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三氯乙烯职业中毒皮肤损害与HLA-DR、DQ基因相关性研究 被引量:4
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作者 庾蕾 庄志雄 +3 位作者 黄海雄 俞慕华 叶小明 谢富焕 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2007年第2期133-135,共3页
[目的]从HLA-DR、DQ基因角度探讨三氯乙烯职业中毒皮肤损害易感的遗传背景。[方法]采用PCR- SSP(sequence specific primer)法对三氯乙烯职业中毒皮肤损害组(病例组)及对照组进行HLA-DR、DQ基因位点等位基因分型。[结果]HLA-DRB1位点在... [目的]从HLA-DR、DQ基因角度探讨三氯乙烯职业中毒皮肤损害易感的遗传背景。[方法]采用PCR- SSP(sequence specific primer)法对三氯乙烯职业中毒皮肤损害组(病例组)及对照组进行HLA-DR、DQ基因位点等位基因分型。[结果]HLA-DRB1位点在病例组检出11个等位基因,11个血清型;对照组检出13个等位基因,13个血清型。HLA-DQB1位点在病例组及对照组均检出5个等位基因,7个血清型。获得了各等位基因分布及基因频率资料,其中DRB1*09(DR9)和DQB1*03(DQ9)等位基因频率在病例组与对照组间差异均有显著性(P<0.05);OR值(95%可信区间)分别为DRB1*09(DR9)等位基因为0.174(0.037~0.830),DQB1*03(DQ9)等位基因为0.226(0.046~1.108)。[结论] DRB1*09(DR9)和DQB1*03(DQ9)等位基因可能是三氯乙烯职业中毒皮肤损害的保护基因。 展开更多
关键词 三氯乙烯 皮肤损害 人类白细胞抗原 基因多态性
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三氯乙烯药疹样皮炎患者肿瘤坏死因子α-857C/T基因多态性研究 被引量:2
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作者 庾蕾 庄志雄 +2 位作者 叶小明 黄海雄 杨淋清 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2006年第5期349-351,共3页
目的从肿瘤坏死因子α(TNFα)基因-857位点多态性角度探讨三氯乙烯药疹样皮炎易感的遗传背景。方法采用TaqManMGB探针,建立TNFα-857C/T位点实时定量聚合酶链反应分型方法。用该方法对三氯乙烯药疹样皮炎组(47例)及对照组(53例)进行-857... 目的从肿瘤坏死因子α(TNFα)基因-857位点多态性角度探讨三氯乙烯药疹样皮炎易感的遗传背景。方法采用TaqManMGB探针,建立TNFα-857C/T位点实时定量聚合酶链反应分型方法。用该方法对三氯乙烯药疹样皮炎组(47例)及对照组(53例)进行-857nt(C/T)位点分型,比较病例组与对照组之间各基因型及等位基因频率是否有差异。结果TNFα-857C/T多态的基因型及等位基因频率在三氯乙烯药疹样皮炎组及对照组差异无显著性(P>0.05)。结论TNFα-857C/T位点多态可能不是中国人群三氯乙烯药疹样皮炎的风险因子。 展开更多
关键词 三氯乙烯药疹样皮炎 肿瘤坏死因子Α 单核苷酸多态性
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血痕Chelex 100抽提DNA用于人类TNF-α基因启动子区SNP分型 被引量:3
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作者 庾蕾 庄志雄 +2 位作者 叶小明 甘永霞 杨学艳 《生物技术通报》 CAS CSCD 2005年第4期43-45,共3页
