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蒺藜皂苷抑制肿瘤坏死因子α和干扰素γ诱导HaCaT细胞的炎症反应
被引量:
9
1
作者
李桂双
卜洁琼
龙剑文
《中国皮肤性病学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第2期131-137,共7页
目的探讨蒺藜皂苷(gross saponins of tribulus terrestris,GSTT)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(IFN-γ)刺激后HaCaT细胞的炎症相关因子产生的影响及可能机制。方法采用CCK-8细胞活力测定法检测不同浓度蒺藜皂苷对HaCaT细胞增殖...
目的探讨蒺藜皂苷(gross saponins of tribulus terrestris,GSTT)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(IFN-γ)刺激后HaCaT细胞的炎症相关因子产生的影响及可能机制。方法采用CCK-8细胞活力测定法检测不同浓度蒺藜皂苷对HaCaT细胞增殖的影响,ELISA法检测蒺藜皂苷对TNF-α和IFN-γ刺激后HaCaT细胞趋化因子产生的影响; Western印迹法对诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxidesynthase,i NOS)、环氧合酶-2 (Cyclooxygenase-2,COX-2)、丝聚合蛋白(Filaggrin,FLG)、外皮蛋白(Involucrin,IVL)以及NF-κB通路和MAPK通路的相关蛋白进行了检测;免疫荧光法检测了TNF-α和IFN-γ刺激后HaCaT细胞核因子κB(NF-κB)蛋白核转位。结果在所选浓度内,蒺藜皂苷对HaCaT细胞增殖无明显影响,下调了TNF-α和IFN-γ诱导的HaCaT细胞培养上清中胸腺和活化调节趋化因子(TARC),人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC),调节激活正常T细胞表达分泌因子(RANTES)和白介素-8(IL-8)的表达。蒺藜皂苷能剂量依赖性抑制TNF-α和IFN-γ诱导的HaCaT细胞i NOS和COX2的表达,促进FLG和IVL蛋白的表达;并降低TNF-α和IFN-γ诱导的HaCaT细胞胞核内p65的水平,抑制p65的核转位,提高胞浆内IκB的水平;蒺藜皂苷能剂量依赖性抑制TNF-α和IFN-γ诱导的HaCaT细胞MAPK通路中p38蛋白和ERK蛋白的磷酸化。结论蒺藜皂苷可能通过调节NF-κB通路和p38/ERK MAPK通路的活化抑制了TNF-α和IFN-γ刺激后HaCaT炎症相关因子产生,促进皮肤屏障功能的恢复。
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关键词
蒺藜皂苷
炎症
角质形成细胞
NF-ΚB通路
MAPK通路
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职称材料
葡萄籽原花青素对中波紫外线诱导HaCaT细胞氧化损伤的保护作用
被引量:
6
2
作者
李桂双
卜洁琼
龙剑文
《中国麻风皮肤病杂志》
2018年第10期580-584,共5页
目的:明确葡萄籽原花青素(GSPE)对UVB损伤角质形成细胞的保护作用。方法:体外培养HaCaT细胞,分为正常对照组、UVB组、UVB+GSPE高剂量(200μg/mL)、中剂量(100μg/mL)和低剂量组(50μg/mL)。CCK-8法检测HaCaT细胞增殖能力;Annexin V-FITC...
目的:明确葡萄籽原花青素(GSPE)对UVB损伤角质形成细胞的保护作用。方法:体外培养HaCaT细胞,分为正常对照组、UVB组、UVB+GSPE高剂量(200μg/mL)、中剂量(100μg/mL)和低剂量组(50μg/mL)。CCK-8法检测HaCaT细胞增殖能力;Annexin V-FITC/PI染色后,流式细胞仪检测细胞凋亡率;比色法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)和LDH水平。DCFH-DA染色法测定细胞内活性氧水平;罗丹明123染色法检测细胞线粒体膜电位水平。Western blot检测细胞内Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase-3蛋白表达。结果:UVB+GSPE组与UVB组比较,细胞SOD和GSH-Px活性、Bcl-2表达量和线粒体膜电位水平增高,MDA、LDH水平、凋亡细胞数、Bax、Cleaved-caspase-3表达和细胞内活性氧水平明显降低。结论:GSPE对中波紫外线辐射诱导的表皮角质形成细胞凋亡、氧化损伤具有一定的保护作用。
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关键词
HACAT细胞
中波紫外线
葡萄籽原花青素
氧化损伤
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职称材料
重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响
被引量:
2
3
作者
龙剑文
罗晶
+5 位作者
尹绪文
卫静
贺琪
李恒
石全
皮先明
《中华皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期883-888,共6页
目的 研究重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响及相关机制。方法 采用CCK8法测定0(对照组)、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞和A375细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测...
