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胶体金免疫层析法检测水产品中孔雀石绿前处理方法的优化 被引量：6
1
作者 黄向荣 钟松清 +6 位作者 刘志培 李小玲 刘家飞 田奇 万译文 谢冬霞 谭攀 《北京农学院学报》 2015年第2期53-58,共6页
为了提高胶体金检测孔雀石绿方法的精密性、准确度、检测限等指标,并尽可能缩短样品处理时间,对样品用量、提取剂用量、离心时间、吹干温度、空气出量等检测条件进行优化,建立一种简便、快速检测水产品中孔雀石绿及其代谢物残留量的胶... 为了提高胶体金检测孔雀石绿方法的精密性、准确度、检测限等指标,并尽可能缩短样品处理时间,对样品用量、提取剂用量、离心时间、吹干温度、空气出量等检测条件进行优化,建立一种简便、快速检测水产品中孔雀石绿及其代谢物残留量的胶体金免疫层析方法。优化后,在满足检测限、假阳率和假阴率不变的条件下,样品处理过程更加简单,省去了传统方法需要过柱的步骤;单个样本处理,除去空气吹干的时间,只要最少7min即可完成样品的前处理,大大低于市场上样品前处理的时间;出带速度快,检测时间短,单个样本的检测时间在10~15min;对组织(鱼)中孔雀石绿的检出限可提高到2μg/kg;减少样品处理过程中耗材和试剂的用量,节约检测成本。该方法节省了大量的人力和物力,适用于日常的大批量样品检测,为胶体金免疫层析法检测孔雀石绿及其代谢物,提供了一种新的样品处理方法。 展开更多
关键词 孔雀石绿 胶体金免疫层析 样品前处理方法
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快速检测鱼样中隐性孔雀石绿的酶联免疫法研究 被引量：3
2
作者 黄向荣 钟松清 +6 位作者 万译文 李小玲 曾春芳 刘志培 刘家飞 谢冬霞 谭攀 《当代水产》 2014年第9期81-83,共3页
孔雀石绿（Malachite Green,MG）为具有金属光的绿色结晶体,属于三苯甲烷类工业染料,商品化的孔雀石绿主要为其草酸盐或盐酸盐。由于孔雀石绿对水产品具有显著的抗菌作用,而且施用简单,价格便宜,在水产品的养殖和运输过程中存在滥用的... 孔雀石绿（Malachite Green,MG）为具有金属光的绿色结晶体,属于三苯甲烷类工业染料,商品化的孔雀石绿主要为其草酸盐或盐酸盐。由于孔雀石绿对水产品具有显著的抗菌作用,而且施用简单,价格便宜,在水产品的养殖和运输过程中存在滥用的现象。 展开更多
关键词 隐性孔雀石绿 酶联免疫法 快速检测 鱼样 Green 工业染料 抗菌作用 运输过程
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禽流感抗体胶体金半定量检测方法的建立 被引量：1
3
作者 陶虹 秦智锋 +12 位作者 卢体康 储成群 曾少灵 林庆燕 花群义 吕建强 詹爱军 陈书琨 孙洁 曹琛福 阮周曦 陈兵 毕英佐 《养禽与禽病防治》 2009年第9期8-12,共5页
针对目前禽流感抗体主要采用的HI检测方法操作步骤繁琐,耗时较长且必须在实验室内进行判定的缺陷,为了提高检测效率和通关速度,借助胶体金半定量检测技术,以禽流感HI抗体滴度24为临界值,研制了禽流感抗体胶体金半定量检测卡。首先复苏了... 针对目前禽流感抗体主要采用的HI检测方法操作步骤繁琐,耗时较长且必须在实验室内进行判定的缺陷,为了提高检测效率和通关速度,借助胶体金半定量检测技术,以禽流感HI抗体滴度24为临界值,研制了禽流感抗体胶体金半定量检测卡。首先复苏了含A/Chicken/Hongkong/SZ-HI/1997(H5N1)病毒株HA基因重组质粒pETHA的阳性菌,IPTG诱导表达4h后,SDS-PAGE电泳对HA重组蛋白进行了确证。以纯化的HA重组蛋白和灭活的禽流感病毒为主要材料,采用夹心法原理研制了禽流感抗体胶体金半定量检测卡,确定了检测卡的最佳组合反应模式、最佳上样量、最佳反应时间、最适的胶体金颗粒、最佳硝酸纤维素膜和吸水垫。所建立的禽流感抗体胶体金半定量检测卡特异性强,与其他家禽抗原阳性标准血清交叉反应小。检测卡的检测结果与HI检测结果基本一致,检测HI抗体滴度为24鸡血清时结果符合率达94%。 展开更多
关键词 禽流感 抗体检测 胶体金半定量检测
