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微环境对牙周膜干细胞分化的抑制和诱导作用 被引量:9
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作者 潘有条 王一飞 +6 位作者 赵洵 曾宪卓 张贞 程钧君 李夏宁 刘威 赵红宇 《国际口腔医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第2期207-211,共5页
牙周膜干细胞(PDLSC)在牙周组织缺损修复和维持牙周动态平衡中起关键性的作用,是牙周组织再生修复治疗的基础细胞。在不同微环境作用下,PDLSC的增殖分化特性呈现出较大的差别。牙周膜干细胞龛和炎症等微环境对PDLSC的分化有抑制作用,然... 牙周膜干细胞(PDLSC)在牙周组织缺损修复和维持牙周动态平衡中起关键性的作用,是牙周组织再生修复治疗的基础细胞。在不同微环境作用下,PDLSC的增殖分化特性呈现出较大的差别。牙周膜干细胞龛和炎症等微环境对PDLSC的分化有抑制作用,然而,牙本质微环境及发育期根尖微环境能促进PDLSC的分化。研究不同的微环境对PDLSC功能的影响,一方面有助于深入研究PDLSC的生物学功能,另一方面为PDLSC应用于牙周疾病的再生治疗提供理论依据。本文就不同的微环境对PDLSC分化的抑制和诱导作用研究进展作一综述,并展望PDLSC在牙周缺损再生治疗中的应用前景。 展开更多
关键词 牙周 牙周膜干细胞 微环境 细胞分化
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无血清培养基分离肿瘤干细胞的研究进展 被引量:3
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作者 董慧君 鲁菲 +2 位作者 张哲 曾宪卓 郭明辉 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第7期774-777,共4页
肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)被认为是肿瘤形成、生长、转移以及复发的根本原因。CSCs的分离、鉴定为CSCs的研究及靶向CSCs疗法的开发奠定了基础。目前,无血清培养法已经是分离培养CSCs的常用方法。本文对无血清培养基(serum fre... 肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)被认为是肿瘤形成、生长、转移以及复发的根本原因。CSCs的分离、鉴定为CSCs的研究及靶向CSCs疗法的开发奠定了基础。目前,无血清培养法已经是分离培养CSCs的常用方法。本文对无血清培养基(serum free medium,SFM)分离CSCs的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 无血清培养基
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新型CAR-T细胞靶向杀伤HPV16阳性宫颈癌细胞的探索研究 被引量:2
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作者 张英 滕娇 +2 位作者 汪月 邓丽娜 杨奕娜 《转化医学电子杂志》 2018年第12期17-21,共5页
目的:制备特异性杀伤HPV16阳性宫颈癌细胞的CAR-T细胞,初步探索CAR-T细胞治疗宫颈癌的可行性。方法:以HPV16 E711-19:HLA-A*0201复合物为靶点,合成第三代CAR基因序列,并克隆到慢病毒表达质粒,通过293T细胞包装慢病毒,将其转导人外周血T... 目的:制备特异性杀伤HPV16阳性宫颈癌细胞的CAR-T细胞,初步探索CAR-T细胞治疗宫颈癌的可行性。方法:以HPV16 E711-19:HLA-A*0201复合物为靶点,合成第三代CAR基因序列,并克隆到慢病毒表达质粒,通过293T细胞包装慢病毒,将其转导人外周血T细胞,制备CAR-T细胞,采用流式细胞术检测CAR-T细胞的转导效率。将CAR-T细胞分别与宫颈癌细胞株HPV16+Ca Ski和HPV18+He La共培养,使用CCK-8试剂盒检测CAR-T细胞的杀伤效果,以及利用ELISA测定CAR-T细胞分泌IFN-γ和IL-2的水平。结果:流式细胞术检测显示T细胞的慢病毒转导效率为41.2%,其中CD4+T细胞为85.2%,CD8+T细胞为30.9%。体外共培养实验CAR-T细胞与Ca Ski和He La细胞为10:1时,对应的细胞活力分别为56.8%和98.3%。CART细胞对Ca Ski细胞具有较强的细胞毒性,而对He La细胞的杀伤作用较小。Ca Ski细胞培养基中IFN-γ浓度达到100 pg/mL,IL-2浓度达到24 pg/mL,而He La细胞培养基中IFN-γ为16 pg/mL,IL-2为6 pg/mL。结论:我们成功制备靶向杀伤HPV16阳性宫颈癌细胞的CAR-T细胞,为CAR-T细胞治疗宫颈癌提供了初步的研究支持。 展开更多