建立快速、简便的血样本采集及DNA抽提方法,可用于大规模的分子流行病学调查及群体遗传学研究。采用无菌纱布为载体取血,Chelex100快速抽提DNA,用TaqManMGB探针对人类TNF-α基因启动子区-857(C/T)位点进行SNP分型。344份血样均得到明确... 建立快速、简便的血样本采集及DNA抽提方法,可用于大规模的分子流行病学调查及群体遗传学研究。采用无菌纱布为载体取血,Chelex100快速抽提DNA,用TaqManMGB探针对人类TNF-α基因启动子区-857(C/T)位点进行SNP分型。344份血样均得到明确的分型结果,获得的荧光信号强,本底低。深圳地区汉族群体-857位点基因型频率分别为:cc为0.78,ct为0.21,tt为0.01。血痕Chelex100抽提DNA为大规模血样本的采集,DNA的抽提提供了有效的手段。 展开更多
关键词 血痕 Chelex 100 DNA 人类 TNF-Α 基因启动子区 SNP分型 单核苷酸多态性
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三氯乙烯诱发L-02肝细胞毒的双向电泳分析及质谱鉴定 被引量:13
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作者 黄海燕 刘建军 +4 位作者 庄志雄 李习艺 徐新云 卫秦芝 杨晓华 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期175-178,共4页
目的分析三氯乙烯对L02肝细胞蛋白质表达的影响。方法利用噻唑蓝比色法和锥虫蓝拒染法,确定三氯乙烯的剂量反应关系,建立L02肝细胞染毒模型,提取细胞总蛋白,双向电泳分离蛋白质组成分,找出三氯乙烯处理后表达有差别的蛋白斑点,用基质辅... 目的分析三氯乙烯对L02肝细胞蛋白质表达的影响。方法利用噻唑蓝比色法和锥虫蓝拒染法,确定三氯乙烯的剂量反应关系,建立L02肝细胞染毒模型,提取细胞总蛋白,双向电泳分离蛋白质组成分,找出三氯乙烯处理后表达有差别的蛋白斑点,用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱进行鉴定。结果当三氯乙烯浓度达到30μmol/L时,L02肝细胞增殖抑制率明显升高。选用40μmol/L三氯乙烯染毒的L02肝细胞及其对照细胞进行双向电泳,获得分辨率高、重复性好的电泳图谱。结果表明,三氯乙烯染毒的L02肝细胞蛋白点表达量升高2倍以上的有37个,蛋白点减少至1/2以下的有15个。利用质谱技术对差异蛋白点进行鉴定,肽质量指纹图谱初步鉴定了4个蛋白,肽质量指纹图谱和串联质谱进一步确定了11个蛋白。结论三氯乙烯能引起L02肝细胞蛋白表达改变。 展开更多
关键词 三氯乙烯 L-02 肝细胞毒 双向电泳分析 质谱鉴定 肽质量
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利用蛋白质组学技术研究三氯乙烯刺激肝细胞后蛋白质差异表达 被引量:10
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作者 刘建军 黄海燕 +4 位作者 庄志雄 李习艺 袁建辉 阳帆 卫秦芝 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期431-434,共4页
目的应用双向电泳及串联质谱技术,研究不同剂量三氯乙烯(TCE)诱导L-02肝细胞蛋白质表达谱的差异。方法L-02肝细胞分别用不同剂量TCE和溶剂对照(二甲亚砜)处理后,提取细胞总蛋白,双向凝胶电泳分离蛋白质组成分,银染显色,经ImageMaster2D ... 目的应用双向电泳及串联质谱技术,研究不同剂量三氯乙烯(TCE)诱导L-02肝细胞蛋白质表达谱的差异。方法L-02肝细胞分别用不同剂量TCE和溶剂对照(二甲亚砜)处理后,提取细胞总蛋白,双向凝胶电泳分离蛋白质组成分,银染显色,经ImageMaster2D Platinum5.0软件分组分析比较四组图谱,并对差异蛋白斑点进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOF-MS)分析鉴定。结果得出差异较明显的蛋白质斑点15个,不同剂量TCE刺激后表达分别上调、下调或消失,提示TCE可引起肝细胞蛋白表达发生改变。通过质谱鉴定和IPI human数据库检索,鉴定了其中9个TCE诱导L-02肝细胞相关的蛋白质。结论这些结果为深入研究TCE毒作用相关的蛋白质及TCE毒作用的分子标志物提供依据,并为阐明TCE毒作用的分子机制提供线索。 展开更多
关键词 三氯乙烯 肝细胞 蛋白质组 电泳 凝胶 电泳
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用Taqman MGB探针研究中国人群TNF-α基因启动子区单核苷酸多态性 被引量:2
