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肝特异性的miR-122对肝癌细胞增殖及凋亡的影响 被引量:6
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作者 庄鹏 李志莹 +1 位作者 王湘郴 郑昌京 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期686-688,共3页
目的:探讨肝特异性的miR-122表达在肝癌中的功能。方法:将miR-122类似物及反义序列分别转染HepG2细胞,Real time PCR检测成熟miR-122的表达量,MTT法检测miR-122对细胞增殖的影响,DAPI染色和流式细胞技术分析miR-122诱导的细胞凋亡情况... 目的:探讨肝特异性的miR-122表达在肝癌中的功能。方法:将miR-122类似物及反义序列分别转染HepG2细胞,Real time PCR检测成熟miR-122的表达量,MTT法检测miR-122对细胞增殖的影响,DAPI染色和流式细胞技术分析miR-122诱导的细胞凋亡情况。结果:与对照组相比,miR-122转染后表达显著上调(P<0.01),明显抑制肝癌细胞的增殖,并且诱导促进肝癌细胞凋亡(P<0.01)。结论:miR-122参与对肝癌细胞的生长增殖的调控,有希望成为一个肝癌诊断及治疗的新靶标。 展开更多
关键词 MIR-122 肝癌 增殖 凋亡
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miR-122慢病毒载体的构建及其在肝癌细胞中的作用 被引量:5
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作者 庄鹏 李志莹 +2 位作者 王湘郴 郑昌京 黄健 《临床肝胆病杂志》 CAS 2013年第7期529-531,共3页
目的构建慢病毒载体并探讨稳定表达的miR-122在肝癌细胞中的作用。方法将miR-122的前体克隆到慢病毒载体pLUNIG上获得稳定表达miR-122的病毒载体,在293T细胞内进行包装,浓缩获得病毒上清。用病毒上清去感染肝癌细胞HepG2,采用MTT法及克... 目的构建慢病毒载体并探讨稳定表达的miR-122在肝癌细胞中的作用。方法将miR-122的前体克隆到慢病毒载体pLUNIG上获得稳定表达miR-122的病毒载体,在293T细胞内进行包装,浓缩获得病毒上清。用病毒上清去感染肝癌细胞HepG2,采用MTT法及克隆增生检测对肝癌细胞增殖的影响,并设空载体组为对照进行分析。各组间均数采用t检验。结果慢病毒质粒Lv-miR122经包装浓缩后收获的病毒上清有效的感染肝癌细胞且miR-122表达显著上调,与慢病毒空载体对照组(Lv-Ctrl)相比,差异具有统计学意义(t=10.745,P<0.01);稳定表达的miR-122能明显抑制肝癌细胞的增殖,与Lv-Ctrl和HepG2对照组相比差异有统计学意义(P均<0.05);而且miR-122能明显抑制肝癌细胞的克隆增生(t=-5.256,P<0.01)。结论成功的构建了稳定表达miR-122的慢病毒质粒,并使携带的miR-122能稳定表达且具有抑制肝癌细胞增殖的活性。 展开更多
关键词 微RNAS 慢病毒载体 肝肿瘤
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miR-122在乙肝相关性肝癌发病机制中的作用 被引量:5
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作者 庄鹏 曾慧琼 +1 位作者 王湘郴 郑昌京 《热带医学杂志》 CAS 2015年第6期724-727,F0003,共5页
目的探讨mi R-122在乙肝病毒复制和乙肝相关性肝癌发病机制中的作用。方法构建mi R-122表达载体并转染Hep G2.2.15细胞,预测mi R-122作用靶点,Western blot检测转染细胞Gyclin G1蛋白表达,QPCR检测转染细胞和肝癌组织中mi R-122的表达,H... 目的探讨mi R-122在乙肝病毒复制和乙肝相关性肝癌发病机制中的作用。方法构建mi R-122表达载体并转染Hep G2.2.15细胞,预测mi R-122作用靶点,Western blot检测转染细胞Gyclin G1蛋白表达,QPCR检测转染细胞和肝癌组织中mi R-122的表达,HBV-DNA定量检测转染组细胞HBV表达,MTT法检测mi R-122对细胞增殖的影响,Annexinⅴ/PI荧光双染技术分析mi R-122诱导的细胞凋亡情况。肝癌组织和配对癌旁组织样本各来自3例乙肝相关性肝癌病人。结果与配对的癌旁组织比较,肝癌组织中mi R-122表达低下。mi R-122转染Hep G2.2.15后表达显著上调而Cyclin G1表达下调,mi R-122转染细胞后明显抑制HBV的复制,并诱导细胞凋亡和抑制增殖(P<0.01)。结论 mi R-122可下调靶基因Cyclin G1的表达,上调mi R-122可以抑制HBV基因的复制并促进HBV相关性肝癌的发生发展。 展开更多