关键词 宫颈癌 HPV16 CAR-T细胞 细胞毒性
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无血清培养CHO细胞的研究进展 被引量:2
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作者 董慧君 曾宪卓 +2 位作者 鲁菲 郭明辉 张哲 《科技视界》 2015年第32期71-72,共2页
CHO细胞是生产单克隆抗体、疫苗和重组蛋白等生物制品最重要的表达系统,无血清培养基相比天然培养基、合成培养基具有无可比拟的优势,因此开发和应用适于CHO细胞培养的无血清培养基,具有重要的科研和临床意义。本文综述了无血清培养CHO... CHO细胞是生产单克隆抗体、疫苗和重组蛋白等生物制品最重要的表达系统,无血清培养基相比天然培养基、合成培养基具有无可比拟的优势,因此开发和应用适于CHO细胞培养的无血清培养基,具有重要的科研和临床意义。本文综述了无血清培养CHO细胞的研究进展。 展开更多
关键词 无血清培养基 CHO细胞 研究进展
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无血清培养人胚胎干细胞的体系研究与进展 被引量:1
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作者 张哲 曾宪卓 +2 位作者 鲁菲 郭明辉 董慧君 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第41期6711-6717,共7页
背景:人胚胎干细胞有永久自我更新和向外、中和内胚层分化的能力,具有重要的基础研究价值和临床应用前景,可应用于再生医学、药物毒性筛选、早期胚胎发育、细胞移植治疗和基因治疗等领域,但是在限定条件下的大规模细胞培养、控制和定向... 背景:人胚胎干细胞有永久自我更新和向外、中和内胚层分化的能力,具有重要的基础研究价值和临床应用前景,可应用于再生医学、药物毒性筛选、早期胚胎发育、细胞移植治疗和基因治疗等领域,但是在限定条件下的大规模细胞培养、控制和定向分化技术的发展仍然具有实质性的挑战。在治疗应用方面,许多研究者试图建立可在无异源限定性和规模化培养体系中维持细胞多能性的培养方法。目的:综述近几年报道的人胚胎干细胞的无血清培养体系研究进展,重点是在发展适于治疗用途的无血清和无异源培养体系进程中,面临的挑战和进步。方法:应用计算机检索CNKI和Pub Med学术数据库中2008至2015年关于人胚胎干细胞无血清培养的文章,排除观点重复和陈旧的文章,最后对58篇文章进行归纳汇总。结果与结论:研究者已经在使用人源性饲养层细胞、无饲养层基质及限定性成分培养基上做了许多尝试,旨在选择合适的基质和培养基,使异源性成分达到最小化或者不使用,以求获得临床级别的细胞株。但是目前的细胞制品距离临床应用还有很大的距离,仍有很多问题需要解决,比如细胞制品的规范化、标准化、个性化定制等。相信随着干细胞研究和行业的规范,胚胎干细胞产品将会在临床得到广泛应用。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 培养基 无血清 培养基 条件性 组织工程 干细胞 培养 无血清培养 人胚胎干细胞 多能性 饲养层 基质 限定性培养基 科技型中小企业技术创新基金 深圳市战略新兴产业发展专项资金
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人间充质干细胞的无异源培养体系研究进展 被引量:1
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作者 张哲 曾宪卓 +3 位作者 鲁菲 陈帅 郭明辉 董慧君 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第34期6793-6796,6672,共5页
人间充质干细胞具有自我更新和多向分化的潜能,越来越多的应用于细胞再生医学领域。临床应用细胞制剂的制备,需要在GMP指导下对人间充质干细胞进行体外扩增。传统的方法人间充质干细胞扩增方法含FBS,但由于存在批次间质量差异、异源污... 人间充质干细胞具有自我更新和多向分化的潜能,越来越多的应用于细胞再生医学领域。临床应用细胞制剂的制备,需要在GMP指导下对人间充质干细胞进行体外扩增。传统的方法人间充质干细胞扩增方法含FBS,但由于存在批次间质量差异、异源污染和免疫排斥风险,无异源培养方法显得尤为必要。多种替代FBS的人源性血液成分已经在研究之中,如血清、血浆和血小板衍生物等。化学成分限定性培养基是标准化的最终目标,目前已有商业化的培养基上市。无异源培养基是临床细胞分离和扩增的前提,可保证临床细胞治疗应用的安全性和有效性,是该领域走向产业化的必然趋势。本文对人间充质干细胞的无异源培养体系研究进展做一综述。 展开更多
关键词 无异源 间充质干细胞 体外扩增
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低氧对造血干细胞的影响
