《生命科学研究》 CAS CSCD 2000年第3期231-236,共6页

以甘蓝型油菜湘油 1 3号为试验材料 ,运用根癌农杆菌介导法和子房注射法成功地将Bt杀虫蛋白基因导入油菜 .在特定的条件下 ,以子叶柄作为转化受体进行农杆菌介导转化 ,其转化效率受侵染时间和共培养时间的影响 ,最佳侵染时间为 3～ 5min... 以甘蓝型油菜湘油 1 3号为试验材料 ,运用根癌农杆菌介导法和子房注射法成功地将Bt杀虫蛋白基因导入油菜 .在特定的条件下 ,以子叶柄作为转化受体进行农杆菌介导转化 ,其转化效率受侵染时间和共培养时间的影响 ,最佳侵染时间为 3～ 5min,最佳共培养时间为60～ 72 h;子房注射法的最佳注射时间为授粉后第 2 0～ 30 h,最适注射部位为子房中部 ,DNA注射量为 0 .5～ 1 .5μg.在最佳转化条件下它们分别获得抗卡那霉素植株的频率为 8.3%、1 2 .8% .分子检测实验证明 ,Bt杀虫蛋白基因已整合到油菜基因组中 .农杆菌介导法获得转基因植株的频率为 1 .1 8% ,子房注射法的转化频率为 2 .66% ,可见子房注射法是一种有效、实用的油菜遗传转化方法 . 展开更多

关键词 甘蓝型油菜 遗传转化 Bt杀虫蛋白基因

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植物热激蛋白与作物非生物抗逆性的改良 被引量：11

12

作者 邹杰 陈信波 +2 位作者 刘爱玲 高国赋 朱木兰 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2007年第5期981-985,共5页

文章就植物热激蛋白(Hsps)的种类、产生、生物学功能及其在作物抗逆性改良中的研究进展作介绍。

关键词 热激蛋白 非生物胁迫 生理功能和作用机制

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植物钾离子通道AKT1的研究进展 被引量：10

13

作者 杨玲琴 刘敬 +1 位作者 李魏 戴良英 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期94-100,共7页

钾(K)是植物生长发育必不可少的三大营养元素之一,在调节酶活性、膜电位、细胞内稳态和确保蛋白质稳定合成的过程中发挥重要作用。植物主要通过钾离子通道及转运蛋白介导钾离子的吸收与转运。近年来,已经分离出不同类型的钾离子通道,其... 钾(K)是植物生长发育必不可少的三大营养元素之一,在调节酶活性、膜电位、细胞内稳态和确保蛋白质稳定合成的过程中发挥重要作用。植物主要通过钾离子通道及转运蛋白介导钾离子的吸收与转运。近年来,已经分离出不同类型的钾离子通道,其中最早被发现并深入研究的钾离子通道是Shaker钾离子通道。综述了植物钾离子通道以及其分类、Shaker钾离子通道的结构特征、AKT1影响植物的生长发育、AKT1在非生物胁迫和生物胁迫中的功能和钾离子通道AKT1其中的两种调控机制,通过CBL/CIPK的磷酸化和异源聚合进行内部调控,并展望了钾离子通道AKT1后续有待研究的问题。 展开更多

关键词 钾离子 钾离子通道 AKT1 调控

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热激转录因子在植物抗非生物胁迫中的功能研究进展 被引量：8

14

作者 李丽 刘双清 +2 位作者 杨远航 戴良英 李魏 《生物技术进展》 2018年第3期214-220,共7页

植物在遭受环境胁迫时会产生一系列应激反应,而热激转录因子可通过介导热激蛋白或其他热诱导基因的转录和表达,来参与调控植物抵抗逆境胁迫过程和其他生命活动。主要介绍了植物热激转录因子的基本蛋白结构域,阐述了3类热激转录因子在抗... 植物在遭受环境胁迫时会产生一系列应激反应,而热激转录因子可通过介导热激蛋白或其他热诱导基因的转录和表达,来参与调控植物抵抗逆境胁迫过程和其他生命活动。主要介绍了植物热激转录因子的基本蛋白结构域,阐述了3类热激转录因子在抗极端温度(高温、低温)胁迫、干旱胁迫、高盐胁迫、活性氧胁迫中的功能与作用机制,并探讨和展望了植物热激转录因子在植物育种和提高植物抗逆性的研究中的发展与应用前景,以期为深入研究热激转录因子在调控植物抵抗逆境胁迫中的生物学功能与机制提供理论参考。 展开更多

