目的研究维生素D受体(VDR)基因启动子甲基化异常与婴儿尿路感染的关系。方法选择急性尿路感染患儿32例(尿路感染组)和同期健康体检婴儿30例(健康对照组)。采用荧光定量PCR法检测VDR、DNA甲基化转移酶(DNMTs)m RNA表达水平,重亚硫酸氢钠...目的研究维生素D受体(VDR)基因启动子甲基化异常与婴儿尿路感染的关系。方法选择急性尿路感染患儿32例(尿路感染组)和同期健康体检婴儿30例(健康对照组)。采用荧光定量PCR法检测VDR、DNA甲基化转移酶(DNMTs)m RNA表达水平,重亚硫酸氢钠测序技术检测VDR基因启动子的甲基化水平。结果尿路感染组患儿VDR m RNA表达水平高于健康对照组婴儿,DNMT1 m RNA表达水平低于健康对照组婴儿,两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。两组DNMT3a、DNMT3b m RNA表达水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。尿路感染组患儿VDR基因启动子甲基化水平显著低于健康对照组婴儿,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论尿路感染患儿VDR m RNA表达水平升高,VDR基因启动子的甲基化水平降低,VDR基因甲基化异常与婴儿尿路感染相关。展开更多
目的观察柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)siRNA对体外血睾屏障完整性的影响,探讨睾丸CAR分子功能。方法体外建立血睾屏障模型,以CAR siRNA和阴性对照siRNA进行转染,然后以RTPCR和Western blot法检测相关基因mRNA或蛋白表达的变化,免疫荧光...目的观察柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)siRNA对体外血睾屏障完整性的影响,探讨睾丸CAR分子功能。方法体外建立血睾屏障模型,以CAR siRNA和阴性对照siRNA进行转染,然后以RTPCR和Western blot法检测相关基因mRNA或蛋白表达的变化,免疫荧光法检测蛋白分布,以及测量跨上皮电阻的改变。结果 CAR siRNA组较对照组CAR表达显著降低。与对照组比较,CAR siRNA显著降低了跨上皮电阻,同时,也显著降低了ZO-1的表达,使其分布发生紊乱。结论 CAR siRNA降低支持细胞上皮屏障功能,CAR是血睾屏障的重要调控分子。展开更多
目的:观察Ran结合蛋白M(RanBPM)对肾小管钠-氯共同转运子(NCC)蛋白表达及相关ERK1/2信号通路蛋白表达的影响。方法:免疫共沉淀检测RanBPM蛋白与WNK4蛋白是否存在直接相互作用;观察转染RanBPM质粒对EGF诱导细胞ERK1/2磷酸化的影响,通过...目的:观察Ran结合蛋白M(RanBPM)对肾小管钠-氯共同转运子(NCC)蛋白表达及相关ERK1/2信号通路蛋白表达的影响。方法:免疫共沉淀检测RanBPM蛋白与WNK4蛋白是否存在直接相互作用;观察转染RanBPM质粒对EGF诱导细胞ERK1/2磷酸化的影响,通过转染质粒过表达RanBPM蛋白或siRNA抑制RanBPM基因,免疫蛋白印迹法检测细胞内源性NCC蛋白含量和ERK1/2磷酸化水平的变化。结果:免疫共沉淀实验证实WNK4和RanBPM之间存在直接的相互作用。RanBPM可以抑制EGF诱导的ERK1/2磷酸化。RanBPM过表达可使细胞ERK1/2磷酸化减少(1.000±0.074 vs. 0.275±0.041,P<0.01),而NCC蛋白表达增加(1.000±0.115 vs.1.470±0.105,P<0.01)。siRNA沉默RanBPM基因后,ERK1/2磷酸化增加(1.000±0.194 vs. 2.301±0.220,P<0.01),NCC蛋白表达下降(1.000±0.223 vs. 0.556±0.132,P<0.01)。转染RanBPM可阻止WNK4对ERK1/2信号通路的影响和对NCC蛋白表达的抑制作用。结论:RanBPM通过与WNK4相互作用,影响ERK1/2信号通路对NCC蛋白表达的调控作用。展开更多
文摘目的研究维生素D受体(VDR)基因启动子甲基化异常与婴儿尿路感染的关系。方法选择急性尿路感染患儿32例(尿路感染组)和同期健康体检婴儿30例(健康对照组)。采用荧光定量PCR法检测VDR、DNA甲基化转移酶(DNMTs)m RNA表达水平,重亚硫酸氢钠测序技术检测VDR基因启动子的甲基化水平。结果尿路感染组患儿VDR m RNA表达水平高于健康对照组婴儿,DNMT1 m RNA表达水平低于健康对照组婴儿,两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。两组DNMT3a、DNMT3b m RNA表达水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。尿路感染组患儿VDR基因启动子甲基化水平显著低于健康对照组婴儿,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论尿路感染患儿VDR m RNA表达水平升高,VDR基因启动子的甲基化水平降低,VDR基因甲基化异常与婴儿尿路感染相关。
文摘目的观察柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)siRNA对体外血睾屏障完整性的影响,探讨睾丸CAR分子功能。方法体外建立血睾屏障模型,以CAR siRNA和阴性对照siRNA进行转染,然后以RTPCR和Western blot法检测相关基因mRNA或蛋白表达的变化,免疫荧光法检测蛋白分布,以及测量跨上皮电阻的改变。结果 CAR siRNA组较对照组CAR表达显著降低。与对照组比较,CAR siRNA显著降低了跨上皮电阻,同时,也显著降低了ZO-1的表达,使其分布发生紊乱。结论 CAR siRNA降低支持细胞上皮屏障功能,CAR是血睾屏障的重要调控分子。
文摘目的:观察Ran结合蛋白M(RanBPM)对肾小管钠-氯共同转运子(NCC)蛋白表达及相关ERK1/2信号通路蛋白表达的影响。方法:免疫共沉淀检测RanBPM蛋白与WNK4蛋白是否存在直接相互作用;观察转染RanBPM质粒对EGF诱导细胞ERK1/2磷酸化的影响,通过转染质粒过表达RanBPM蛋白或siRNA抑制RanBPM基因,免疫蛋白印迹法检测细胞内源性NCC蛋白含量和ERK1/2磷酸化水平的变化。结果:免疫共沉淀实验证实WNK4和RanBPM之间存在直接的相互作用。RanBPM可以抑制EGF诱导的ERK1/2磷酸化。RanBPM过表达可使细胞ERK1/2磷酸化减少(1.000±0.074 vs. 0.275±0.041,P<0.01),而NCC蛋白表达增加(1.000±0.115 vs.1.470±0.105,P<0.01)。siRNA沉默RanBPM基因后,ERK1/2磷酸化增加(1.000±0.194 vs. 2.301±0.220,P<0.01),NCC蛋白表达下降(1.000±0.223 vs. 0.556±0.132,P<0.01)。转染RanBPM可阻止WNK4对ERK1/2信号通路的影响和对NCC蛋白表达的抑制作用。结论:RanBPM通过与WNK4相互作用,影响ERK1/2信号通路对NCC蛋白表达的调控作用。