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一种制备19-去甲睾酮完全抗原及单克隆抗体的方法的建立
4
作者 谢冬霞 钟松清 +4 位作者 刘家飞 孙新林 黄媚 涂敏敏 程芳芳 《中外食品工业（下）》 2015年第4期43-44,共2页
本文旨在建立一种制备19-去甲睾酮完全抗原及单克隆抗体的方法。通过丁二酸酐将19-去甲睾酮（19BNT）半抗原与牛血清白蛋白（BSA潲联得到偶联物（19BNT—HAS—BSA），以此进行免疫、筛选，最终获得3株阳性杂交瘤细胞（4D5，6F2，7E7）... 本文旨在建立一种制备19-去甲睾酮完全抗原及单克隆抗体的方法。通过丁二酸酐将19-去甲睾酮（19BNT）半抗原与牛血清白蛋白（BSA潲联得到偶联物（19BNT—HAS—BSA），以此进行免疫、筛选，最终获得3株阳性杂交瘤细胞（4D5，6F2，7E7），并制得相应的单克隆抗体。用间接竞争酶联免疫法，对7E7株抗体进行鉴定，发现：抗体的亲和常数为3．35×108L／mol，半抑制浓度为0．35ng／mL，表明此抗体对19-去甲睾酮有很强的亲和力；以19-去甲睾酮为参照物，抗体对丙酸诺龙的交叉反应率为80．3％，对甲基睾酮、睾酮、群勃龙、己烯雌酚等的交叉反应率均小于0．2％，表明此抗体具有良好的特异性。由此可知，7E7株抗体可用于对19-去甲睾酮、丙酸诺龙的免疫分析。 展开更多
关键词 19-去甲睾酮 单克隆抗体 间接竞争酶联免疫法 交叉反应率
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快速检测技术在食品安全监管中的应用 被引量：8
5
作者 谭攀 《中国食品》 2022年第19期94-96,共3页
随着国内社会经济的增长,食品行业步入了飞快发展阶段,而食品安全问题也越来越突出,以至于影响到人们的健康和生命。所以,确保食品安全、严格监管食品安全迫在眉睫。当前,快检技术呈现出很多突出的优势,比如低成本、用时短、高效、筛查... 随着国内社会经济的增长,食品行业步入了飞快发展阶段,而食品安全问题也越来越突出,以至于影响到人们的健康和生命。所以,确保食品安全、严格监管食品安全迫在眉睫。当前,快检技术呈现出很多突出的优势,比如低成本、用时短、高效、筛查广、极具针对性、准确率高等,不仅提升了食品安全检测的整体质量和效率,扩大了食品安全监管的总体范围,还能对各种食品展开针对性检测,使食品安全预警前移,进而充分规避食品安全事故。基于此,本文主要探讨了快速检测技术在食品安全监管中的价值、常见的快速检测技术类型,以及在食品安全监管中应用快速检测技术的建议。 展开更多
关键词 食品安全监管 食品安全事故 快速检测技术 严格监管 食品安全检测 食品安全预警 经济的增长 食品行业
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米酵菌酸单克隆抗体的制备与鉴定
6
作者 谭攀 吴鑫 +3 位作者 唐霏 黄建飞 张贵虹 陈晶 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第3期141-147,共7页
目的建立鲜湿米粉中米酵菌酸(bongkrekic acid,BA)的免疫学快速检测方法,制备特异性识别BA的单克隆抗体并进行评价。方法利用碳二亚胺[1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC]法将BA半抗原与牛血清白蛋白(bo... 目的建立鲜湿米粉中米酵菌酸(bongkrekic acid,BA)的免疫学快速检测方法,制备特异性识别BA的单克隆抗体并进行评价。方法利用碳二亚胺[1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC]法将BA半抗原与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和卵清蛋白(ovalbumin,OVA)载体偶联,分别合成BA免疫原(BA-BSA)和包被原(BA-OVA),用BA-BSA免疫Balb/C小鼠,取免疫效果好的小鼠脾脏与小鼠NS-1骨髓瘤细胞进行融合。