切应力通过Pim1/eNOS途径调节人脐静脉内皮细胞NO分泌 被引量：9

1

作者 张敏 孙玉 +2 位作者 唐平静 张文君 王汉琴 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期17-21,共5页

目的:探讨层流切应力是否可通过Pim1调节内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性,从而调节血管内皮细胞一氧化氮(NO)分泌。方法:体外原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),运用平行平板流动腔系统给HUVECs加载层流切应力(15 dyn/cm^2)。采用Western ... 目的:探讨层流切应力是否可通过Pim1调节内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性,从而调节血管内皮细胞一氧化氮(NO)分泌。方法:体外原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),运用平行平板流动腔系统给HUVECs加载层流切应力(15 dyn/cm^2)。采用Western blot法检测Pim1蛋白表达及eNOS-Ser1177磷酸化水平;硝酸还原酶法检测NO分泌量;利用特异性小干扰RNA(siRNA)转染技术沉默Pim1基因后再检测上述指标的变化。结果:切应力作用HUVECs 15 min,可以显著上调Pim1蛋白表达(P<0.05),同时显著增强eNOS-Ser1177磷酸化水平(P<0.05),伴随HUVECs NO分泌显著增多(P<0.05)。转染siPim1可以抑制切应力诱导的Pim1表达(P<0.05),同时抑制eNOS-Ser1177磷酸化(P<0.05),NO分泌随之显著降低(P<0.05)。结论:流体切应力可能通过Pim1/eNOS途径调节血管内皮细胞NO分泌。 展开更多

关键词 Pim1/eNOS信号通路 切应力 内皮细胞 一氧化氮

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Pim1调控巨噬细胞M1型极化介导血管内皮细胞炎症在ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化中的作用 被引量：5

2

作者 钟耕瑞 付萌萌 +1 位作者 王小波 王汉琴 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期2113-2121,共9页

目的:探讨Pim1在巨噬细胞M1型极化中的作用及M1型巨噬细胞对内皮细胞黏附分子表达的影响,并观察其在ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)形成中的作用。方法:采用脂多糖(LPS)刺激小鼠Raw264.7细胞建立M1型巨噬细胞模型,用Pim1特异性抑制剂SM... 目的:探讨Pim1在巨噬细胞M1型极化中的作用及M1型巨噬细胞对内皮细胞黏附分子表达的影响,并观察其在ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)形成中的作用。方法:采用脂多糖(LPS)刺激小鼠Raw264.7细胞建立M1型巨噬细胞模型,用Pim1特异性抑制剂SMI-4a和转染Pim1小干扰RNA(siPim1)进行干预,分为对照组、LPS组、LPS+SMI-4a组、LPS+siNC组和LPS+siPim1组。收集以上各组Raw264.7细胞上清作为条件培养液(CM)孵育原代培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),分为CM^(M0)、CM^(M1)、CM^(SMI-4a)、CM^(siNC)和CM^(siPim1)组。动物采用颈动脉部分结扎术建立颈动脉AS模型,用6周龄ApoE^(-/-)雄性小鼠18只建模后,随机分为模型组及SMI-4a干预组,每组各9只。采用油红O染色法观察颈动脉脂质蓄积变化。免疫荧光法和Westernblot法检测M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、Pim1、血管内皮标志物血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、细胞间黏附分子1(ICAM1)和血管细胞黏附分子1(VCAM1)在血管壁和细胞中的表达变化。结果:与对照组相比,LPS显著上调了Raw264.7细胞M1型极化标志物iNOS蛋白表达(P<0.01),同时Pim1蛋白表达也显著增高(P<0.05);SMI-4a干预和siPim1转染Raw264.7细胞,显著抑制LPS诱导的Pim1和iNOS表达(P<0.05或P<0.01)。与CM^(M0)相比,CM^(M1)显著上调HUVEC中ICAM1和VCAM1蛋白表达(P<0.05或P<0.01);CM^(SMI-4a)和CM^(siPim1)均显著抑制了HUVECs中ICAM1和VCAM1表达(P<0.01)。动物实验水平,建模后结扎侧左颈动脉可见脂质沉积,有AS斑块形成,血管壁iNOS表达显著增多(P<0.01),Pim1、ICAM1和VCAM1蛋白表达上调(P<0.05)。SMI-4a干预后,与模型组相比,左颈动脉脂质沉积被抑制,Pim1和iNOS表达显著降低(P<0.05或P<0.01),血管内皮标志物VE-cadherin蛋白水平升高(P<0.05),同时ICAM1和VCAM1蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论:抑制Pim1可以抑制ApoE^(-/-)小鼠AS斑块形成,其机制可能与减少巨噬细胞M1型极化,降低内 展开更多

