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内质网应激与疾病 被引量：38
1
作者 陈娜子 姜潮 李校堃 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期76-85,共10页
内质网是蛋白质合成与折叠、维持Ca^(2+)动态平衡及合成脂类和固醇的场所。遗传或环境损伤引起内质网功能紊乱导致内质网应激,激活未折叠蛋白反应。未折叠蛋白反应是一种细胞自我保护性措施,但是内质网应激过强或持续时间过久可引起细... 内质网是蛋白质合成与折叠、维持Ca^(2+)动态平衡及合成脂类和固醇的场所。遗传或环境损伤引起内质网功能紊乱导致内质网应激,激活未折叠蛋白反应。未折叠蛋白反应是一种细胞自我保护性措施,但是内质网应激过强或持续时间过久可引起细胞凋亡。因此,内质网应激与众多人类疾病的发生发展密切相关。最近研究证明,癌症、炎症性疾病、代谢性疾病、骨质疏松症及神经退行性疾病等有内质网应激信号传递参与。然而内质网应激作为一个有效靶点参与各种疾病发挥作用的功能和机制仍然有待进一步研究。在近年来发表的文献基础上对内质网应激与疾病的关系,以及其可能的作用机制进行综述。 展开更多
关键词 内质网应激 未折叠蛋白反应 疾病 细胞凋亡
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[PEAD-肝素-NGF]生物材料对糖尿病大鼠周围神经病变的改善作用
2
作者 李锐 邹双 +2 位作者 刘彦隆 张宏宇 肖健 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期941-947,共7页
目的探究新型生物材料poly(ethylene argininylaspartate diglyceride)(PEAD)-肝素-神经生长因子(PEAD-肝素-NGF)对糖尿病大鼠坐骨神经病变的作用。方法成年雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病外周神经病变(DPN)模型,随机分为模型... 目的探究新型生物材料poly(ethylene argininylaspartate diglyceride)(PEAD)-肝素-神经生长因子(PEAD-肝素-NGF)对糖尿病大鼠坐骨神经病变的作用。方法成年雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病外周神经病变(DPN)模型,随机分为模型组、NGF治疗组及[PEAD-肝素-NGF]团聚体治疗组并给予对应的药物治疗,每周对各组进行行为学测试并在第30天将收集的坐骨神经进行HE染色及TUNEL凋亡检测。细胞水平上,将处于对数期的RSC 96大鼠雪旺细胞(SCs)培养于30 mmol·L^(-1)高糖环境下并给予NGF处理24 h,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞术检测各组的凋亡情况。结果 DPN大鼠经[PEAD-肝素-NGF]团聚体治疗后,运动和感觉功能恢复良好,神经纤维节段性脱髓鞘情况改善明显并显著抑制SCs的凋亡。结论 [PEAD-肝素-NGF]团聚体治疗DPN效果显著,为该药应用于临床提供数据支持。 展开更多
关键词 糖尿病周围神经病变 神经生长因子 雪旺细胞 高糖 团聚体
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HBV pre-c-Fc融合蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其生物学活性研究 被引量：1
3
作者 王晓艳 陈娜子 +5 位作者 艾君 赵央 吴美玉 黄金枝 姜潮 李校堃 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期42-47,共6页
目的:在杆状病毒表达系统中表达融合蛋白乙型肝炎病毒前C蛋白-小鼠IgG Fc蛋白(HBV precore protein-mouse IgG Fc,HBV pre-c-Fc),并鉴定其免疫原性。方法:目的基因HBV prec-Fc连接到pFastBac1载体,获得的pFastBac1-HBV pre-c-Fc质粒转化... 目的:在杆状病毒表达系统中表达融合蛋白乙型肝炎病毒前C蛋白-小鼠IgG Fc蛋白(HBV precore protein-mouse IgG Fc,HBV pre-c-Fc),并鉴定其免疫原性。方法:目的基因HBV prec-Fc连接到pFastBac1载体,获得的pFastBac1-HBV pre-c-Fc质粒转化DH10Bac感受态,通过Tn7转座子将目的基因转座到Bacmid中,得到Bacmid-HBV pre-c-Fc穿梭载体,脂质体包被后转染Sf9昆虫细胞获得P1代病毒,重复转染Sf9获得高滴度病毒。收集细胞上清超滤后通过Protein G亲和层析柱纯化得到目的蛋白HBV pre-c-Fc。纯化的蛋白大腿内侧肌肉注射免疫BALB/c小鼠并检测血清中乙型肝炎病毒核心蛋白抗体产生量。结果:HBV pre-c-Fc在昆虫细胞中成功表达,纯化后蛋白纯度达90%以上,蛋白产量约为3.03mg/L,纯化蛋白能有效刺激BALB/c小鼠产生特异抗体。结论:成功地在杆状病毒表达系统中表达了具有免疫原性的HBV pre-c-Fc蛋白,为生产乙肝治疗性疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒前核心蛋白 杆状病毒表达系统 SF9细胞