7
作者 张哲 曾宪卓 +2 位作者 鲁菲 郭明辉 董慧君 《生物技术世界》 2015年第12期93-94,共3页
造血干细胞是一类具有自我更新能力和能够产生高度分化的功能细胞。有关造血干细胞的研究受到学者的广泛关注。其中,造血干细胞的增殖与分化一直是研究的重点,低氧对造血干细胞的增殖、分化具有重要的调节作用。本文综述了近年来国内外... 造血干细胞是一类具有自我更新能力和能够产生高度分化的功能细胞。有关造血干细胞的研究受到学者的广泛关注。其中,造血干细胞的增殖与分化一直是研究的重点,低氧对造血干细胞的增殖、分化具有重要的调节作用。本文综述了近年来国内外报道的低氧对造血干细胞的增殖、周期调控及相关机制。 展开更多
关键词 低氧 造血干细胞 增殖 周期
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3D支架材料在造血干细胞培养中的应用
8
作者 董慧君 曾宪卓 +2 位作者 鲁菲 郭明辉 张哲 《生物技术世界》 2015年第12期167-168,共2页
造血干细胞具有长期自我更新和多向分化的潜能,被广泛应用于治疗血液疾病和自身免疫性疾病。造血干细胞的三维细胞培养技术在细胞扩增和干性维持上优势明显,具有重要的临床意义。3D支架材料的选择和应用是三维技术的关键之一。本文对3D... 造血干细胞具有长期自我更新和多向分化的潜能,被广泛应用于治疗血液疾病和自身免疫性疾病。造血干细胞的三维细胞培养技术在细胞扩增和干性维持上优势明显,具有重要的临床意义。3D支架材料的选择和应用是三维技术的关键之一。本文对3D培养的支架材料以及其在造血干细胞中的应用做一综述。 展开更多
关键词 造血干细胞 3D培养 支架材料
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旋转式生物反应器培养细胞因子诱导的杀伤细胞研究
9
作者 许小婷 汪月 +1 位作者 王琳 曾宪卓 《转化医学杂志》 2020年第4期233-237,共5页
目的采用旋转式生物反应器(rotating wall-vessel bioreactor,RWV)与传统的T-Flask培养瓶培养人外周血细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞,比较CIK细胞的增殖能力、细胞因子分泌情况、细胞杀伤力.方法提取健康志愿者... 目的采用旋转式生物反应器(rotating wall-vessel bioreactor,RWV)与传统的T-Flask培养瓶培养人外周血细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞,比较CIK细胞的增殖能力、细胞因子分泌情况、细胞杀伤力.方法提取健康志愿者的外周血,分离出外周单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),体外诱导成CIK细胞,分别接种到T-Flask培养瓶及RWV中培养.采用台酚蓝染色法检测细胞活率并绘制其生长曲线;ELISA法检测各组CIK细胞的IL-2,IFN-γ,TNF-α分泌情况;乳酸脱氢酶测定法检测CIK细胞对靶细胞的杀伤力.结果与传统的T-Flask培养瓶培养CIK细胞比较,RWV培养CIK细胞增殖数量明显多且生长力旺盛;使用RWV培养CIK细胞能使其分泌更多的IL-2,IFN-γ,TNF-α细胞因子;RWV组培养的CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤力更强.结论RWV培养CIK细胞更能提高其增殖能力、细胞因子分泌能力及肿瘤杀伤活力,同时可解决传统细胞培养数量少、稳定性差、易污染、工作量大及周期长等问题,有效地降低临床治疗成本. 展开更多
关键词 免疫细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 细胞活率 肿瘤杀伤力 旋转式生物反应器
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3D支架在造血干细胞体外扩增中的应用
10
作者 张哲 曾宪卓 +2 位作者 鲁菲 郭明辉 董慧君 《科技视界》 2015年第33期78-79,共2页
造血干细胞具有自我更新和多向分化的潜能,能够发育为血液系统和免疫系统。3D支架能模拟体内骨髓微环境,现就3D支架在造血干细胞体外培养体系中的研究进展予以综述。
关键词 造血干细胞 体外扩增 3D支架
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一种新型仿生材料用于硬脑膜缺损修复研究
11
作者 邓坤学 代兴亮 +3 位作者 林丽敏 李宗奕 袁玉宇 徐弢 《临床医学进展》 2022年第12期11631-11642,共12页
