人脐带间充质干细胞外泌体免疫调节功能的研究 被引量：19

1

作者 刘明 汪劲松 +2 位作者 刘沐芸 胡祥 徐军 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第32期2630-2633,共4页

目的 探讨人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）分泌的外泌体（exosomes）的免疫调节能力.方法 分离培养hUC-MSCs,收集第3代hUC-MSCs上清,提取外泌体,Western印迹检测其表面特异标志CD81、CD9的表达,BCA法测定浓度;不同浓度外泌体与CD3/CD28... 目的 探讨人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）分泌的外泌体（exosomes）的免疫调节能力.方法 分离培养hUC-MSCs,收集第3代hUC-MSCs上清,提取外泌体,Western印迹检测其表面特异标志CD81、CD9的表达,BCA法测定浓度;不同浓度外泌体与CD3/CD28单抗刺激的正常人外周血单个核细胞（PBMC）作用72 h,流式检测作用前后Th17和Treg细胞的比例变化,检测对CD4^＋T、CD8^＋T细胞增殖能力的影响,ELISA检测干扰素（IFN）-γ、白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、转化生长因子β1（TGF-β1）的水平变化.结果 hUC-MSCs外泌体高表达CD9、CD81,可明显抑制CD4＋T和CD8＋T细胞的增殖,升高CD4^＋ CD25^＋ FoxP3^＋ Treg细胞比例,经CD3/CD28单抗刺激后CD45＋ CD4^＋ Ki67^＋和CD45^＋ CD8^＋ Ki67^＋细胞比例为85.3％±5.6％和72.6％±6.3％,同时升高PBMC分泌的TGF-β1水平,降低IFN-γ、IL-6、TNF-α的水平（均P＜0.05）.结论 hUC-MSCs分泌的外泌体具有免疫调节功能,有望成为一种免疫治疗的新选择. 展开更多

关键词 间充质干细胞 脐带 外泌体 免疫

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间充质干细胞移植治疗终末期肝病前后血清甲胎球蛋白的变化 被引量：12

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作者 陈建华 徐玉琴 +1 位作者 杨晋辉 张军 《分子诊断与治疗杂志》 2015年第2期110-113,共4页

目的探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)移植治疗终末期肝病甲胎球蛋白(α-fetoprotein,AFP)的变化,观察病人肝功能有无改善。方法 MSC移植治疗73例终末期肝病患者,其中包括失代偿期肝硬化患者45例,慢性重症肝炎5例,监测疗前... 目的探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)移植治疗终末期肝病甲胎球蛋白(α-fetoprotein,AFP)的变化,观察病人肝功能有无改善。方法 MSC移植治疗73例终末期肝病患者,其中包括失代偿期肝硬化患者45例,慢性重症肝炎5例,监测疗前和疗后1周、疗后1个月、2个月AFP及肝功能变化。结果疗后1周AFP较疗前明显升高,其后降低,2个月至疗前水平,差别有统计学差异(P<0.05)。白蛋白(serum albumin,ALB)疗后1月、2月与疗前相比,差别有统计学意义(P<0.05)。胆碱酯酶疗后2月较疗前明显升高,差别有统计学意义(P<0.05)。所有接受干细胞移植的患者观察过程中未出现肝脏及其他器官肿瘤。结论 MSC移植治疗终末期肝病患者安全有效。 展开更多

关键词 间充质干细胞(MSC) 移植 甲胎球蛋白(AFP)

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亚甲蓝/光化学法灭活病毒对血浆成分的影响 被引量：9

3

作者 焦红亮 关方霞 +4 位作者 杨波 李建斌 单泓 杜英 胡祥 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期100-102,共3页

背景:对血液进行病毒灭活是保障安全输血的措施之一,亚甲蓝/光化学法灭活人血浆中病毒的效果已被证实,但其对血浆成分影响的报道很少。目的:观察亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆对血液成分结构和功能的影响。方法:随机选择40份采血后6h内40... 背景:对血液进行病毒灭活是保障安全输血的措施之一,亚甲蓝/光化学法灭活人血浆中病毒的效果已被证实,但其对血浆成分影响的报道很少。目的:观察亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆对血液成分结构和功能的影响。方法:随机选择40份采血后6h内400mL全血制备的新鲜血浆称质量留样,然后与亚甲蓝病毒灭活过滤器无菌连接,亚甲蓝的终浓度在0.9～1.3μmol/L。将加入亚甲蓝的血浆置入4℃病毒灭活箱的搁架上,摆动频率60次/min,利用32000～38000Lx光照强度的可见光4℃照射35min,将光照后的血浆通过病毒灭活过滤器滤除亚甲蓝和残余白细胞,混匀后留样10mL,立即置于-80℃冰箱冻存。检测照射前后样品的血浆量、亚甲蓝浓度、FⅧ∶C、FⅤ∶C、VWF、Fib含量的变化。结果与结论:血浆病毒灭活后血浆容量、FⅧ∶C、FⅤ∶C、VWF、Fib的回收率分别为(96.39±1.73)%、(82.55±9.25)%、(81.03±15.27)%、(93.25±6.17)%、(81.61±14.25)%。亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆中大多数成分的影响不明显,可以满足临床安全输血的需求。 展开更多