目的 研究重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响及相关机制。方法 采用CCK8法测定0(对照组)、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞和A375细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测A375细胞周期变化及细胞凋亡水平;荧光染料(DCFH?DA)测定A375细胞内活性氧的变化;罗丹明123染色测定线粒体膜电位变化;利用分光光度法检测重楼皂苷Ⅰ处理后的A375细胞内ATP和上清液中乳酸、葡萄糖含量;Western印迹法检测A375细胞内Bcl?2、Bcl?2相关X蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3、细胞周期蛋白D1、丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)表达。多组均数比较采用单因素方差分析,组间多重比较采用SNK?q检验。结果 在工作浓度内重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞增殖无明显影响,但能明显抑制 A375 细胞的增殖(P 〈 0.01);荧光显微镜下发现,重楼皂苷Ⅰ处理后的 A375 细胞出现明显的凋亡形态。0(对照组)、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ分别处理A375细胞后,随重楼皂苷Ⅰ浓度增加,细胞凋亡率(分别为4.25% ± 1.27%、10.03% ± 1.49%、36.62% ± 1.97%、44.11% ± 2.47%)逐渐升高(F = 665.7,P 〈 0.01),G0/G1期细胞比例(分别为54.13% ± 2.57%、67.35% ± 3.79%、74.39% ± 3.29%、82.29% ± 3.99%)亦渐增多(F = 71.81,P 〈 0.01);细胞内活性氧呈明显上升趋势,细胞线粒体膜电位呈明显下降趋势(P 〈 0.01);细胞内ATP含量下降(P 〈 0.01),培养液中乳酸含量下降,葡萄糖含量上升(P 〈 0.01);细胞Bax、cleaved?caspase?3蛋白表达增多,但Cyclin D1、Bcl?2和PKM2蛋白表达下降(P 〈 0.01)。结论 重楼皂苷Ⅰ可能通过激活细胞内活性氧的产生,引起线粒体膜电位下降,诱导A375细胞凋亡,并通过抑制PKM2、细胞周期蛋白D1表达,使细胞阻滞�
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关键词
黑素瘤
细胞系
肿瘤
细胞凋亡
活性氧
细胞增殖
重楼皂苷Ⅰ
原文传递
题名
蒺藜皂苷抑制肿瘤坏死因子α和干扰素γ诱导HaCaT细胞的炎症反应
被引量:
9
1
作者
李桂双
卜洁琼
龙剑文
机构
山东省日照市
皮肤
病防治所
山东省日照市疾病预防控制中心
湖北
中医药大学
第一
临床学
院
皮肤科
出处
《中国皮肤性病学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第2期131-137,共7页
文摘
目的探讨蒺藜皂苷(gross saponins of tribulus terrestris,GSTT)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(IFN-γ)刺激后HaCaT细胞的炎症相关因子产生的影响及可能机制。方法采用CCK-8细胞活力测定法检测不同浓度蒺藜皂苷对HaCaT细胞增殖的影响,ELISA法检测蒺藜皂苷对TNF-α和IFN-γ刺激后HaCaT细胞趋化因子产生的影响; Western印迹法对诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxidesynthase,i NOS)、环氧合酶-2 (Cyclooxygenase-2,COX-2)、丝聚合蛋白(Filaggrin,FLG)、外皮蛋白(Involucrin,IVL)以及NF-κB通路和MAPK通路的相关蛋白进行了检测;免疫荧光法检测了TNF-α和IFN-γ刺激后HaCaT细胞核因子κB(NF-κB)蛋白核转位。结果在所选浓度内,蒺藜皂苷对HaCaT细胞增殖无明显影响,下调了TNF-α和IFN-γ诱导的HaCaT细胞培养上清中胸腺和活化调节趋化因子(TARC),人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC),调节激活正常T细胞表达分泌因子(RANTES)和白介素-8(IL-8)的表达。蒺藜皂苷能剂量依赖性抑制TNF-α和IFN-γ诱导的HaCaT细胞i NOS和COX2的表达,促进FLG和IVL蛋白的表达;并降低TNF-α和IFN-γ诱导的HaCaT细胞胞核内p65的水平,抑制p65的核转位,提高胞浆内IκB的水平;蒺藜皂苷能剂量依赖性抑制TNF-α和IFN-γ诱导的HaCaT细胞MAPK通路中p38蛋白和ERK蛋白的磷酸化。结论蒺藜皂苷可能通过调节NF-κB通路和p38/ERK MAPK通路的活化抑制了TNF-α和IFN-γ刺激后HaCaT炎症相关因子产生,促进皮肤屏障功能的恢复。
关键词
蒺藜皂苷
炎症
角质形成细胞
NF-ΚB通路
MAPK通路
Keywords
Gross saponins of tribulus terrestris
Chemokine
Keratinocyte
NF-κB pathway
MAPK pathway
分类号
R751 [医药卫生—皮肤病学与性病学]
下载PDF
职称材料
题名
葡萄籽原花青素对中波紫外线诱导HaCaT细胞氧化损伤的保护作用
被引量:
6
2
作者
李桂双
卜洁琼
龙剑文
机构
山东省日照市
皮肤
病防治所
山东省日照市疾病预防控制中心
湖北
中医药大学
第一
临床学
院
皮肤科
出处
《中国麻风皮肤病杂志》
2018年第10期580-584,共5页
文摘