关键词 MIR-122 乙肝病毒 肝癌 HEPG2.2.15 CYCLIN G1
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慢性乙肝患者外周血CD4^+CD25^+FOXP3^+Tregs及HBV抗原特异性CTLs的检测和分析 被引量:8
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作者 庄鹏 王湘郴 +2 位作者 罗国辉 何英 吴正林 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1786-1789,共4页
目的:检测慢性乙肝(CHB)患者外周血中CD4+CD25+FOXP3+调节性T淋巴细胞(Treg细胞)和乙肝病毒(HBV)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)的表达及意义。方法:收集28例CHB患者和15例健康人外周血单个核细胞标本,运用流式细胞仪对Treg细胞亚群进... 目的:检测慢性乙肝(CHB)患者外周血中CD4+CD25+FOXP3+调节性T淋巴细胞(Treg细胞)和乙肝病毒(HBV)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)的表达及意义。方法:收集28例CHB患者和15例健康人外周血单个核细胞标本,运用流式细胞仪对Treg细胞亚群进行定量分析,同时采用酶联免疫斑点法检测HBV抗原特异性CTLs,并结合丙氨酸氨基转移酶(ALT)和HBV DNA的临床情况进行分析。结果:CHB组CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的频率显著高于健康对照组(3.14%±0.97%vs 1.95%±0.68%,P<0.05);HBV抗原特异性CTL斑点计数为阳性(19.28±3.85)。CHB组Treg的频率与乙肝病毒载量呈正相关(r=0.831,P<0.01),与HBV特异性CTL斑点计数值呈负相关(r=-0.540,P<0.01)。结论:CHB患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞表达升高并与病毒载量相关,而与HBV反应的CTLs数量呈负相关,提示Treg细胞可通过抑制细胞免疫反应影响病毒清除。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 慢性 调节性T细胞 细胞毒性T细胞
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改良原代大鼠肝细胞的体外分离培养和功能研究 被引量:4
5
作者 庄鹏 李志莹 +2 位作者 范紫香 江元森 姚集鲁 《热带医学杂志》 CAS 2008年第10期1024-1027,共4页
目的建立经济有效且功能良好的原代肝细胞体外分离培养系统。方法采用0.02%胶原酶和Percoll分离液分离纯化大鼠肝细胞,光镜和电镜下观察HepatoZYME-SFM培养的肝细胞形态,自动生化仪定期检测培养肝细胞功能,RT-PCR半定量方法检测白蛋白mR... 目的建立经济有效且功能良好的原代肝细胞体外分离培养系统。方法采用0.02%胶原酶和Percoll分离液分离纯化大鼠肝细胞,光镜和电镜下观察HepatoZYME-SFM培养的肝细胞形态,自动生化仪定期检测培养肝细胞功能,RT-PCR半定量方法检测白蛋白mRNA,高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析安定代谢能力。结果分离纯化的大鼠肝细胞总数(2~3)×108cells/整肝,活力和纯度大于95%,生长良好形态正常。培养3d后ALT、AST显著下降,加入NH4Cl后8d内BUN保持相对稳定高水平,白蛋白合成在第3~4天达到高峰,培养的2~5d内肝细胞可有效清除安定。结论通过使用低浓度胶原酶灌流、Percoll分离液纯化以及HepatoZYME-SFM无血清培养基培养,肝细胞可有效保持良好形态结构和一定的生物合成代谢能力。 展开更多
关键词 肝细胞 细胞培养 分离 细胞功能
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SV40LTag基因诱导永生化大鼠肝星状细胞系的建立及鉴定 被引量:1
6