关键词 亚甲蓝 输血 凝血因子 病毒灭活 血浆

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人脐带间充质干细胞制剂大规模生产中稳定性研究

4

作者 储王龙 李童婧 +10 位作者 上官燕 何方涛 吴建福 曾秀萍 郭涛 王清芳 张芬 钟振忠 梁晓 胡隽源 刘沐芸 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期743-750,共8页

人脐带间充质干细胞在再生医学中应用广泛,但较少有研究关注间充质干细胞制剂生产中的稳定性。本研究通过对生产过程中细胞原液、半成品稳定性研究及制剂复苏稳定性研究,为生产过程提供依据,为制剂复苏使用方法提供参考。采用3批次细胞... 人脐带间充质干细胞在再生医学中应用广泛,但较少有研究关注间充质干细胞制剂生产中的稳定性。本研究通过对生产过程中细胞原液、半成品稳定性研究及制剂复苏稳定性研究,为生产过程提供依据,为制剂复苏使用方法提供参考。采用3批次细胞制剂,取生产过程中细胞原液、半成品分别静置在低温(2~8℃)及室温(20~26℃)条件下储存,细胞原液储存时间间隔为0、2、4、6 h,半成品储存时间间隔为0、1、2、3 h,考察项目包括外观检查、活细胞浓度、细胞活率、细胞表面标记、淋巴细胞增殖抑制率及无菌检查。此外,取细胞制剂复苏后分别进行稀释和培养稳定性探索,复苏稀释液分别为0.9%氯化钠注射液、0.9%氯化钠注射液+1%人血白蛋白、0.9%氯化钠注射液+2%人血白蛋白,稀释倍数包括10倍及40倍,稀释后静置时间间隔为0、1、2、3、4 h。复苏培养液分别为DMEM培养基、DMEM+2%血小板裂解物、0.9%氯化钠注射液、0.9%氯化钠注射液+1%人血白蛋白,培养时间为24 h。考察项目为活细胞浓度及细胞活率。实验结果表明,细胞原液在低温(2~8℃)及室温(20~26℃)条件下静置6 h内均维持稳定,细胞半成品在同样条件下静置3 h内维持稳定。制剂复苏后,使用含1%或2%人血白蛋白的氯化钠注射液稀释,在4 h内细胞活率维持在80%以上。不同稀释倍数对细胞活性存在影响。制剂复苏后,使用含2%血小板裂解物的完全培养基培养24 h后,细胞活率达到80%以上。综上表明,细胞原液在6 h内、细胞半成品在3 h内稳定性均满足要求,细胞制剂复苏后稀释液中添加1%或2%人血白蛋白更好保护细胞活性。 展开更多

关键词 间充质干细胞 生产 原液 半成品 制剂 稳定性

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两份人脐血间充质干细胞混合培养及向神经元样细胞的分化 被引量：5

5

作者 焦红亮 杨波 +9 位作者 关方霞 李建斌 杜英 单泓 胡祥 胡炜 马建 满勇 赵林娜 段艳丽 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第21期4021-4025,共5页

背景：脐血间充质干细胞可诱导分化为神经样细胞，但在临床中发现干细胞培养细胞增殖的数量不足。目的：观察两份脐血间充质干细胞混合培养的生长情况，以及经碱性成纤维细胞生长因子诱导脐血间充质干细胞向神经元样细胞的分化。设计、... 背景：脐血间充质干细胞可诱导分化为神经样细胞，但在临床中发现干细胞培养细胞增殖的数量不足。目的：观察两份脐血间充质干细胞混合培养的生长情况，以及经碱性成纤维细胞生长因子诱导脐血间充质干细胞向神经元样细胞的分化。设计、时间及地点：于2007—01/10在郑州大学基础医学院微生物与免疫学实验室完成以细胞为对象的对照观察性实验。材料：健康分娩产妇自愿捐献的脐血60～180mL。方法：应用Ficoll—Hypaque淋巴细胞分离液以密度梯度法获取脐血间充质干细胞，加入碱性成纤维细胞生长因子诱导分化。当细胞传至第3代时，随机取培养的6份脐血间充质干细胞（半量）为A组，6份脐血间充质干细胞（半量）为B组，将A、B组各剩余的半量脐血间充质干细胞混合为C组。3组细胞密度均为1．0×10^4L^-1。主要观察指标：以活细胞计数和MTT比色法比较3组细胞扩增数量，免疫组织化学检测脐血间充质干细胞神经胶质细胞标志物、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白的表达。结果：活细胞计数和MTT比色检测显示，将两份不同脐血间充质干细胞混合后，细胞贴壁比单份脐血间充质干细胞快（P〈0．05），增殖也非常快（P〈0．05）。3组细胞经碱性成纤维细胞生长因子诱导后均表达神经胶质细胞标志物、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白，并且巢蛋白阳性表达率无差别（P〉0．05）。结论：混合脐血间充质干细胞之间有互相促增殖作用，应用碱性成纤维细胞生长因子诱导的脐血间充质干细胞可表达神经胶质细胞标志物、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白。 展开更多

