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结核分枝杆菌早期分泌抗原ESAT-6的高效表达及其在结核分枝杆菌特异性细胞免疫检测中的应用 被引量：7
1
作者 张晶 刘威龙 +6 位作者 周伯平 张明霞 杨倩婷 朱秀云 陆坚 邓群益 陈心春 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期55-59,共5页
目的获得纯化的MTB早期分泌抗原ESAT-6，并对其抗原性及在MTB特异性细胞免疫检测中的应用价值进行评价。方法采用基因工程技术表达MTBESAT-6蛋白，通过Western blot法分析ESAT-6与特异性抗体的反应性。以纯化ESAT-6为抗原，用酶联免疫... 目的获得纯化的MTB早期分泌抗原ESAT-6，并对其抗原性及在MTB特异性细胞免疫检测中的应用价值进行评价。方法采用基因工程技术表达MTBESAT-6蛋白，通过Western blot法分析ESAT-6与特异性抗体的反应性。以纯化ESAT-6为抗原，用酶联免疫斑点技术（Elispot）检测肺结核患者、健康医务工作者、自然村居民外周血γ-干扰素的应答水平，同时与用于隐性结核感染及结核病诊断的QFT-G检测法进行平行比较，对其在MTB感染细胞免疫检测中的应用价值进行评价。结果成功表达和纯化了ESAT-6重组蛋白，所表达的蛋白能被特异性抗ESAT-6抗体识别，同时与肺结核外周血单核细胞反应，刺激后者产生γ-干扰素。Elispot技术检测肺结核患者、健康医务工作者、自然村居民的阳性率分别为36／49（73．5％）、11／62（17．7％）、17／194（8．8％），同时用QFT-G法对肺结核患者和健康医务工作者进行检测阳性率分别为38／49（77．6％）、14／58（24．1％），两种检测方法比较敏感度（73．5％，77．6％；X^2=0．381，P〉0．05）和特异度（82．3％，75．9％；X^2=0．406，P〉0．05），差异无统计学意义。结论利用pET原核表达系统可成功地表达和纯化MTBESAT-6重组蛋白，以ESAT-6为抗原建立的Elispot外周血IFN-γ检测技术与QFT-G的特异性和敏感性相当，可用于结核病的辅助诊断。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗原 酶联免疫吸附测定
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抗病毒治疗失败的艾滋病患者HIV-1基因型耐药变异的研究 被引量：10
2
作者 王辉 张红梅 +4 位作者 蒋强 彭巧丽 谭艳 李太生 周伯平 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期584-587,共4页
目的了解高效抗逆转录病毒治疗（HAART）失败的艾滋病患者HIV-1基因型耐药变异的情况，为临床治疗提供实验室参考数据。方法收集2008年1月至2009年12月在深圳市第三人民医院接受HAART治疗失败的41例艾滋病患者的血浆，采用RT—PCR和套式... 目的了解高效抗逆转录病毒治疗（HAART）失败的艾滋病患者HIV-1基因型耐药变异的情况，为临床治疗提供实验室参考数据。方法收集2008年1月至2009年12月在深圳市第三人民医院接受HAART治疗失败的41例艾滋病患者的血浆，采用RT—PCR和套式PCR从血浆中提取病毒RNA，扩增目的基因片段，并对其进行序列测定和分析。结果共获得38例抗病毒治疗失败者的基因序列，其中有3条序列显示无变异位点，在其他出现耐药变异的序列中K103N、G190A、Y181C、K101P、M184V、D67N、KTOR、T215Y及K219R为最常见的变异位点；100％（35／35）治疗失败患者出现了对非核苷类逆转录酶抑制剂NVP或EFV的高中度耐药，超过50％的患者出现了对临床上目前常用的核苷类逆转录酶抑制剂AZT、3TC、IMT及DDI的高中度耐药，仅发现极少数治疗失败患者对蛋白酶抑制剂的高中度耐药；D4T＋DDI＋NVP治疗方案是最常见出现耐药的治疗组合；病毒耐药变异往往发生在抗病毒治疗后的2～3年。结论HIV耐药变异株的出现是艾滋病患者临床上抗病毒治疗失败的主要原因，目前引起耐药突变主要是针对NNRTIs或NRTIs药物耐药，而对PIs的耐药在临床上尚比较少见，建议更换治疗组合时多考虑选用含有增强作用的PIs，从而达到更好地病毒抑制效果。 展开更多