关键词 Pim1蛋白 M1型巨噬细胞 炎症 动脉粥样硬化

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磷酸化p38介导低切应力诱导的血管内皮细胞Bmi-1表达 被引量：4

3

作者 兰祥星 王汉琴 +1 位作者 操传斌 张振建 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2018年第2期122-126,共5页

目的 探讨低切应力（LSS）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）中Bmi-1表达的影响及其可能的机制。方法原代培养HUVEC,免疫荧光检测Bmi-1在细胞中的定位;运用平行平板流动腔系统,给HUVEC加载0.5 Pa低切应力0.5 h、1 h、2 h和4 h,以无切应力加... 目的 探讨低切应力（LSS）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）中Bmi-1表达的影响及其可能的机制。方法原代培养HUVEC,免疫荧光检测Bmi-1在细胞中的定位;运用平行平板流动腔系统,给HUVEC加载0.5 Pa低切应力0.5 h、1 h、2 h和4 h,以无切应力加载为对照组,用实时定量RT-PCR检测Bmi-1 mRNA表达,用Western blot检测Bmi-1蛋白表达,利用p38特异性抑制剂SB2219探讨信号转导途径。结果 免疫荧光观察发现Bmi-1主要分布在HUVEC胞核中;HUVEC在LSS作用0.5 h后Bmi-1表达即明显增强,随着作用时间延长（1 h、2 h、4 h）,Bmi-1mRNA及蛋白表达逐渐降低;切应力能显著激活磷酸化p38表达;SB2219可以明显抑制Bmi-1表达。结论 LSS可诱导HUVEC中Bmi-1表达,其表达量与刺激时间长短密切相关,这种作用可能通过p38信号调节。 展开更多

关键词 血管内皮细胞 BMI-1 低切应力 p38信号转导

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多功能Exosome在卵巢癌靶向治疗中的作用及临床意义 被引量：3

4

作者 岳艳 王小波 +2 位作者 李进 黄光荣 范丽 《肿瘤药学》 CAS 2017年第4期406-411,共6页

目的探讨构建多功能外来体(Exosome)用于卵巢癌靶向治疗的应用价值。方法选用BALB/c小鼠未成熟树突状细胞(DC)作为Exosome供体细胞,转染表达肿瘤靶向肽i RGD的融合蛋白质粒,构建具有肿瘤靶向性的i RGD-Exos,观察其与Nu Tu-19肿瘤细胞的... 目的探讨构建多功能外来体(Exosome)用于卵巢癌靶向治疗的应用价值。方法选用BALB/c小鼠未成熟树突状细胞(DC)作为Exosome供体细胞,转染表达肿瘤靶向肽i RGD的融合蛋白质粒,构建具有肿瘤靶向性的i RGD-Exos,观察其与Nu Tu-19肿瘤细胞的相互作用,同时利用电穿孔方法将阿霉素(Dox)负载到i RGD-Exos中,构建i RGD-Exos-Dox,选取30只BALB/c小鼠,随机分为PBS组、Exosome组、Dox组、blank-Exos-Dox组和i RGD-Exos-Dox组,每组6只,观察各组小鼠体内肿瘤生长情况。结果与blank-Exos相比,i RGD-Exos在肿瘤细胞膜上定位更快,膜融合程度更明显;i RGDExos与肿瘤细胞结合率为(95.41±12.43)%,明显高于blank-Exos,差异有统计学意义(P<0.05);i RGD-Exos在注射后0.5 h内迅速出现在肿瘤组织部位,在2 h达到最高值,持续8 h后代谢完全,而blank-Exos注射后未出现在肿瘤组织部位;i RGDExos-Dox组小鼠肿瘤体积为(0.561±0.132)cm^3,明显小于PBS组、Exosome组、Dox组和blank-Exos-Dox组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论构建多功能Exosome在抗肿瘤治疗中有较好的应用前景,具有较好的肿瘤靶向性。 展开更多

