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PDCD10表达下调导致人胶质母细胞瘤细胞系耐替莫唑胺治疗的机制研究
1
作者 钟荣德 王恒 +3 位作者 肖月 陈凡帆 黄国栋 刘运生 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期541-551,共11页
目的探讨程序性细胞死亡分子10(PDCD10)表达下调介导胶质母细胞瘤(GBM)细胞系耐替莫唑胺(TMZ)治疗的机制。方法使用PDCD10小干扰RNA或阴性序列小干扰RNA转染U87、LN229和T98g细胞系,分别应用300µmol/L TMZ(处理转染后的T98g细胞系)... 目的探讨程序性细胞死亡分子10(PDCD10)表达下调介导胶质母细胞瘤(GBM)细胞系耐替莫唑胺(TMZ)治疗的机制。方法使用PDCD10小干扰RNA或阴性序列小干扰RNA转染U87、LN229和T98g细胞系,分别应用300µmol/L TMZ(处理转染后的T98g细胞系)及150µmol/L TMZ(处理转染后的U87和LN229细胞系)以构建TMZ耐药细胞系,即PDCD10小干扰RNA转染及TMZ耐药的U87细胞系(shPDCD10-U87-RG)、阴性序列小干扰RNA转染及TMZ耐药的U87细胞系(EV-U87-RG)、shPDCD10-T98g-RG、EV-T98g-RG、shPDCD10-LN229-RG、EV-LN229-RG。采用流式细胞术和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验检验TMZ耐药细胞系的转染效率和PDCD10表达水平,通过MTT实验和克隆形成实验验证TMZ耐药细胞系的耐药能力。进一步通过生物信息学分析检验PDCD10与碱基错配修复系统中关键基因MSH6、PMS2的相关性,同时通过检测耐药细胞的细胞周期和神经球形成能力来研究耐药细胞系的耐药机制。结果(1)qRT-PCR检测结果显示,与EV-U87-RG比较,shPDCD10-U87-RG细胞PDCD10表达下调了(32.85±1.14)%,差异有统计学意义(t=2.925,P=0.049);与EV-T98g-RG比较,shPDCD10-T98g-RG细胞PDCD10表达下调了(57.17±1.81)%,差异有统计学意义(t=3.179,P=0.043);与EV-LN229-RG比较,shPDCD10-LN229-RG细胞PDCD10表达下调了(33.68±1.34)%,差异有统计学意义(t=3.085,P=0.045)。(2)MTT实验结果显示,与EV-U87-RG比较,shPDCD10-U87-RG细胞活力明显增强,差异有统计学意义(P<0.05);与EV-T98g-RG比较,shPDCD10-T98g-RG细胞活力明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。同一种细胞之间,与TMZ处理72 h后比较,TMZ洗出后3 d细胞活力亦显著提高,差异有统计学意义(P<0.05)。克隆形成实验显示PDCD10表达下调的细胞系成瘤能力更高。(3)与EV-U87-RG细胞、EV-T98g-RG细胞比较,PDCD10表达下调的细胞(shPDCD10-U87-RG细胞、shPDCD10-T98g-RG细胞)逃逸TMZ诱导的细胞周期G2/M阻滞,导致出现耐TMZ治疗。(4)生物信息学分析发现PDCD10的� 展开更多
关键词 程序性细胞死亡分子10 胶质母细胞瘤 替莫唑胺 碱基错配修复 细胞周期
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蛋白泛素化修饰调控炎性肠疾病发生和发展的研究进展 被引量：1
2
作者 凌静 李红蕊 陈玮琳 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期82-88,共7页