采用间接竞争酶联免疫吸附法(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,icELISA)进行筛选,筛选出能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细胞,利用有限稀释法进行亚克隆得到单株能稳定分泌所需抗体的细胞;采用体内诱生法制备腹水型单克隆抗体。利用正辛酸-饱和硫酸铵法纯化腹水型抗体,通过酶联免疫吸附法测定纯化后的抗体效价。结果成功合成了BA免疫原BA-BSA和BA包被原BA-OVA,筛选获得BA杂交瘤细胞株BA-3F1E9,单克隆抗体的效价为1×10^(5)。结论本研究建立了制备高特异性BA单克隆抗体的方法,为开发鲜湿米粉中BA快速检测试剂盒提供了理论依据。 展开更多
关键词 米酵菌酸 单克隆抗体 酶联免疫吸附法
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基于异源包被的地索奈德间接竞争酶联免疫检测方法 被引量：1
7
作者 谭攀 张世伟 《中国食品工业》 2022年第17期96-99,104,共5页
为监控保健食品和化妆品中地索奈德的滥用情况,本研究建立了地索奈德间接竞争酶联免疫分析方法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。将地索奈德(Desonide,DES)半抗原通过活泼酯法与钥孔戚血蓝蛋白(keyh... 为监控保健食品和化妆品中地索奈德的滥用情况,本研究建立了地索奈德间接竞争酶联免疫分析方法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。将地索奈德(Desonide,DES)半抗原通过活泼酯法与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,获得地索奈德完整抗原DES-KLH;通过免疫小鼠和细胞融合获得抗地索奈德单克隆抗体。将地索奈德半抗原通过活泼酯法分别与牛血清白蛋白(bovine serumalbumin,BSA)偶联作为包被原,建立地索奈德同源及异源的间接竞争酶联免疫分析方法。在同源包被情况下,地索奈德灵敏度为7.9ng/m L,而DEX异源包下灵敏度为0.72ng/m L。对增强骨密度类保健食品、面霜、精华、眼霜、爽肤水的添加回收率在82%—105%之间。该方法能有效应用于食品和化妆品中地索奈德的快速筛查。 展开更多
关键词 糖皮质激素 地索奈德 异源包被 间接竞争酶联免疫法(ic-ELISA)
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酚酞单克隆抗体的制备 被引量：1
8
作者 谭攀 吴鑫 +1 位作者 蔡杜曼 胡金梅 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第24期8479-8483,共5页
目的建立免疫学快速检测减肥类保健食品中非法添加的酚酞,制备酚酞单克隆抗体并进行评价。方法利用碳二亚胺(carbodiimide,EDC)法合成免疫原和包被原,用免疫原免疫Balb/C小鼠,取小鼠脾脏与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合。采用竞争结合双阳性两... 目的建立免疫学快速检测减肥类保健食品中非法添加的酚酞,制备酚酞单克隆抗体并进行评价。方法利用碳二亚胺(carbodiimide,EDC)法合成免疫原和包被原,用免疫原免疫Balb/C小鼠,取小鼠脾脏与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合。采用竞争结合双阳性两步筛选法,筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,利用有限稀释亚克隆方法得到单株细胞;采用体内诱生法制备腹水型单克隆抗体。利用辛酸-饱和硫酸铵法对腹水型抗体进行纯化,利用酶联免疫吸附法鉴定纯化后的抗体。结果成功合成了酚酞-BSA免疫原和酚酞-OVA包被原,筛选获得酚酞杂交瘤细胞株FT/BSA/2019,单克隆抗体的效价1×10^5。结论本研究初步建立了特异性高的酚酞单克隆抗体的制备方法。 展开更多
关键词 酚酞 单克隆抗体 酶联免疫吸附法
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