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IgG-HepG2细胞评价复方苦参注射液及其生产过程可能产生致敏原的研究——利用生物技术进行过程监控致敏性的方法学探索 被引量：6
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作者 袁梽漪 王玉刚 +9 位作者 雷帆 卢希 赵爽 姜敬非 李慧玉 陈勃杭 王智民 邢东明 丁怡 杜力军 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1850-1854,共5页
目的:利用IgG promoter-HepG2细胞对复方苦参注射液生产过程中可能产生致敏原的生产节点进行研究。方法:构建IgG启动子调控绿色荧光蛋白表达质粒,转染入HepG2细胞,与常见致敏性物质(葛根素,卵白蛋白,LPS和伤寒菌疫苗)、复方苦参注射剂... 目的:利用IgG promoter-HepG2细胞对复方苦参注射液生产过程中可能产生致敏原的生产节点进行研究。方法:构建IgG启动子调控绿色荧光蛋白表达质粒,转染入HepG2细胞,与常见致敏性物质(葛根素,卵白蛋白,LPS和伤寒菌疫苗)、复方苦参注射剂中使用到的辅料(NaOH,醋酸,聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯即吐温80和乙醇)和生产过程中关键节点样品(S1～S8)进行孵育,30 m in后拍照,图像分析软件统计细胞荧光强度变化。结果:IgG promoter-HepG2细胞对常见致敏性物质呈阳性反应。注射剂辅料中醋酸和吐温80有致敏性,生产过程8个样品中,2个样品有显著致敏性。结论:IgG promoter-HepG2细胞对常见致敏原反应敏感,特异性高,适用于中药注射剂中致敏原快速筛选,可实现对中药注射剂生产过程中致敏原的实时监控。 展开更多
关键词 IGG 中药注射剂 苦参 过敏反应
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用于评价致敏原的IgG-HepG2细胞激活过程中相关炎性因子表达的观察 被引量：2
2
作者 卢希 王明玮 +6 位作者 雷帆 王玉刚 袁梽漪 赵爽 李慧玉 邢东明 杜力军 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1855-1859,共5页
目的:研究转IgG启动子调控GFP基因表达HepG2细胞激活过程中相关炎性因子表达的变化。方法:采用E lisa法评价葛根素和LPS后诱导IgG启动子转基因细胞分泌IL-1,βIL-8,TNF-α和MCP-1蛋白量,qPCR法评价炎性相关因子和固有免疫相关因子的mRN... 目的:研究转IgG启动子调控GFP基因表达HepG2细胞激活过程中相关炎性因子表达的变化。方法:采用E lisa法评价葛根素和LPS后诱导IgG启动子转基因细胞分泌IL-1,βIL-8,TNF-α和MCP-1蛋白量,qPCR法评价炎性相关因子和固有免疫相关因子的mRNA转录表达量。结果:和HepG2细胞相比,IgG启动子转基因细胞不增加炎性因子分泌和基因表达量,不激活固有免疫。葛根素不增加转基因细胞炎性因子分泌和基因表达量,不激活固有免疫系统。LPS激活固有免疫系统,显著升高IL-8,TNF-α和MCP-1分泌量。结论:IgG启动子转基因HepG2细胞可以作为评价II型变态反应的特异性细胞模型,提示葛根素可以作为特异性激活IgG启动子的阳性对照品。 展开更多
关键词 IgG启动子 致敏原 炎性因子
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