关键词 脐血 间充质干细腿诱导 分化 混合培养

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一种新型细胞智造产线与人工制备对比

6

作者 钟桂强 张芬 +2 位作者 王清芳 梁晓 刘沐芸 《中国医药工业杂志》 EI CAS CSCD 2024年第7期1016-1023,1031,共9页

针对人工制备细胞效率低、成本高及产品批间差异大等缺点,该研究开发了一种新型的人源性脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)智造产线,并对比了其与传统人工制备所得细胞的基本特性、安全性及有效性。结果显示,智造产线制备的hUC-MSCs呈纤维状,... 针对人工制备细胞效率低、成本高及产品批间差异大等缺点,该研究开发了一种新型的人源性脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)智造产线,并对比了其与传统人工制备所得细胞的基本特性、安全性及有效性。结果显示,智造产线制备的hUC-MSCs呈纤维状,细胞表面标志物均符合国际细胞与基因治疗协会中定义的间充质干细胞的要求;细胞无菌、支原体结果均呈阴性,内毒素含量低于0.5 EU/mL;癌基因、抑癌基因和核型分析结果正常,端粒酶表达为低活性,异常毒性结果正常;所得细胞的活率高于90%,具有良好的成骨、成脂、成软骨能力,对Th1、Th2、Th17细胞的增殖呈抑制作用,对Treg细胞的增殖则有促进作用。该细胞智造产线制备的hUC-MSCs与人工制备的相比,无显著差异且符合质量标准;并且,在细胞均一性、产能提升、成本优化和部署优越性等方面更有优势,为实现细胞的规模化和产业化制备提供了新思路。 展开更多

关键词 间充质干细胞 细胞智造产线 自动化 产能提升

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基于生物信息学研究CDK1在ACC中的表达及临床意义

7

作者 杨垲威 唐开 +2 位作者 廖霞 潘兴华 周仁龙 《医学理论与实践》 2024年第16期2701-2705,2727,共6页

目的:基于生物信息学探讨细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)在肾上腺皮质癌(ACC)中的表达水平,并用于评估ACC患者预后的价值及与免疫浸润的相关性,分析其潜在的作用机制。方法:通过GEPIA和UALCAN数据库分析CDK1在ACC中的表达与肿瘤分级、... 目的:基于生物信息学探讨细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)在肾上腺皮质癌(ACC)中的表达水平,并用于评估ACC患者预后的价值及与免疫浸润的相关性,分析其潜在的作用机制。方法:通过GEPIA和UALCAN数据库分析CDK1在ACC中的表达与肿瘤分级、分期等临床特征和肿瘤患者预后的相关性。通过TIMER数据库分析ACC中CDK1表达水平与免疫细胞浸润水平的关系。通过STRING数据库和GENEMANIA数据库分析与CDK1相关蛋白的互作网络,并运用METASCAPE数据库对以上蛋白进行GO和KEGG富集分析。结果:CDK1在ACC中的表达显著高于正常组织(P<0.05);CDK1的高表达与ACC患者的预后呈负相关,CDK1表达愈高预后愈差(P<0.05);CDK1的表达水平与浆细胞呈正相关(相关系数R>0,P<0.05),而与CD8^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞、M2型巨噬细胞、树突细胞免疫浸润均呈负相关(相关系数R<0,P<0.05)。CDK1及其相互作用蛋白主要参与细胞周期相变、有丝分裂细胞周期的调节、周期蛋白依赖蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶活性的调控等生物学过程。结论:CDK1可作为ACC预后不良的标志物,CDK1通过影响免疫细胞浸润及细胞增殖分化途径调控ACC的发生发展。 展开更多

关键词 肾上腺皮质癌 CDK1 预后 免疫浸润 富集分析 生物信息学

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人脐带间充质干细胞联合抗病毒等方法治疗新型冠状病毒肺炎 被引量：5