炎性肠疾病是一种慢性胃肠道功能紊乱的炎症性疾病。泛素化是一类重要的蛋白质翻译后修饰方式。近年来关于泛素化-去泛素化系统在炎性肠疾病发生和发展中的作用已成为研究热点。目前蛋白泛素化修饰调控炎性肠疾病过程所需的E3泛素连接酶... 炎性肠疾病是一种慢性胃肠道功能紊乱的炎症性疾病。泛素化是一类重要的蛋白质翻译后修饰方式。近年来关于泛素化-去泛素化系统在炎性肠疾病发生和发展中的作用已成为研究热点。目前蛋白泛素化修饰调控炎性肠疾病过程所需的E3泛素连接酶中,分子生物学研究较为清楚的有环指蛋白183(RNF183)、环指蛋白20(RNF20)、Itch和锌指蛋白A20。其中RNF183可靶向核因子κB抑制蛋白α(IκBα)泛素化降解促进NF-κB活化;RNF20促进组蛋白H2B单泛素化从而下调相关炎症因子的转录;Itch促进维甲酸核孤儿受体γt泛素化降解抑制IL-17介导的肠炎;A20以其特有的泛素化和去泛素化双重活性影响炎性肠疾病的发展。本文综述了以上分子在炎性肠疾病发生、发展和转归中的作用及调控机制。 展开更多
关键词 泛素化 泛素蛋白连接酶类 炎性肠疾病 综述
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转录因子BCL11B通过TGF-β_1调控支气管哮喘患者IL-17A的表达 被引量：6
3
作者 胡华元 胡刚 陈思 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期3660-3662,共3页
目的探讨转录因子BCL11B在支气管哮喘患者中的变化情况,并分析其是否可以通过TGF-β1调控哮喘患者IL-17A的表达。方法 25例慢性持续期哮喘患者为哮喘组,10例非哮喘志愿者为正常对照组。分别通过实时定量PCR(Taqman法)检测两组外周血单... 目的探讨转录因子BCL11B在支气管哮喘患者中的变化情况,并分析其是否可以通过TGF-β1调控哮喘患者IL-17A的表达。方法 25例慢性持续期哮喘患者为哮喘组,10例非哮喘志愿者为正常对照组。分别通过实时定量PCR(Taqman法)检测两组外周血单个核细胞中BCL11B的表达水平,通过ELISA方法检测两组血浆中TGF-β1和IL-17A的表达情况。结果哮喘组患者BCL11B的表达明显低于正常对照组,而TGF-β1和IL-17A表达明显高于正常对照组。哮喘患者BCL11B的表达与TGF-β1和IL-17A均呈负相关,而TGF-β1和IL-17A的表达呈正相关。结论哮喘患者低表达的BCL11B可能会通过TGF-β1上调IL-17A的表达,从而参与哮喘炎症反应的发生。 展开更多
关键词 哮喘 BCL11B基因 TGF-Β1 IL-17A
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哮喘患者外周血BCL11B、RORγt和IL-17A的表达及意义
4
作者 胡华元 吴晶 +1 位作者 张黎 陈思 《国际呼吸杂志》 2016年第7期508-511,共4页
目的探讨BCL11B在不同阶段支气管哮喘（简称哮喘）患者中的变化情况，并分析其是否可以通过转录因子维甲酸相关孤儿素受体γt（retinoid—related orphann uclearr eceptorγt，RORγt）调控哮喘患者IL-17A的表达。方法10例急性发作期... 目的探讨BCL11B在不同阶段支气管哮喘（简称哮喘）患者中的变化情况，并分析其是否可以通过转录因子维甲酸相关孤儿素受体γt（retinoid—related orphann uclearr eceptorγt，RORγt）调控哮喘患者IL-17A的表达。方法10例急性发作期哮喘患者为急性组，25例慢性持续期哮喘患者为慢性组，10例非哮喘志愿者为正常对照组。通过Taqman实时定量PCR检测各组外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）中BCL11B的表达水平，通过SYBRGreenI实时定量PCR检测各组RORγt和IL-17A的表达情况。结果两组哮喘患者BCL11B的表达均明显低于正常人，而RORγt和IL-17A表达均高于正常人。急性组BCL11B的表达低于慢性组，两组哮喘患者RORγt和IL-17A的表达无明显差异。急性哮喘患者BCL11B的表达与RORγt和IL-17A均呈负相关。慢性组BCL11B表达水平与RORγt无明显相关，与IL-17A呈负相关。结论BCL11B表达与哮喘严重程度相关，急性期哮喘可能通过低表达的BCL11B通过RORγt上调IL-17A的表达，从而参与哮喘炎症反应的发生。 展开更多
关键词 哮喘 B细胞慢性淋巴细胞白血病/淋巴瘤11B基因 维甲酸相关孤儿素受体γt
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