作者 庄鹏 马会慧 +3 位作者 江元森 陈伟 杨林 姚集鲁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期2074-2077,共4页
目的:建立长期传代、形态和生物学特性稳定的永生化HSC。方法:采用Pronase E、Ⅳ型胶原酶原位灌流消化及Nycodenz密度梯度离心分离大鼠原代肝星状细胞(HSC),并进行免疫组化SABC法鉴定和培养。用Effectene Transfection Reagent方法将携... 目的:建立长期传代、形态和生物学特性稳定的永生化HSC。方法:采用Pronase E、Ⅳ型胶原酶原位灌流消化及Nycodenz密度梯度离心分离大鼠原代肝星状细胞(HSC),并进行免疫组化SABC法鉴定和培养。用Effectene Transfection Reagent方法将携带SV40LTag基因的质粒PSV3neo(该质粒由意大利学者Giovanni Gaud-ino PhD惠赠)转染第1代HSC,以G418筛选直至获得阳性克隆细胞,经体外长期培养和传代后,以PCR方法检测其SV40LT抗原mRNA的表达,观察细胞形态学,绘制细胞生长曲线,MTT法检测细胞增殖能力,用免疫组化SABC法对α-SMA、SV40LTag、Ⅰ、Ⅲ型胶原(collagenⅠ、collagenⅢ)、desmin、转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍生的生长因子受体β型(PDGFRβ)进行免疫细胞化学检测,用β-actin做半定量RT-PCR检测I型胶原的表达,对其生物学特性进行研究。结果:本研究通过使用质粒PSV3neo转染正常大鼠HSC,经20 d抗性筛选,获得G418阳性克隆细胞,长期传代后细胞形态和结构保持完好,SV40LTag mRNA的表达检测和免疫组化染色结果阳性,经扩大筛选培养,该HSC细胞系目前已传了50代,保持着星形外观的HSC形态学特征,生长曲线显示转染阳性细胞倍增速度快,MTT法测定570 nm波长下A值显著高于对照组(P<0.01)。半定量RT-PCR法检测collagenⅠmRNA的表达明显高于对照组(P<0.01)。免疫组化染色显示能表达α-SMA、collagenⅠ、collagenⅢ、desmin、TGF-β1、PDGFRβ。结论:利用SV40LTag基因序列诱导建立了永生化大鼠HSC系,新建HSC系在体外可长期传代,倍增速度快,其形态和生物学特性与原代HSC形态相似。 展开更多
关键词 肝星状细胞 细胞培养 永生化
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隐匿性乙型肝炎病毒感染的检测探讨
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作者 吴正林 林汉利 +4 位作者 庄鹏 钟小强 刘键 林广城 陆学东 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期861-862,共2页
目前临床隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)感染的筛查主要依靠分子生物学手段,尚无简便、经济、适合大批量常规筛查的方法,如ELISA。本实验旨在了解HBV表面抗原(HBsAg)阴性个体的HBVDNA检出情况,探讨HBV表面大蛋白(HBLP)用于常规筛查... 目前临床隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)感染的筛查主要依靠分子生物学手段,尚无简便、经济、适合大批量常规筛查的方法,如ELISA。本实验旨在了解HBV表面抗原(HBsAg)阴性个体的HBVDNA检出情况,探讨HBV表面大蛋白(HBLP)用于常规筛查隐匿性HBV感染的可行性,积极寻找临床筛查隐匿性HBV感染的检测策略。 展开更多
关键词 隐匿性HBV感染 乙型肝炎病毒感染 乙型肝炎病毒(HBV) 检测 HBV表面抗原 常规筛查 HBVDNA 临床筛查
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重症监护室呼吸机相关性肺炎的危险因素和病原菌分析 被引量:27
8
作者 李志莹 庄鹏 +1 位作者 宋冰 陈济明 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期255-256,共2页