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作者 古利明 李涛 +15 位作者 曾勇 陈俊辉 王福平 郝应禄 吴海鹰 阮继银 李燕皎 陈云 夏婧 孙佳 胡隽源 李薇 余从涛 马朝霞 钱传云 胡敏 《昆明医科大学学报》 CAS 2020年第3期96-100,共5页

目的探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSC)联合抗病毒等方法对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)重症患者的治疗作用。方法在常规治疗的基础上,对1例70岁的女性COVID-19重症患者静脉输注三次异体人脐带间充质干细胞,并对其抑制炎症反应和组织损伤... 目的探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSC)联合抗病毒等方法对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)重症患者的治疗作用。方法在常规治疗的基础上,对1例70岁的女性COVID-19重症患者静脉输注三次异体人脐带间充质干细胞,并对其抑制炎症反应和组织损伤的作用进行研究。结果降低了主要炎症因子IL-6以及C-反应蛋白(CRP)等指标的水平,输注期间患者中性粒细胞与淋巴细胞的比值持续下降,T细胞、NK细胞和B细胞的绝对值持续回升,CT影像结果显示肺部的炎症反应逐渐消退;未见不良反应。结论异体人脐带间充质干细胞联合抗病毒等方法对COVID-19重症患者安全有效,值得进行更多的临床探索。 展开更多

关键词 新型冠状病毒肺炎 人脐带间充质干细胞 IL-6 组织修复

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IFN-γ对人脐带间充质干细胞细胞因子分泌和免疫调节蛋白表达的体外细胞学研究 被引量：5

9

作者 王立林 傅泽钦 +7 位作者 廖延 胡隽源 曾桂芳 胡樾 曾伟杰 谢长峰 曾劲峰 刘沐芸 《中国输血杂志》 CAS 2020年第9期865-871,共7页

目的从细胞学方面探讨治疗新冠肺炎患者临床使用的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)在体外连续制备过程中其细胞因子和免疫调节蛋白的基础分泌水平,以及探究IFN-γ刺激hUC-MSCs后对细胞因子和免疫调节蛋白的影响。方法首先,利用ELISA等方... 目的从细胞学方面探讨治疗新冠肺炎患者临床使用的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)在体外连续制备过程中其细胞因子和免疫调节蛋白的基础分泌水平,以及探究IFN-γ刺激hUC-MSCs后对细胞因子和免疫调节蛋白的影响。方法首先,利用ELISA等方法检测在连续传代扩增hUC-MSCs中多种细胞因子(IL-6、IL-1β、TGF-β、HGF和PGE-2)和免疫调节蛋白(PD-L1和IDO1)的基础表达水平和稳定性;其次,探究hUC-MSCs受到炎症因子IFN-γ刺激后因子分泌和蛋白表达的变化情况。结果 hUC-MSCs在连续传代中其9种MSC相关表面标志物没有明显改变;P0代hUC-MSCs分泌高水平的HGF和TGF-β,但会随着传代增加而分泌水平显著下降;而IL-6和PGE-2则会随着传代增加而分泌上升;IL-1β总体基础表达水平不高;同时,WB和流式结果显示,免疫抑制相关的蛋白IDO1和PD-L1在正常情况下几乎不表达。而当hUC-MSCs受到炎症因子IFN-γ刺激后,细胞因子分泌普遍没有明显上调,其中HGF和PGE-2刺激后还出现了显著下降的趋势;但是免疫抑制相关蛋白IDO1和PD-L1的表达却显著上升,具有统计学意义。结论 hUC-MSCs在连续传代过程中不同细胞因子的表达水平变化具有一定的差别。在受到炎症因子IFN-γ的激活后,可能通过提高IDO1和PD-L1的蛋白表达来发挥免疫抑制的作用。此结果为hUC-MSCs治疗新冠肺炎临床疗效提供理论依据。 展开更多

关键词 人脐带间充质干细胞 新型冠状病毒肺炎 细胞因子风暴 干扰素-Γ

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语前聋患儿人工耳蜗植入术后早期听觉言语能力评估 被引量：6

10

作者 杨琛 黄维平 +1 位作者 尹中普 汪照静 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS 北大核心 2015年第8期740-742,共3页