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作者 庾蕾 庄志雄 +2 位作者 谢富焕 黄海雄 叶小明 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期51-54,62,共5页
目的了解中国人群肿瘤坏死因子α(thetumournecrosisfactorα,TNF-α)基因启动子区多态性。方法随机选取20名深圳地区汉族健康体检者,采用两对引物PCR扩增TNF-α基因启动子区(-1389nt~+125nt),对PCR产物进行序列分析,寻找单核苷酸多态... 目的了解中国人群肿瘤坏死因子α(thetumournecrosisfactorα,TNF-α)基因启动子区多态性。方法随机选取20名深圳地区汉族健康体检者,采用两对引物PCR扩增TNF-α基因启动子区(-1389nt~+125nt),对PCR产物进行序列分析,寻找单核苷酸多态性位点(singlenucleotidepolymorphisms,SNPs)。采用TaqmanMGB探针建立了-857nt(C/T)位点的实时定量PCR(thereal-timePCR)分型方法,并对中国汉族、壮族、布依族,水族及苗族群体共1108份样本进行了基因分型。结果在启动子区(-1322nt~+67nt),发现6个SNP位点,即-885(A/G)、-863(C/A)、-646(G/A)、-648(G/A)、-568(G/C)和-857(C/T),其中位点-646nt(G→A)为新发现SNP。-885、-648及-568nt位点碱基虽然与Genbank不同,但测序的20个个体基因分型相同。中国人群-857nt(C/T)位点基因型频率分别为0.79(CC),0.19(CT)和0.02(TT),中国汉族、壮族、布依族,水族及苗族群体间无显著性差异。中国人群-857T等位基因频率为0.116,与文献报道的韩国人群相同,但比日本人群低。结论中国人群TNF-α基因启动子区单核苷酸多态性可能较保守。采用TaqmanMGB探针实时定量PCR技术对SNPs进行基因分型简便、快速及准确,易于自动化,为大规模的疾病相关性研究提供了有效的工具。 展开更多
关键词 多态性 肿瘤坏死因子Α 单核苷酸多态性 实时定量PCR TAQMAN MGB探针
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氢醌对L-02肝细胞内POLH基因mRNA表达的影响
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作者 胡恭华 庄志雄 +3 位作者 杨建平 沙焱 涂晓志 胡大林 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2006年第6期409-411,共3页
目的 观察不同浓度氢醌(HQ)对L-02肝细胞内POLH基因mRNA表达的影响,旨在探讨HQ对人体细胞毒性作用的分子机制。方法 应用四甲基偶氮唑盐比色法检测不同浓度(0、5、10、20、40、80、160和320μmol/L)HQ作用24h后对L-02肝细胞存活... 目的 观察不同浓度氢醌(HQ)对L-02肝细胞内POLH基因mRNA表达的影响,旨在探讨HQ对人体细胞毒性作用的分子机制。方法 应用四甲基偶氮唑盐比色法检测不同浓度(0、5、10、20、40、80、160和320μmol/L)HQ作用24h后对L-02肝细胞存活率的影响;应用带有SYBR GreenⅠ的实时荧光定量聚合酶链反应技术研究不同浓度(0、5、10、20、40、80和160μmol/L)HQ对L-02肝细胞内POLH基因mRNA表达的影响。结果 在0—80μmol/L的范围内。HQ对L-02肝细胞的存活率没有明显的影响(P〉0.05),当染毒剂量超过160μmol/L时,其存活率则明显地下降(P〈0.01);在HQ染毒剂量低于80μmol/L的范围内,POLH基因mRNA表达有随着剂量的增加而增加的趋势,当HQ的剂量达到160μmol/L时,POLH基因mRNA的表达则有所降低,但仍高于对照组。结论 HQ可以诱导L-02肝细胞内POLH基因在mRNA水平上的表达改变。 展开更多
关键词 氢醌 POLH 实时荧光定量PCR 肝细胞
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