关键词 外来体 卵巢癌 靶向治疗 阿霉素

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PIM1调节氧化低密度脂蛋白诱导的ApoE^(-/-)小鼠血管平滑肌细胞表型转化

5

作者 付萌萌 钟耕瑞 +2 位作者 徐梦琪 王小波 王汉琴 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1854-1863,共10页

目的:探讨莫洛尼小鼠白血病病毒前病毒整合位点1(PIM1)在氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的ApoE^(-/-)小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化中的作用及机制。方法:8周龄ApoE^(-/-)雄性小鼠18只随机分为普通饮食组和高脂饮食组,每组9只。16周... 目的:探讨莫洛尼小鼠白血病病毒前病毒整合位点1(PIM1)在氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的ApoE^(-/-)小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化中的作用及机制。方法:8周龄ApoE^(-/-)雄性小鼠18只随机分为普通饮食组和高脂饮食组,每组9只。16周后取主动脉,HE染色观察内膜变化,Western blot法和免疫荧光法检测PIM1、VSMC表型相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌蛋白22α(SM22α)、骨桥蛋白(OPN)和CD68表达。体外用oxLDL(50 mg/L)诱导原代培养的ApoE^(-/-)小鼠主动脉平滑肌细胞表型转化,分别用PIM1特异性抑制剂SMI-4a、PIM1小干扰RNA(siPIM1)、糖酵解小分子抑制剂3-(3-吡啶基)-1-(4-吡啶基)-2-丙烯-1-酮(3PO)进行干预。用Western blot法和免疫荧光法检测PIM1和平滑肌表型相关蛋白的表达;用Western blot法检测糖酵解酶6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)和己糖激酶2(HK2)表达,用乳酸测试盒检测VSMC上清乳酸分泌变化。结果:高脂饮食ApoE^(-/-)小鼠主动脉HE染色可见动脉粥样斑块形成。免疫荧光可见PIM1蛋白和合成表型蛋白OPN高表达在内膜下斑块组织内,收缩表型蛋白α-SMA主要分布在血管壁中膜层。主动脉壁Western blot结果显示,与普通饮食组相比,高脂饮食组PIM1蛋白表达显著增加(P<0.01),同时收缩表型蛋白(α-SMA和SM22a)表达显著减少,合成表型蛋白(OPN和CD68)表达显著增加(P<0.01)。体外细胞实验结果显示,oxLDL显著减少VSMC中α-SMA和SM22a表达,增加OPN和CD68表达(P<0.05或P<0.01),同时显著上调PIM1蛋白表达(P<0.01),增加糖酵解酶PFKFB3和HK2表达(P<0.05),伴随VSMC乳酸分泌水平升高(P<0.01)。SMI-4a处理和siPIM1转染VSMC,显著减弱了oxLDL以上诱导效果(P<0.05或P<0.01)。3PO显著抑制了oxLDL上调的糖酵解水平,同时抑制VSMC向合成表型的转化(P<0.05或P<0.01)。结论:PIM1高表达在ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块中。VSMC表型转化与PIM1表达水平有关 展开更多

关键词 PIM1蛋白 血管平滑肌细胞 表型 氧化低密度脂蛋白

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GATA4和RUNX2在良性脑膜瘤组织中的表达分析及临床意义 被引量：1

6

作者 李红旗 戢翰升 王小波 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第4期391-395,共5页