目的：评估语前聋患儿人工耳蜗术后听力及言语的康复效果,分析随着康复时间的延长,植入时年龄与康复效果的关系,探讨人工耳蜗术后语前聋患儿听觉言语发展的规律。方法：将57例行人工耳蜗植入术患儿按植入年龄分为1.3-2.9岁组（17例）、3... 目的：评估语前聋患儿人工耳蜗术后听力及言语的康复效果,分析随着康复时间的延长,植入时年龄与康复效果的关系,探讨人工耳蜗术后语前聋患儿听觉言语发展的规律。方法：将57例行人工耳蜗植入术患儿按植入年龄分为1.3-2.9岁组（17例）、3.0-4.9岁组（14例）和5.0-7.9岁组（26例）,分别在术后3、6、9、12个月通过问卷方式对患儿家长及康复老师进行随访,获得患儿的CAP及SIR评分,从而对患儿听觉感知能力和言语产生能力进行评估。结果：不同年龄组患儿CAP及SIR得分随植入时间延长呈明显上升趋势。CAP问卷得分中,1.3-2.9岁组上升最快,在第3个月末最低,在第12个月末高于3.0-4.9岁组,与5.0-7.9岁组比较差异无统计学意义。SIR问卷得分中,1.3-2.9岁组上升最快,在第3个月末最低,在第9个月末与3.0-4.9岁组无明显差异,在第12个月末最高;5.0-7.9岁组上升最慢,在第12个月末得分明显低于其他两组。结论：术后1年内,语前聋人工耳蜗植入患儿年龄越小,听力及言语水平恢复越快。 展开更多

关键词 耳蜗植入术 聋 听觉

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亚历山大病一例 被引量：6

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作者 陶毅 刘韬 赵明伦 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2010年第5期381-382,共2页

1病例报告 患儿男，1999—06出生，美籍波多黎各人。因发育迟缓，进行性头围增大伴间歇性抽搐10年余入院。患儿于孕35周剖宫产出生，生产顺利，产后生长发育正常。7个月时无诱因出现四肢抽搐，无意识障碍，约2h后送至当地医院就诊。脑... 1病例报告 患儿男，1999—06出生，美籍波多黎各人。因发育迟缓，进行性头围增大伴间歇性抽搐10年余入院。患儿于孕35周剖宫产出生，生产顺利，产后生长发育正常。7个月时无诱因出现四肢抽搐，无意识障碍，约2h后送至当地医院就诊。脑电图检查显示棘波和棘慢波，诊断为癫痫。经吸氧、抗癫痫处理后好转，出院后一直行抗癫痫治疗，2006—2009年未再次发作。 展开更多

关键词 亚历山大病 脱髓鞘 干细胞治疗 影像

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腰椎穿刺移植自体骨髓间充质干细胞治疗脑梗死后遗症6例 被引量：5

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作者 焦红亮 关方霞 +6 位作者 杨波 李建斌 詹三华 杜英 胡祥 赵琳娜 韩小改 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第49期9172-9175,共4页

背景:骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,而且取材方便,扩增迅速,免疫原性低,在移植过程避免了免疫排斥等反应,是治疗脑梗死等神经系统疾病的理想种子细胞。目的:探讨自体骨髓间充质干细胞培养后经腰穿治疗脑梗死后遗症的安全性、可行... 背景:骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,而且取材方便,扩增迅速,免疫原性低,在移植过程避免了免疫排斥等反应,是治疗脑梗死等神经系统疾病的理想种子细胞。目的:探讨自体骨髓间充质干细胞培养后经腰穿治疗脑梗死后遗症的安全性、可行性及疗效。方法:6例脑梗死后遗症患者进行自体骨髓间充质干细胞移植,骨穿采集自体骨髓单个核细胞,体外分离培养骨髓间充质干细胞4d后经腰椎穿刺移植蛛网膜下腔,移植后观察疗效及并发症。结果与结论:培养后骨髓间充质干细胞数量明显增多,患者手术前后肌力和NIHSS评分通过统计分析有显著性差异(P<0.05),总体症状改善较术前有明显改善;移植后无严重不良事件发生。结果提示,自体骨髓间充质干细胞培养后移植治疗可使脑梗死后遗症患者症状明显改善,治疗安全有效且不良反应小。 展开更多