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拟南芥双油体蛋白融合表达KGF-2及其生物学活性研究
4
作者 艾君 姜潮 +3 位作者 刘敏 王晓艳 田海山 李校堃 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期21-26,共6页
目的:构建p1301-YO-K2-YO双油体KGF-2融合蛋白表达载体并转化拟南芥,与p1301-YO-K2单油体KGF-2融合蛋白表达载体对比,观察是否能够提高外源蛋白KGF-2的表达量,并对融合蛋白生物学活性进行鉴定。方法:PCR获得拟南芥油体蛋白oleosin和KGF-... 目的:构建p1301-YO-K2-YO双油体KGF-2融合蛋白表达载体并转化拟南芥,与p1301-YO-K2单油体KGF-2融合蛋白表达载体对比,观察是否能够提高外源蛋白KGF-2的表达量,并对融合蛋白生物学活性进行鉴定。方法:PCR获得拟南芥油体蛋白oleosin和KGF-2核心区基因片段,融合PCR获得KGF-2-oleosin融合基因,与包含有一个oleosin的p1301-oleosin载体连接,构建p1301-YO-K2-YO(oleosin-KGF-2-oleosin)表达载体,利用农杆菌介导法将其转入拟南芥中进行表达,除草剂筛选获得转基因植株,通过PCR鉴定、SDS-PAGE、Western blot对KGF-2蛋白表达进行分析,提取油体蛋白涂抹法观察对C57BL/6小鼠的毛囊促生长作用。结果:双油体载体成功转入拟南芥基因组中;Western blot灰度分析可知,与单油体表达载体p1301-YO-K2相比,双油体融合表达策略可使KGF-2蛋白表达量提高2.5倍左右;动物实验结果表明油体融合蛋白具有良好的促毛囊增殖活性。 展开更多
关键词 拟南芥 角质细胞生长因子-2 双油体KGF-2融合蛋白
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新型温敏型肝素-泊洛沙姆水凝胶包载神经生长因子对糖尿病外周神经损伤修复的作用 被引量：6
5
作者 李锐 李多慧 +1 位作者 全大萍 肖健 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期992-999,共8页
目的探讨神经生长因子-肝素泊洛沙姆水凝胶(NGF-HP)对糖尿病大鼠坐骨神经损伤的修复作用。方法成年雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素以制备糖尿病(DM)模型。成模后,暴露并分离术侧的坐骨神经,运用静脉夹压迫神经以造成外周神经损伤(PNI)。... 目的探讨神经生长因子-肝素泊洛沙姆水凝胶(NGF-HP)对糖尿病大鼠坐骨神经损伤的修复作用。方法成年雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素以制备糖尿病(DM)模型。成模后,暴露并分离术侧的坐骨神经,运用静脉夹压迫神经以造成外周神经损伤(PNI)。同时,将其随机分为模型组(PNI-diabetics),游离NGF组(free NGF)及NGF-HP水凝胶组(NGF-HP hydrogel)。每组给予对应的药物治疗,同时在神经损伤后的每周进行斜板试验和BBB评分。30 d后,处死各组大鼠并收集术侧的坐骨神经,运用免疫印迹检测各组神经内部结构和功能蛋白的表达,运用免疫荧光、Masson三色染色和透射电镜观察各组神经内轴突和髓鞘的再生。结果该水凝胶可装载一定剂量的神经生长因子(NGF)并缓控其释放。体内实验结果表明,单次注射一定体积的NGF-HP水凝胶后,PNI-diabetics大鼠运动功能恢复良好,神经内GAP-43、MAP-2、MBP及S-100的含量出现显著地上调,神经纤维的再生效果良好且脱髓鞘情况改善显著。结论NGF-HP对PNI-diabetics疾病具有优越的疗效,为该药应进入临床提供理论依据。 展开更多
关键词 外周神经损伤 糖尿病 肝素-泊洛沙姆水凝胶 神经生长因子 再髓鞘化
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