目的分析良性脑膜瘤组织中GATA结合蛋白4(GATA4)、Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达水平及临床意义。方法将2013年1月至2017年1月该院收治的100例良性脑膜瘤患者纳入研究。采用反转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测患者良性脑膜瘤组织和... 目的分析良性脑膜瘤组织中GATA结合蛋白4(GATA4)、Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达水平及临床意义。方法将2013年1月至2017年1月该院收治的100例良性脑膜瘤患者纳入研究。采用反转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测患者良性脑膜瘤组织和瘤旁组织中GATA4、RUNX2的表达水平,对良性脑膜瘤组织中GATA4与RUNX2表达水平的相关性进行分析。分析GATA4、RUNX2的表达述评与良性脑膜瘤患者临床病理参数的关系。采用Kaplan-Meier生存曲线分析GATA4、RUNX2表达水平对良性脑膜瘤患者预后的影响。采用单因素和多因素Cox回归分析良性脑膜瘤患者复发的独立危险因素。结果与瘤旁组织相比,良性脑膜瘤组织中GATA4、RUNX2的表达水平均明显增加(t=9.21、10.73,P<0.05)。良性脑膜瘤组织中GATA4和RUNX2的表达水平呈正相关(r=0.218,P=0.029)。GATA4、RUNX2在良性脑膜瘤组织中的表达水平与肿瘤最大径、有无瘤周水肿及Ki-67指数有关(P<0.05)。GATA4高表达及RUNX2高表达的良性脑膜瘤患者的复发率均较高(P<0.05)。GATA4高表达、RUNX2高表达、肿瘤最大径>5 cm、有瘤周水肿和Ki67指数≥4%是良性脑膜瘤患者复发的独立危险因素(P<0.05)。结论GATA4和RUNX2是预测良性脑膜瘤患者复发的参考指标。 展开更多

关键词 良性脑膜瘤 GATA结合蛋白4 Runt相关转录因子2 临床病理参数

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水通道蛋白1在切应力调节血管内皮细胞迁移和血管生成中的作用及机制 被引量：3

7

作者 张敏 孙玉 +3 位作者 杜大鹏 王小波 于建新 王汉琴 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期403-411,共9页

目的:探讨流体切应力作用下水通道蛋白1(AQP1)的表达对血管内皮细胞迁移和血管生成的影响及可能的机制。方法:取雄性C57BL/6小鼠主动脉弓和胸主动脉血管壁组织,用qPCR和Western blot检测体内不同切应力作用部位血管壁AQP1表达的差异。... 目的:探讨流体切应力作用下水通道蛋白1(AQP1)的表达对血管内皮细胞迁移和血管生成的影响及可能的机制。方法:取雄性C57BL/6小鼠主动脉弓和胸主动脉血管壁组织,用qPCR和Western blot检测体内不同切应力作用部位血管壁AQP1表达的差异。原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),体外采用平行平板流动腔系统给HUVECs分别加载层流(LF,15 dyn/cm^(2)单向层切应力)和扰流[DF,(0.5±4)dyn/cm^(2)振荡切应力],用特异性小干扰RNA(siRNA)转染技术沉默AQP1基因,采用Transwell实验和Matrigel小管形成实验检测HUVECs迁移和血管生成能力;用Western blot检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)Ser1177和Ser633磷酸化水平。结果:在体胸主动脉中AQP1的mRNA和蛋白表达显著高于主动脉弓(P<0.05)。HUVECs静态下敲减AQP1可以显著抑制细胞迁移和血管生成(P<0.01)。与DF组相比,LF显著上调HUVECs中AQP1的mRNA和蛋白表达(P<0.05),促进HUVECs迁移(P<0.01)和血管生成能力(P<0.05),同时显著增加eNOS Ser1177(P<0.01)和Ser633(P<0.05)磷酸化水平。转染siAQP1后,LF诱导的AQP1表达增强被抑制(P<0.01),HUVECs的迁移和血管生成能力也随之降低(P<0.01),同时eNOS Ser1177和Ser633的磷酸化水平降低(P<0.05或P<0.01)。eNOS抑制剂N^(G)-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)预处理HUVECs后,LF诱导的细胞迁移和血管生成能力被抑制(P<0.01)。结论:AQP1在流体切应力调节血管内皮细胞迁移和血管生成中发挥作用,其机制可能和eNOS信号有关。 展开更多