关键词 脑梗死后遗症 骨髓间充质干细胞 培养 移植 腰椎穿刺

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基因修饰间充质干细胞在疾病治疗中的进展 被引量：3

13

作者 周欣 方小燕 +1 位作者 李陶 刘沐芸 《公共卫生与预防医学》 2015年第4期67-70,共4页

目的探讨基因修饰间充质干细胞在疾病治疗中的进展。方法对间充质干细胞的生物学特性及基因修饰后的间充质干细胞在多种疾病治疗中的研究进展展开综述。结果间充质干细胞具有易于分离、扩增培养、可以分泌多种细胞因子的特点,并且具有... 目的探讨基因修饰间充质干细胞在疾病治疗中的进展。方法对间充质干细胞的生物学特性及基因修饰后的间充质干细胞在多种疾病治疗中的研究进展展开综述。结果间充质干细胞具有易于分离、扩增培养、可以分泌多种细胞因子的特点,并且具有向受损组织、实体瘤的迁移和归巢能力。近年对间充质干细胞的研究从实验室研究到临床试验都有很多报道。在不断深入的研究中,更多的关注集中于提高间充质干细胞在体内的存活率、因子分泌能力和迁移归巢能力上。采用基因修饰的方法将目的基因导入间充质干细胞可达到上述研究目的。目前关于基因修饰的间充质干细胞治疗各种疾病的报道很多,主要涵盖组织损伤修复,放射性损伤治疗和肿瘤治疗等几个方面。结论基因修饰的间充质干细胞不仅具有MSCs的全部特性,而且能够高效表达某些外源基因,加强其在各种疾病的治疗中的疗效。 展开更多

关键词 间充质干细胞 基因修饰 组织修复 放射性损伤 肿瘤治疗

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基于AO/PI荧光染色原理的杀伤细胞数量及活率检测方法学验证和细胞培养、冻存、复苏稳定性研究

14

作者 储王龙 朱丽萍 +5 位作者 张芬 钟振忠 柯晖 梁晓 曾秀萍 刘沐芸 《药物评价研究》 CAS 2023年第2期377-383,共7页

目的验证基于吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)荧光染色原理的自动细胞分析仪检测细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)数量及活率的可行性,并对CIK细胞培养全过程及冻存复苏后至使用前过程进行检测,建立相应的数量及活率标准。方法采集健康供者的外周... 目的验证基于吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)荧光染色原理的自动细胞分析仪检测细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)数量及活率的可行性,并对CIK细胞培养全过程及冻存复苏后至使用前过程进行检测,建立相应的数量及活率标准。方法采集健康供者的外周血分离、培养CIK细胞,取培养过程中的细胞使用AO/PI荧光染色法、应用自动细胞分析仪检测细胞数量及活率,对结果的专属性、准确度、精密度、数量线性及范围、活率线性及范围进行验证。应用建立的方法对外周血分离后的外周血单个核细胞(PBMC)、培养过程中、冻存前及复苏后的CIK细胞数量及活率进行全过程检测。结果专属性、准确度、精密度、数量线性及范围、活率线性及范围验证均符合预期要求。CIK细胞培养全过程活率均不低于80%,样本平均倍增时间为(42.26±1.17)h。冻存前的CIK细胞在加入含5%DMSO的冷冻保护剂后90 min内活率稳定,复苏后未经稀释或洗涤处理120 min内活率稳定,复苏后经洗涤去除DMSO处理后12 h内活率稳定。结论基于AO/PI荧光染色原理的自动细胞分析仪可以用于检测CIK细胞的数量及活率,其结果可以用于细胞放行评价及稳定性研究。 展开更多

关键词 细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK) AO/PI荧光 自动细胞分析仪 细胞数量 活率 验证 稳定性

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从标准化角度看我国细胞治疗产业发展 被引量：1

15

作者 李婵 杨磊 廖延 《中国标准化》 2023年第7期53-60,共8页

为了促进我国细胞治疗产业的健康有序发展,本文对近年来我国细胞治疗产业标准化情况进行梳理,通过研究各类标准的分布情况、已发布标准的内容分布和已立项标准的发展趋势三方面产业标准化情况,概括得出我国该领域标准化发展现状。结合... 为了促进我国细胞治疗产业的健康有序发展,本文对近年来我国细胞治疗产业标准化情况进行梳理,通过研究各类标准的分布情况、已发布标准的内容分布和已立项标准的发展趋势三方面产业标准化情况,概括得出我国该领域标准化发展现状。结合我国细胞治疗产业目前规范化程度提升、标准化建设有力地促进了产业规模和盈利能力增长的特点,以及仍存在产业机构在各区域分布不平衡及产业链各环节发展不均衡的弱点,探讨标准化与细胞治疗产业发展间的关系,提出完善产业标准体系、关注配套环节和定向政策法规支持的建议。 展开更多

关键词 标准化 细胞治疗 干细胞 嵌合抗原受体T细胞 团体标准 产业链 关键物料 体外诊断

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脐血干细胞治疗视神经损伤的临床观察 被引量：5

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作者 尹成玉 崔勇 +7 位作者 刘韬 董晓云 刘颖 张磊 邱海霞 高洁 仲赫维 董辉 《科技信息》 2012年第9期419-420,437,共3页