目的探讨重症监护室(ICU)患者呼吸机相关性肺炎(VAP)的危险因素、病原菌的构成、耐药性及控制措施。方法对ICU收住的110例机械通气患者中VAP的发生情况、相关因素及病原菌培养结果进行回顾性调查分析。结果VAP的发病率为47.27%,其中年... 目的探讨重症监护室(ICU)患者呼吸机相关性肺炎(VAP)的危险因素、病原菌的构成、耐药性及控制措施。方法对ICU收住的110例机械通气患者中VAP的发生情况、相关因素及病原菌培养结果进行回顾性调查分析。结果VAP的发病率为47.27%,其中年龄、制酸药、机械通气时间、意识障碍、抗生素的联合应用、基础疾病是医院获得性肺炎的重要危险因素,52例VAP以G-菌感染为主(64.13%),其次为G+菌(22.83%)和真菌(13.04%),病原菌存在多重耐药性。结论危险因素的存在与VAP的发生密切相关,VAP患者感染的主要致病菌为G-菌,且存在明显的耐药情况。 展开更多
关键词 重症监护室 呼吸机相关性肺炎 病原菌 耐药性 危险因素
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慢性HBV患者血清乙肝病毒表面大蛋白检测与临床意义 被引量:6
9
作者 庄鹏 吴正林 +2 位作者 刘键 陆学东 江元森 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期211-212,共2页
目的探讨HBV感染者血清中乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)水平对HBV复制状态的判定和对临床抗病毒治疗的指导意义。方法对90例接受抗病毒治疗的慢性HBV患者,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量PCR法定期进行血清HBV-LP和HBV DNA定量检测... 目的探讨HBV感染者血清中乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)水平对HBV复制状态的判定和对临床抗病毒治疗的指导意义。方法对90例接受抗病毒治疗的慢性HBV患者,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量PCR法定期进行血清HBV-LP和HBV DNA定量检测,对检测数据进行相关性分析。结果抗病毒治疗前90例次感染血清中HBV-LP与HBV DNA检出阳性率差异无显著性(P>0.05)。检测210例次感染血清中,HBV-LP含量与HBV DNA具有良好的相关关系(r=0.857,P=0.000),HBV-LPOD值和HBV DNA拷贝数随抗病毒治疗时间的延长同步下降。结论血清中HBV-LP能反映体内HBV复制水平,抗病毒治疗过程中HBV-LP和HBV DNA同步下降,可用于判断HBV复制程度和用于指导抗病毒治疗。 展开更多
关键词 乙型肝炎 乙肝表面抗原大蛋白 HBV DNA
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深度学习在超分辨显微成像中的研究进展(特邀)
10
作者 鲁心怡 黄昱 +6 位作者 张梓童 吴天筱 吴洪军 刘永焘 方中 左超 陈钱 《激光与光电子学进展》 CSCD 北大核心 2024年第16期21-38,共18页
超分辨显微成像技术打破了传统显微镜存在的衍射极限限制,提供了前所未有的细节观察能力,使人们得以观察到衍射极限以下的微观世界,有力地推动了生物医学、细胞学、神经科学等领域的发展。然而,现有的超分辨显微成像技术存在成像速度慢... 超分辨显微成像技术打破了传统显微镜存在的衍射极限限制,提供了前所未有的细节观察能力,使人们得以观察到衍射极限以下的微观世界,有力地推动了生物医学、细胞学、神经科学等领域的发展。然而,现有的超分辨显微成像技术存在成像速度慢、重建图像含有伪影、对生物样品光损伤大、轴向分辨率低等缺陷。近年来,得益于人工智能技术的快速发展,深度学习被用于研究克服超分辨显微技术的各种缺陷,突破了超分辨显微成像技术的发展瓶颈。聚焦于主流超分辨显微成像技术存在的缺陷,总结了深度学习对超分辨显微技术的优化效果,并根据超分辨显微成像技术原理的特异性,介绍了不同网络在超分辨显微技术上的应用成效,最后对深度学习在超分辨显微成像领域应用中存在的问题进行了分析,并对其发展进行了展望。 展开更多
关键词 深度学习 图像重建 显微成像 超分辨
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拉米夫定和阿德福韦酯抗病毒疗效与HBV基因型的关系 被引量:3
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作者 刘键 陆学东 +4 位作者 黄烈 庄鹏 王琼 吴润香 杨来智 《检验医学与临床》 CAS 2015年第20期3055-3057,共3页