关键词 水通道蛋白1 切应力 血管生成 血管内皮细胞 内皮型一氧化氮合酶

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Pim-1在结核性胸膜炎和肺癌胸膜组织中的表达及临床意义

8

作者 肖君瑶 钟耕瑞 +2 位作者 王汉琴 王正艳 涂明利 《临床肺科杂志》 2023年第6期858-862,共5页

目的探讨Pim-1在结核性胸膜炎及在肺癌患者胸膜组织中的表达及临床意义。方法收集我院2021年1月-2021年11月内科胸腔镜手术切除的结核性胸膜炎及肺癌的胸膜活检标本共41例,其中结核性胸膜炎21例,肺癌20例。利用免疫组织化学法和Western-... 目的探讨Pim-1在结核性胸膜炎及在肺癌患者胸膜组织中的表达及临床意义。方法收集我院2021年1月-2021年11月内科胸腔镜手术切除的结核性胸膜炎及肺癌的胸膜活检标本共41例,其中结核性胸膜炎21例,肺癌20例。利用免疫组织化学法和Western-Blot法分别测定胸膜组织中Pim-1蛋白的表达情况,同时探寻与Pim-1表达有关的临床因素。结果Pim-1在结核性胸膜炎组中的阳性率为95.24%(20/21),在肺癌组中的阳性率为70%(12/20),结核性胸膜炎胸膜组织Pim-1表达水平更高(P<0.001);Western-Blot结果显示Pim-1在结核性胸膜炎中表达水平也高于肺癌组(P<0.01);结核组Pim-1蛋白表达与性别、吸烟史、BMI指数均无明显相关性(P>0.05),肺癌组中Pim-1蛋白表达与性别、吸烟史、BMI指数均无明显相关性(P>0.05),可能与淋巴结转移有关(P<0.01)。结论结核性胸膜炎胸膜组织中的Pim-1表达较高,检测胸膜组织中Pim-1对结核性胸膜炎和肺癌有鉴别诊断价值。 展开更多

关键词 结核性胸膜炎 肺癌 原癌基因蛋白质c-Pim-1 免疫组化 蛋白质印记

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切应力通过Pim1/Akt调节人脐静脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶Ser633和Ser1177位点磷酸化 被引量：1

9

作者 杜大鹏 孙玉 +1 位作者 张敏 王汉琴 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期546-552,共7页

目的探讨不同模式的血流切应力对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)Pim1表达的影响,以及对内皮型一氧化氮合酶(eNOS)Ser1177和Ser633位点磷酸化的调控作用。方法体外原代培养的HUVECs,采用平行平板流动腔系统给HUVECs分别施加15 dyn/cm2层流切应... 目的探讨不同模式的血流切应力对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)Pim1表达的影响,以及对内皮型一氧化氮合酶(eNOS)Ser1177和Ser633位点磷酸化的调控作用。方法体外原代培养的HUVECs,采用平行平板流动腔系统给HUVECs分别施加15 dyn/cm2层流切应力(LSS)和(0.5±4)dyn/cm2振荡切应力(OSS),Western blotting法检测Pim1、Akt和Akt Ser473磷酸化、eNOS、eNOS Ser1177和Ser633位点磷酸化蛋白表达。用特异性小干扰RNA(siRNA)技术分别敲低HUVECs中Pim1和Akt进行干预。结果与OSS刺激相比较,LSS显著上调HUVECs中Pim1蛋白表达水平(P<0.01),同时,Akt Ser473磷酸化、eNOS Ser633和Ser1177位点磷酸化蛋白表达增加(P<0.05或P<0.01);siPim1和Pim1特异性抑制剂SMI-4a干预后,LSS诱导的Pim1蛋白表达显著被抑制(P<0.05),同时Akt Ser473磷酸化、eNOS Ser633和Ser1177位点磷酸化蛋白表达均降低(P<0.05或P<0.01)。敲低Akt,LSS诱导的Akt Ser473磷酸化蛋白表达显著被抑制(P<0.05),同时也显著抑制LSS上调的eNOS Ser633和Ser1177磷酸化蛋白表达(P<0.05),而对LSS上调的Pim1表达无影响(P>0.05)。结论切应力可以通过Pim1/Akt信号通路调节HUVECs eNOS Ser633和Ser1177位点磷酸化。 展开更多