目的:观察脐血间充质干细胞治疗视神经损伤的安全性和疗效。方法:搜集2010年12月至2011年9月来我院住院的视神经损伤患者23人,其中男15人,女8人,年龄在5-77岁之间,平均年龄30.1岁,其中原发性视神经萎缩12人,遗传性Lebers病5人,视神经发... 目的:观察脐血间充质干细胞治疗视神经损伤的安全性和疗效。方法:搜集2010年12月至2011年9月来我院住院的视神经损伤患者23人,其中男15人,女8人,年龄在5-77岁之间,平均年龄30.1岁,其中原发性视神经萎缩12人,遗传性Lebers病5人,视神经发育不良者1人,视隔发育不良者2人,视网膜色素变性者3人。治疗前后进行各项指标检测,包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐、血糖、甘油三酯、胆固醇、乙肝表面抗原、凝血酶原时间、部分凝血酶原时间、甲胎球蛋白、癌胚抗原检查,眼科检查视力、眼压、闪光型视觉诱发电位等,采用脐血间充质干细胞对收集的23位视神经损伤患者进行治疗,每次(给药间隔3-5天,每次给予5*107个干细胞)。对视神经损伤患者治疗前后检测实验室指标及闪光型视觉诱发电位的进行对比,分析脐血间充质干细胞对视神经损伤的治疗安全性及效果。结果:脐血间充质干细胞治疗前后实验室指标、眼压无显著性差异,视力、闪光型视觉诱发电位的潜时、波幅变化明显。结论:脐血间充质干细胞移植治疗视神经损伤患者的过程安全可靠;脐血间充质干细胞移植治疗视神经损伤患者视力、闪光型视觉诱发电位均有改善。 展开更多

关键词 脐血间充质干细胞 视神经损伤 视觉诱发电位

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三维扫描系统用于评价细胞辅助自体脂肪移植术的效果 被引量：3

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作者 董诚挚 龙云 +3 位作者 雷蒙德·伍 胡祥 何毅欣 朱辉 《中华医学美学美容杂志》 2019年第3期214-217,共4页

目的探讨三维扫描系统评价细胞辅助自体脂肪移植(CAL)面部填充效果及其对脂肪成活率的影响。方法2016年2—5月于北京大学深圳医院整形外科门诊要求行自体脂肪移植面部填充患者中选出14例,其中7例行CAL面部填充(CAL组),CAL组患者取部分... 目的探讨三维扫描系统评价细胞辅助自体脂肪移植(CAL)面部填充效果及其对脂肪成活率的影响。方法2016年2—5月于北京大学深圳医院整形外科门诊要求行自体脂肪移植面部填充患者中选出14例,其中7例行CAL面部填充(CAL组),CAL组患者取部分新鲜脂肪组织送实验室制备血管基质片段,将血管基质片段与脂肪混合后移植;7例行传统自体脂肪移植(对照组)。13例患者分别于术前、术后1周、术后6个月行三维面部扫描,建立面部数字模型,计算移植脂肪成活率。结果CAL组平均脂肪移植量13.86 ml,对照组平均脂肪移植量12.14 ml,两组比较脂肪移植量差异无统计学意义(P>0.05)。经三维扫描系统计算,CAL组患者平均脂肪成活率37.82%,对照组患者平均脂肪成活率27.54%,两组脂肪成活率差异有统计学意义(P<0.05)。结论三维扫描系统能够提供面部脂肪移植术后的脂肪体积等相关数据,能够计算脂肪成活率。细胞辅助自体脂肪移植可能增加移植脂肪成活率。 展开更多

关键词 移植 自体 脂肪组织 美容技术 比较研究 三维扫描系统

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人脐带间充质干细胞对肿瘤细胞生长及软琼脂克隆形成的影响 被引量：4

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作者 曾桂芳 谢长峰 +6 位作者 徐绍坤 杜杰 李婵 李陶 左丛林 刘沐芸 胡祥 《中华细胞与干细胞杂志（电子版）》 2016年第2期97-104,共8页