目的:评价一种新型仿生材料用于硬脑膜缺损修复的安全性及有效性。方法:采用增材制造技术制备的聚乳酸新型仿生材料,分别开展了体外和体内研究,研究材料的微观结构、细胞增殖活性、力学特性,以及原位植入硬脑膜缺损后,与周边组织相容性... 目的:评价一种新型仿生材料用于硬脑膜缺损修复的安全性及有效性。方法:采用增材制造技术制备的聚乳酸新型仿生材料,分别开展了体外和体内研究,研究材料的微观结构、细胞增殖活性、力学特性,以及原位植入硬脑膜缺损后,与周边组织相容性和缺损硬脑膜修复情况等。结果:新型仿生材料微观结构为三维网络结构,对细胞增值活性无影响,其拉伸强度和断裂伸长率均明显高于对照品EthisorbTM。动物实验研究显示材料组织相容性良好,可实现硬脑膜缺损修复。结论:新型仿生材料具有较好的力学性能,组织相容性良好,可诱导周边组织细胞爬行到支架,诱导新生毛细血管生成促进新生组织形成,可作为硬膜缺损修复的新材料,实现硬脑膜再生修复。 展开更多
关键词 新型仿生材料 力学性能 修复硬脑膜
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三种抗尿失禁合成吊带兔原位植入后的宿主反应研究 被引量:1
12
作者 邓谋 罗新 +6 位作者 丁静 徐弢 袁玉宇 王国帅 刘曼 赖奎霖 朱兰 《中国计划生育和妇产科》 2015年第8期26-30,I0003,共6页
目的采用兔作为动物模型,评估三种不同的抗尿失禁合成吊带原位植入后的宿主反应及安全性。方法 45只清洁级新西兰大白兔被随机分为3组,每组15只,A组采用三维静电仿生聚偏二氟乙烯(polyvinylidene fluoride,PVDF)吊带,B组采用聚丙烯(poly... 目的采用兔作为动物模型,评估三种不同的抗尿失禁合成吊带原位植入后的宿主反应及安全性。方法 45只清洁级新西兰大白兔被随机分为3组,每组15只,A组采用三维静电仿生聚偏二氟乙烯(polyvinylidene fluoride,PVDF)吊带,B组采用聚丙烯(polypropylene,PP)吊带,C组采用单丝编织聚偏二氟乙烯吊带,分别将三种吊带材料原位植入兔阴道与尿道间隙,于术后4、12和26 w进行观察。结果 3组动物术后均无排尿异常情况,大体观察各组材料均与植入前差异不大,各组材料均未出现侵蚀和暴露现象。A组中形成薄层纤维包裹,轻度炎性细胞浸润,大量血管再生,有少量细胞长入材料内部;B组和C组中材料周围形成较厚的纤维包裹,伴较少炎性细胞浸润,长期观察见增生的纤维组织局部长入周围组织。3组在4 w、12 w和26 w的组织病理学评分比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论三种吊带原位植入后均较安全。三维仿生PVDF吊带可能成为一种治疗女性压力性尿失禁的理想吊带。 展开更多
关键词 合成吊带 宿主反应 尿失禁
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国产聚丙烯尿失禁吊带植入兔腹壁及阴道的组织相容性研究 被引量:1
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作者 曹杨 林丽敏 +4 位作者 马骋 邓坤学 袁玉宇 徐弢 朱兰 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期44-48,共5页
目的评价国产尿失禁吊带的组织相容性。方法10只雌性新西兰白兔分为2组(分别用于吊带植入后4周、12周的观察),每组分别于腹壁皮下深筋膜与肌肉间层、阴道与膀胱间隙手术植入国产尿失禁吊带或已上市的同类产品经闭孔无张力尿道中段悬吊带... 目的评价国产尿失禁吊带的组织相容性。方法10只雌性新西兰白兔分为2组(分别用于吊带植入后4周、12周的观察),每组分别于腹壁皮下深筋膜与肌肉间层、阴道与膀胱间隙手术植入国产尿失禁吊带或已上市的同类产品经闭孔无张力尿道中段悬吊带(TVT-O吊带),每只实验动物的腹壁和阴道植入的吊带均为同一种。于植入后4周、12周处死实验动物,获取吊带标本,进行组织学观察。结果所有实验动物吊带植入术后切口愈合良好,无排尿异常情况,术后功能活动正常。两种吊带植入实验动物体内后均与周围组织间形成薄层疏松结缔组织。吊带植入腹壁皮下后,国产尿失禁吊带和TVT-O吊带植入4周时的组织病理学评分中位数分别为10.5和10.5分,植入12周时的组织病理学评分中位数分别为10.0和9.5分,分别比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。吊带植入阴道与膀胱间隙后,国产尿失禁吊带和TVT-O吊带植入4周时的组织病理学评分中位数分别为6.0和12.0分,植入12周时的组织病理学评分中位数分别为8.5和12.5分,国产尿失禁吊带的组织病理学评分均低于TVT-O吊带,但差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论国产尿失禁吊带更为轻薄,植入实验动物体内后显示了良好的组织相容性,尤其是在阴道原位植入后,国产尿失禁吊带局部反应小,有临床应用优势。 展开更多
关键词 尿失禁 压力性 聚丙烯类 组织相容性 尿道下悬吊术 尿道中段悬吊带
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