关键词 切应力 Pim1 内皮细胞 内皮型一氧化氮合酶 免疫印迹法 人

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L-鸟氨酸盐酸盐碳点的制备及其在细胞成像中的应用

10

作者 李进 白艳灵 +5 位作者 孙姝姝 邵剑鹏 项操 于建新 王汉琴 王小波 《湖北医药学院学报》 CAS 2017年第3期205-208,213,F0003,共6页

目的:以L-鸟氨酸盐酸盐探索制备新型碳点,并研究其在细胞成像领域的应用。方法:以L-鸟氨酸盐酸盐为碳源,利用一步水热法,制备出碳点,通过高分辨率透射电镜(HRTEM)、紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和傅里叶红外光谱(FTIR)等方法对碳点的大... 目的:以L-鸟氨酸盐酸盐探索制备新型碳点,并研究其在细胞成像领域的应用。方法:以L-鸟氨酸盐酸盐为碳源,利用一步水热法,制备出碳点,通过高分辨率透射电镜(HRTEM)、紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和傅里叶红外光谱(FTIR)等方法对碳点的大小、形貌和光学性能进行表征;MTT法检测碳点的细胞毒性,荧光显微镜观察碳点对肿瘤细胞A549成像能力。结果:L-鸟氨酸盐酸盐碳点具有水溶性好,粒径均一,荧光性质稳定,细胞毒性低等优点,并能用于A549细胞荧光成像。结论:L-鸟氨酸盐酸盐碳点具有优良的光学性质,有望应用于细胞成像领域。 展开更多

关键词 鸟氨酸盐酸盐 碳点 细胞成像

原文传递

Akt调节切应力诱导骨髓间充质干细胞Bmi-1基因的表达 被引量：1

11

作者 王微娜 孙晓东 +2 位作者 邱紫菡 王汉琴 黄铁柱 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第1期72-76,共5页

目的探讨流体切应力对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中Bmi-1基因表达的影响及可能的信号机制。方法原代体外分离培养大鼠BMSCs,应用平行平板流动腔系统,给BMSCs施加不同强度(0.5、1.5、3.0 Pa)和不同加... 目的探讨流体切应力对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中Bmi-1基因表达的影响及可能的信号机制。方法原代体外分离培养大鼠BMSCs,应用平行平板流动腔系统,给BMSCs施加不同强度(0.5、1.5、3.0 Pa)和不同加载时间(1、2、6、24 h)的层流切应力,用实时定量RT-PCR法检测Bmi-1基因的表达水平,用免疫印迹法检测磷酸化Akt和ERK1/2的表达水平,利用Wortmannin(PI3K特异性抑制剂)、PD98059(ERK1/2 MAPK特异性抑制剂)信号阻断剂探讨信号转导途径。结果 BMSCs在1.5 Pa切应力作用1 h后Bmi-1基因表达即明显增强,24 h达高峰。不同强度切应力都会刺激Bmi-1基因表达,其中3.0 Pa最强。切应力能显著激活磷酸化Akt和ERK1/2表达。Wortmannin而不是PD98059可以明显抑制Bmi-1基因的表达。结论切应力可诱导BMSCs中Bmi-1基因表达,其表达量与刺激时间和切应力的强度密切相关,这种作用可能通过Akt信号调节。 展开更多

关键词 间充质干细胞 基因表达 流体切应力 信号转导

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流体剪切应力对人脐静脉内皮细胞Pim-1基因表达的影响

12

作者 孙玉 王小波 +1 位作者 王汉琴 于建新 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期650-654,共5页