目的研究人脐带间充质干细胞(h UCMSC)体外共培养对肿瘤细胞增殖的影响以及在软琼脂中形成克隆的可能性,从而评价其体外促瘤性和致瘤性,为其体内致瘤性研究及临床应用提供安全性数据。方法剥取脐带华通氏胶,剪碎,组织块贴壁法获得贴壁细... 目的研究人脐带间充质干细胞(h UCMSC)体外共培养对肿瘤细胞增殖的影响以及在软琼脂中形成克隆的可能性,从而评价其体外促瘤性和致瘤性,为其体内致瘤性研究及临床应用提供安全性数据。方法剥取脐带华通氏胶,剪碎,组织块贴壁法获得贴壁细胞,培养传代,倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞仪测定细胞表型,检测诱导成脂肪和成骨及成软骨分化的能力,鉴定是否为h UCMSC。然后,通过体外软琼脂克隆形成实验观察h UCMSC形成集落的能力;h UCMSC分别与人白血病细胞株K562和人结肠癌细胞株Colo-205体外共培养,MTT法测定细胞增殖,并以肿瘤细胞的增殖指数(PI)值来判定h UCMSC是否对肿瘤细胞体外增殖有影响。结果人脐带华通氏胶分离培养的细胞具有成纤维细胞样的细胞形态,具有向成脂肪和成骨及成软骨方向分化的能力,表达间充质干细胞指标CD73、CD90、CD105,低表达CD34、CD45、CD19,符合间充质干细胞特点。软琼脂克隆形成实验显示h UCMSC未表现出在阻力介质中的克隆生长能力。h UCMSC分别与人白血病细胞K562和人结肠癌Colo-205细胞共培养,PI值显示h UCMSC对肿瘤细胞增殖没有影响。结论 h UCMSC体外培养不具有致瘤性,同时对肿瘤细胞增殖无影响。 展开更多

关键词 脐带 间质干细胞 细胞分化 致瘤性

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脐带间充质干细胞移植治疗狼疮性肾炎的疗效与机制 被引量：4

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作者 唐帮丽 邓丹琪 +5 位作者 张佩莲 郭芸 周晓鸿 曹文婷 刘沐芸 胡祥 《昆明医科大学学报》 CAS 2016年第7期93-98,共6页

目的观察脐带间充质干细胞(h UC-MSC)移植对狼疮性肾炎患者的临床表现、血清因子变化,探讨其疗效和机制.方法 (1)随机、双盲、平行、安慰剂对照观察12例LN患者,分为治疗组,对照组.2组病人基础治疗相同,治疗组病人在基础治疗上增加h UC-... 目的观察脐带间充质干细胞(h UC-MSC)移植对狼疮性肾炎患者的临床表现、血清因子变化,探讨其疗效和机制.方法 (1)随机、双盲、平行、安慰剂对照观察12例LN患者,分为治疗组,对照组.2组病人基础治疗相同,治疗组病人在基础治疗上增加h UC-MSC治疗.观察治疗前和治疗后2、6月的临床症状和不良反应;(2)检测治疗前和治疗后2、6月血清中肾损伤标记物(抗C1Q、骨桥蛋白(OPN)),炎症相关的细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10、IL-18、INF-γ、TGF-β1)的变化;T细胞亚群(CD3/CD4/CD8)的变化.结果 (1)2组患者症状和体征治疗后2月、6个月均有改善,治疗组缓解例数大于对照组,但2组间,差异无统计学意义(P>0.05);(2)SLIDAI评分:2组间分数治疗6个月前后比较,差异有统计学意义(P<0.05);(3)治疗机制:治疗前、治疗后2月、6月2组INF-γ、IL-4、IL-10、IL-6,IL-18,抗C1q、OPN均有变化,但2组间,差异无统计学(P>0.05).T细胞亚群:CD4+T、CD8+T细胞治疗组、对照组,治疗前、治疗后2月、6月组内比较,差异有统计学意义(P<0.05).而组间比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 (1)脐带间充质干细胞移植治疗狼疮性肾炎2组病人临床症状和实验室检查,均有改善,但目前暂无明显差异;(2)2组间炎症因子及肾损伤因子治疗前后比较变化无统计学差异,Huc-MSC治疗LN的机制需更多的临床数据探索;(3)Huc-MSC是否能够重建T细胞亚群平衡需进一步探索. 展开更多

关键词 脐带间充质干细胞 狼疮性肾炎 机制

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干细胞治疗卵巢早衰的进展 被引量：3

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作者 刘雪 佳那提.秋瓦西 +3 位作者 李朝曦 刘沐芸 胡祥 苏放明 《医学综述》 2015年第12期2151-2153,共3页

卵巢早衰已成为当今妇女不孕症的主要病因之一,且近年来发病率呈逐年上升的趋势,严重影响患者生活质量、增加社会经济负担。其病因及发病机制较为复杂,尚不十分清楚。目前主要采用激素替代治疗等方法来控制疾病进展,暂无根治方法。干细... 卵巢早衰已成为当今妇女不孕症的主要病因之一,且近年来发病率呈逐年上升的趋势,严重影响患者生活质量、增加社会经济负担。其病因及发病机制较为复杂,尚不十分清楚。目前主要采用激素替代治疗等方法来控制疾病进展,暂无根治方法。干细胞移植是近年来的研究热点之一,成为治疗卵巢早衰的新方法。该文通过回顾干细胞治疗不同病因导致卵巢早衰的临床前研究资料,对可能的治疗机制予以综述,希望为后续研究提供参考。 展开更多

关键词 卵巢早衰 干细胞 修复

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