关键词 HIV-1 获得性免疫缺陷综合征 抗药性 病毒
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甲型H1N1流感并发肺炎患者细胞免疫学特征的研究 被引量：7
3
作者 方木通 杨桂林 +6 位作者 崇雨田 刘映霞 张明霞 刘威龙 朱秀云 张洁云 周伯平 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期412-414,共3页
目的 观察甲型H1N1流感并发肺炎患者体内CD4＋T淋巴细胞亚群及相应细胞因子变化情况及其与并发肺炎之间的关系.方法 共有68例健康人、53例单纯甲型H1N1流感患者、16例并发肺炎甲型H1N1流感患者入选,荧光定量PCR方法 检测鼻咽拭子甲型H1N... 目的 观察甲型H1N1流感并发肺炎患者体内CD4＋T淋巴细胞亚群及相应细胞因子变化情况及其与并发肺炎之间的关系.方法 共有68例健康人、53例单纯甲型H1N1流感患者、16例并发肺炎甲型H1N1流感患者入选,荧光定量PCR方法 检测鼻咽拭子甲型H1N1流感病毒核酸;流式细胞术测定外周血CD4＋T淋巴细胞亚群表型和频率;ELISA方法 测定血浆TGF-β、IL-6、IFN-γ水平.统计学方法 采用单因素方差分析.结果 并发肺炎甲流患者高峰病毒载量和排毒时间较单纯甲流患者显著升高;而Th17淋巴细胞较单纯甲流患者及健康人显著下降（P＜0.05）,但Th1、Th2、Treg淋巴细胞比例3组人群差异无统计学意义（P＞0.05）;并发肺炎甲流患者血浆TGF-β水平较其他两组人群显著下降（P＜0.05）,IL-6、1FN-γ水平三组人群差异无统计学意义（P＞0.05）;排毒时间与降低的Th17淋巴细胞比例呈负相关（r=-0.38,P＜0.05）.结论 甲型H1N1流感病毒可能有抑制Th17淋巴细胞的作用,而Th17淋巴细胞下降及其导致的机体细胞免疫功能受损可能降低机体清除病毒的能力从而导致肺炎的发生. 展开更多
关键词 TH17细胞 流感病毒A型 肺炎 病毒性 病毒载量
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两种结核血清诊断试剂盒敏感性和特异性的比较研究 被引量：2
4
作者 罗凯 朱秀云 +6 位作者 陈心春 蔡雄茂 邓群益 李国保 余卫业 黎魏明 江涛 《临床肺科杂志》 2008年第10期1256-1257,共2页
目的评价美国Active TbDetect ELISA System诊断试剂盒诊断活动性肺结核的敏感性,特异性和重复性。方法采用Active酶联免疫诊断试剂盒对51例结核病人和70例健康对照的血清标本进行检测,同时与国产试剂进行平行比较分析。结果采用Active... 目的评价美国Active TbDetect ELISA System诊断试剂盒诊断活动性肺结核的敏感性,特异性和重复性。方法采用Active酶联免疫诊断试剂盒对51例结核病人和70例健康对照的血清标本进行检测,同时与国产试剂进行平行比较分析。结果采用Active试剂,检测结核病人的敏感性为76.5%,特异性为64.3%。与国产试剂进行平行比较,敏感性和特异性方面无显著性的差别。不同实验室对相同标本的检测结果显示,Active试剂盒具有很好的重复性。结论Active试剂盒对诊断活动性肺结核有一定作用,临床应结合其他检验结果进行综合分析。 展开更多
关键词 结核 诊断 敏感性 特异性
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