目的探讨流体剪切应力对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中Pim-1基因表达的影响及可能的信号机制。方法酶消化法分离健康产妇新鲜脐静脉获取原代HUVECs,应用平行平板流动腔系统给HUVECs加载不同时间(1、4、6 h)和不同大小(0.5、1.5、3.0 Pa)... 目的探讨流体剪切应力对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中Pim-1基因表达的影响及可能的信号机制。方法酶消化法分离健康产妇新鲜脐静脉获取原代HUVECs,应用平行平板流动腔系统给HUVECs加载不同时间(1、4、6 h)和不同大小(0.5、1.5、3.0 Pa)的层流剪切应力,用实时定量RT-PCR检测Pim-1基因的表达水平,用蛋白质印迹法检测p-Akt和p-STAT3的表达水平,利用Wortmannin(PI3K抑制剂)、Deguelin(Akt抑制剂)和AG490(JAK抑制剂)信号阻断剂探讨信号转导途径。结果 HUVECs在1.5 Pa剪切应力作用4 h后Pim-1基因表达明显增加。不同强度的切应力均会刺激Pim-1基因的表达,其中3.0 Pa表达最强。切应力能显著激活p-Akt和p-STAT3的表达。AG490可以明显抑制Pim-1的表达,而Wortmannin和Deguelin增强Pim-1的表达。结论流体剪切应力可诱导HUVECs中Pim-1基因表达,其表达量与刺激时间和剪切应力的强度密切相关,这种作用可能通过JAK/STAT3和PI3K/Akt信号通路调节。 展开更多

关键词 内皮细胞 PIM-1 剪切应力 基因表达

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切应力通过AQP1调节内皮细胞迁移、增殖和血管生成

13

作者 张敏 杜大鹏 王汉琴 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第S01期242-242,共1页

目的水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP1)参与内皮细胞的迁移、增殖和血管生成等过程。探讨层流切应力是否通过AQP1调节内皮细胞迁移、增殖和血管生成以及可能的机制。方法体外原代培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial ce... 目的水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP1)参与内皮细胞的迁移、增殖和血管生成等过程。探讨层流切应力是否通过AQP1调节内皮细胞迁移、增殖和血管生成以及可能的机制。方法体外原代培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)。 展开更多

关键词 内皮细胞迁移 水通道蛋白1 人脐静脉内皮细胞 AQP1 血管生成 切应力 体外原代培养 HUVECS

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AQP1通过Akt/eNOS调节层流切应力诱导的人脐静脉内皮细胞血管生成

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作者 张敏 王汉琴 《解剖学杂志》 CAS 2021年第S01期207-207,共1页

切应力诱导的内皮细胞血管生成(angiogenesis)在内皮损伤修复中有重要作用,水通道蛋白1(AQP1)与血管生成密切相关,本研究探讨AQP1是否可通过调节Akt/eNOS信号通路,从而调节层流切应力诱导的内皮细胞血管生成。

关键词 人脐静脉内皮细胞 血管生成 内皮损伤 AQP1 应力诱导 ENOS AKT 信号通路

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层流切应力通过Pim1/PFKFB3调节内皮细胞糖酵解

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作者 杜大鹏 钟耕瑞 王汉琴 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第S01期43-43,共1页

目的代谢酶PFKFB3是内皮细胞糖酵解途径的关键调节基因。丝/苏氨酸蛋白激酶Pim1参与细胞糖酵解过程。探讨层流切应力是否通过Pim1/PFKFB3途径调节内皮细胞糖酵解。方法体外原代培养人脐静脉内皮细胞,运用平行平板流体腔系统给内皮细胞... 目的代谢酶PFKFB3是内皮细胞糖酵解途径的关键调节基因。丝/苏氨酸蛋白激酶Pim1参与细胞糖酵解过程。探讨层流切应力是否通过Pim1/PFKFB3途径调节内皮细胞糖酵解。方法体外原代培养人脐静脉内皮细胞,运用平行平板流体腔系统给内皮细胞施加层流切应力(1.5 Pa),1 h,以静止培养为对照。用Lip3000转染过表达质粒和特异性小干扰RNA(siRNA)分别建立Pim1和PFKFB3过表达和敲低的内皮细胞。 展开更多

关键词 内皮细胞 切应力 糖酵解 丝/苏氨酸蛋白激酶 静止培养 平行平板 调节基因

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