实验旨在阐明牛酰基辅酶A氧化酶1(Acyl-Co A Oxidase 1,ACOX1)在肌内脂肪沉积过程中的作用,为优质肉牛品种培育提供理论依据。首先扩增牛ACOX1基因的CDS序列,构建ACOX1基因的过表达载体,然后将过表达载体转染3T3-L1细胞,利用油红O染色...实验旨在阐明牛酰基辅酶A氧化酶1(Acyl-Co A Oxidase 1,ACOX1)在肌内脂肪沉积过程中的作用,为优质肉牛品种培育提供理论依据。首先扩增牛ACOX1基因的CDS序列,构建ACOX1基因的过表达载体,然后将过表达载体转染3T3-L1细胞,利用油红O染色技术检测脂滴沉积情况,利用荧光定量PCR、Western blotting技术检测成脂分化基因PPARγ及C/EBPα的表达量。BLAST分析及酶切鉴定结果显示,成功构建了牛ACOX1基因的过表达载体;油红O结果表明,过表达ACOX1基因抑制了3T3-L1细胞的脂滴沉积;荧光定量PCR及Western blotting结果表明,过表达ACOX1基因显著性抑制了C/EBPα的表达量而对PPARγ的表达量无显著性影响。本研究结果显示,ACOX1可能抑制肌内脂肪沉积。展开更多