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扩增结核分枝杆菌DNA的微孔杂交比色检测
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作者 郭露 杨正林 +2 位作者 杜琼 罗涛 杨明 《四川医学》 CAS 2000年第4期299-301,共3页
目的 建立简单的杂交方法特异地检测聚合酶链反应 (PCR)扩增的结核杆菌 DNA。方法 用玻璃粉提纯结核分枝杆菌 DNA,d UTP-脲 DNA糖基化酶 (UDG)防污染 ,用 5′端标记生物素的引物进行 PCR扩增 ,5′端带标记的扩增产物与固定在微孔板上... 目的 建立简单的杂交方法特异地检测聚合酶链反应 (PCR)扩增的结核杆菌 DNA。方法 用玻璃粉提纯结核分枝杆菌 DNA,d UTP-脲 DNA糖基化酶 (UDG)防污染 ,用 5′端标记生物素的引物进行 PCR扩增 ,5′端带标记的扩增产物与固定在微孔板上特异探针杂交 ,然后用酶标链霉亲和素进行酶联免疫法检测。结果 对 10 0份来自结核病人高度怀疑有结核分枝杆菌的痰标本检测 ,扩增杂交法检出 40份阳性 ,比抗酸染色法 (15 / 10 0 ) ,培养法 (2 8/ 10 0 )和 PCR电泳法 (35 / 10 0 )检出率高 ,而 5 0份来自无结核感染者的痰标本 ,几种方法检查均为阴性。结论 该方法可灵敏、特异、客观地检测临床标本中的结核分枝杆菌 ,比传统 PCR—电泳法优越。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 DNA 微孔杂交 比色检测
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