目的探讨慢性乙型肝炎患者应用拉米夫定、阿德福韦酯的疗效与HBV基因型的关系。方法选取125例慢性乙型肝炎患者,分别给予拉米夫定(拉米夫定组,n=60)和阿德福韦酯(阿德福韦酯组,n=65)抗病毒治疗。观察2组治疗3、6、12个月后的病毒学应答... 目的探讨慢性乙型肝炎患者应用拉米夫定、阿德福韦酯的疗效与HBV基因型的关系。方法选取125例慢性乙型肝炎患者,分别给予拉米夫定(拉米夫定组,n=60)和阿德福韦酯(阿德福韦酯组,n=65)抗病毒治疗。观察2组治疗3、6、12个月后的病毒学应答率、血清学应答率及生化学应答率,并于治疗12个月后检测耐药率及耐药基因突变位点。结果拉米夫定组在治疗6、12个月后,B基因型HBV感染患者病毒学应答率、血清学应答率明显高于C基因型HBV感染患者(P<0.05),但生化学应答率差异无统计学意义(P>0.05)。阿德福韦酯组在治疗期间B基因型HBV感染患者与C基因型HBV感染患者的病毒学应答率、血清学应答率、生化学应答率差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗12个月后,拉米夫定组耐药率明显高于阿德福韦酯组(P<0.05),拉米夫定组和阿德福韦酯组耐药基因突变位点分别以rt108M、rt236T为主。结论拉米夫定对B基因型HBV的抑制作用优于C基因型HBV;阿德福韦酯的抗病毒疗效与HBV基因型无关;在慢性乙肝型炎治疗过程中要重视HBV耐药性发生,加强疗效评估。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 基因型 拉米夫定 阿德福韦酯
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行为教育对提高医护人员规范洗手行为的探讨 被引量:3
12
作者 刘清香 姚秋萍 刘晓红 《广州医药》 2006年第3期65-67,共3页
目的探讨对临床医护人员洗手行为的有效干预措施,提高规范洗手的依从性。方法以我院150名医护人员作为研究对象,采取全员培训、发放宣传资料、对重点人群加强洗手监督和引入有效管理机制的方法对临床医护人员的洗手行为进行为期3周的教... 目的探讨对临床医护人员洗手行为的有效干预措施,提高规范洗手的依从性。方法以我院150名医护人员作为研究对象,采取全员培训、发放宣传资料、对重点人群加强洗手监督和引入有效管理机制的方法对临床医护人员的洗手行为进行为期3周的教育干预,教育前后考核评估洗手情况并进行统计学分析。结果通过采取有针对性的教育干预措施,医务人员洗手方法和洗手时间的合格率显著提高(P<0.01),手的漏洗率明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论行为教育干预可有效提高医护人员洗手行为的依从性。 展开更多
关键词 医护人员 洗手 行为教育
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替比夫定治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的近期疗效观察
13
作者 庄鹏 曾惠琼 +3 位作者 王湘郴 范紫香 姚秋萍 吴正林 《中国热带医学》 CAS 2010年第11期1345-1345,1349,共2页
目的研究替比夫定治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的近期疗效。方法 78例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者随机分为两组,治疗组45例采用替比夫定治疗,对照组33例采用拉米夫定治疗,疗程48周,定期观察两组疗效。结果治疗48周后,两组患者在ALT复常率和... 目的研究替比夫定治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的近期疗效。方法 78例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者随机分为两组,治疗组45例采用替比夫定治疗,对照组33例采用拉米夫定治疗,疗程48周,定期观察两组疗效。结果治疗48周后,两组患者在ALT复常率和HBeAg转换率比较,无统计学差异(P>0.05)。治疗过程中定期比较两组患者HBVDNA阴转率和HBeAg阴转率,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗48周时替比夫定组血清HBVDNA自基线下降值为6.07log10,与对照组相比有统计学差异(P<0.01)。结论替比夫定治疗可以快速、有效降低HBVDNA,促进HBeAg阴转,其安全性和耐受性良好。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 替比夫定 治疗 疗效
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