关键词 热激转录因子 非生物胁迫 高温 干旱

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光敏色素对植物抗逆反应的调控研究进展 被引量：5

15

作者 姜敏 李魏 +2 位作者 董铮 李利华 戴良英 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期15-21,共7页

光敏色素是红光和远红光受体,不但在植物光形态建成中扮演着重要的角色,还参与调控植物抗逆信号通路。阐述了光敏色素及其互作的转录因子通过诱导植物激素信号途径调控植物对病原菌、害虫等生物胁迫的反应及作用机制,以及光敏色素调控... 光敏色素是红光和远红光受体,不但在植物光形态建成中扮演着重要的角色,还参与调控植物抗逆信号通路。阐述了光敏色素及其互作的转录因子通过诱导植物激素信号途径调控植物对病原菌、害虫等生物胁迫的反应及作用机制,以及光敏色素调控植物对临近植物的竞争胁迫、干旱、低温、高温等非生物胁迫反应的作用机制研究进展,并讨论与展望了光敏色素研究领域所面临的挑战与发展方向。 展开更多

关键词 光敏色素 抗病性 抗虫性 非生物胁迫

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TE缓冲液对RAPD带型的影响 被引量：1

16

作者 刘春林 阮颖 +1 位作者 王学军 官春云 《生命科学研究》 CAS CSCD 2001年第3期275-276,279,共3页

TE作为一种溶解 DNA的常缓冲液 ,它对 RAPD带型的影响往往没有受到重视 .通过对 TE缓冲液与 RAPD带型之间关系进行了较系统的研究 ,结果说明 TE对 RAPD带型有明显影响 ;并且显示在 Mg++为2 mmol/L时 ,TE是影响 RAPD带型的敏感因素 .还针... TE作为一种溶解 DNA的常缓冲液 ,它对 RAPD带型的影响往往没有受到重视 .通过对 TE缓冲液与 RAPD带型之间关系进行了较系统的研究 ,结果说明 TE对 RAPD带型有明显影响 ;并且显示在 Mg++为2 mmol/L时 ,TE是影响 RAPD带型的敏感因素 .还针对 TE的不利影响 ,提出了有效的解决办法 . 展开更多

关键词 TE缓冲液 RAPD带型 相互关系

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水稻中耐低温胁迫的转录因子研究进展 被引量：1

17

作者 董铮 戴阳朔 +1 位作者 李魏 戴良英 《湖南农业科学》 2013年第4期16-18,共3页

水稻是一种对低温十分敏感的作物,低温严重影响水稻的产量。水稻中的一些转录因子通过调控相关功能基因参与水稻抗低温胁迫的信号传导,例如CBF/DREB类、MYB类、bZIP类和NAC类等转录因子家族在水稻抗低温胁迫过程中起重要调控作用。从这... 水稻是一种对低温十分敏感的作物,低温严重影响水稻的产量。水稻中的一些转录因子通过调控相关功能基因参与水稻抗低温胁迫的信号传导,例如CBF/DREB类、MYB类、bZIP类和NAC类等转录因子家族在水稻抗低温胁迫过程中起重要调控作用。从这些转录因子的分子结构、作用方式与机理等方面综述了水稻转录因子在低温胁迫信号传导中的作用。 展开更多

关键词 水稻 低温胁迫 转录因子 综述

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禽流感抗原基因NA导入生菜的研究 被引量：1

18

作者 范亚丽 李进 +1 位作者 阮颖 刘春林 《湖南农业科学》 2012年第3期13-16,共4页

以生菜子叶为转化受体材料,利用农杆菌介导的方法将禽流感抗原基因NA导入生菜,通过用特异引物进行PCR检测,获得6株转基因植株。经PT-PCR检测,证明外源基因已整合到了生菜基因组中,且能够正常表达。

关键词 禽流感抗原基因NA 农杆菌介导遗传转化 生菜

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