目的:明确葡萄籽原花青素(GSPE)对UVB损伤角质形成细胞的保护作用。方法:体外培养HaCaT细胞,分为正常对照组、UVB组、UVB+GSPE高剂量(200μg/mL)、中剂量(100μg/mL)和低剂量组(50μg/mL)。CCK-8法检测HaCaT细胞增殖能力;Annexin V-FITC/PI染色后,流式细胞仪检测细胞凋亡率;比色法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)和LDH水平。DCFH-DA染色法测定细胞内活性氧水平;罗丹明123染色法检测细胞线粒体膜电位水平。Western blot检测细胞内Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase-3蛋白表达。结果:UVB+GSPE组与UVB组比较,细胞SOD和GSH-Px活性、Bcl-2表达量和线粒体膜电位水平增高,MDA、LDH水平、凋亡细胞数、Bax、Cleaved-caspase-3表达和细胞内活性氧水平明显降低。结论:GSPE对中波紫外线辐射诱导的表皮角质形成细胞凋亡、氧化损伤具有一定的保护作用。
关键词
HACAT细胞
中波紫外线
葡萄籽原花青素
氧化损伤
Keywords
HaCaT cells
UVB
grape seed proanthocyanidin extract
oxidative stress
分类号
R758.1 [医药卫生—皮肤病学与性病学]
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职称材料
题名
重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响
被引量:
2
3
作者
龙剑文
罗晶
尹绪文
卫静
贺琪
李恒
石全
皮先明
机构
湖北
中医药大学
第一
临床学
院
皮肤科
湖北
省
中医
院
皮肤科
湖北
省
中医
院
皮肤科
出处
《中华皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期883-888,共6页
基金
湖北省卫生计生委中西医结合科研计划项目(2013Z-B05)
文摘
目的 研究重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响及相关机制。方法 采用CCK8法测定0(对照组)、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞和A375细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测A375细胞周期变化及细胞凋亡水平;荧光染料(DCFH?DA)测定A375细胞内活性氧的变化;罗丹明123染色测定线粒体膜电位变化;利用分光光度法检测重楼皂苷Ⅰ处理后的A375细胞内ATP和上清液中乳酸、葡萄糖含量;Western印迹法检测A375细胞内Bcl?2、Bcl?2相关X蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3、细胞周期蛋白D1、丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)表达。多组均数比较采用单因素方差分析,组间多重比较采用SNK?q检验。结果 在工作浓度内重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞增殖无明显影响,但能明显抑制 A375 细胞的增殖(P 〈 0.01);荧光显微镜下发现,重楼皂苷Ⅰ处理后的 A375 细胞出现明显的凋亡形态。0(对照组)、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ分别处理A375细胞后,随重楼皂苷Ⅰ浓度增加,细胞凋亡率(分别为4.25% ± 1.27%、10.03% ± 1.49%、36.62% ± 1.97%、44.11% ± 2.47%)逐渐升高(F = 665.7,P 〈 0.01),G0/G1期细胞比例(分别为54.13% ± 2.57%、67.35% ± 3.79%、74.39% ± 3.29%、82.29% ± 3.99%)亦渐增多(F = 71.81,P 〈 0.01);细胞内活性氧呈明显上升趋势,细胞线粒体膜电位呈明显下降趋势(P 〈 0.01);细胞内ATP含量下降(P 〈 0.01),培养液中乳酸含量下降,葡萄糖含量上升(P 〈 0.01);细胞Bax、cleaved?caspase?3蛋白表达增多,但Cyclin D1、Bcl?2和PKM2蛋白表达下降(P 〈 0.01)。结论 重楼皂苷Ⅰ可能通过激活细胞内活性氧的产生,引起线粒体膜电位下降,诱导A375细胞凋亡,并通过抑制PKM2、细胞周期蛋白D1表达,使细胞阻滞�
关键词
黑素瘤
细胞系
肿瘤
细胞凋亡
活性氧
细胞增殖
重楼皂苷Ⅰ
Keywords
Melanoma Cell line, tumor Apoptosis Reactive oxygen species Cell proliferation Polyphyllin Ⅰ
分类号
R285 [医药卫生—中药学]
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1
蒺藜皂苷抑制肿瘤坏死因子α和干扰素γ诱导HaCaT细胞的炎症反应
李桂双
卜洁琼
龙剑文
《中国皮肤性病学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
9
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职称材料
2
葡萄籽原花青素对中波紫外线诱导HaCaT细胞氧化损伤的保护作用
李桂双
卜洁琼
龙剑文
《中国麻风皮肤病杂志》
2018
6
下载PDF
职称材料
3
重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响
龙剑文
罗晶
尹绪文
卫静
贺琪
李恒
石全
皮先明
《中华皮肤科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
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