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应用四环素调控系统建立可调控抗恶性疟原虫DNA疫苗的初步研究
1
作者 雷俊川 缪军 +3 位作者 李珣 Kai Schonig Hermann Bujard 薛采芳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期356-359,共4页
目的 :应用四环素 (tetracycline,Tet)可调控系统建立可调控的抗恶性疟原虫的DNA疫苗。方法 :首先构建恶性疟原虫顶端膜抗原 1(AMA 1)基因和转录激活因子 (tTA或rtTA)基因的真核表达质粒pTL 8/AMA 1和pTL 8/AMA 1(rtTA) ,并大量制备这... 目的 :应用四环素 (tetracycline,Tet)可调控系统建立可调控的抗恶性疟原虫的DNA疫苗。方法 :首先构建恶性疟原虫顶端膜抗原 1(AMA 1)基因和转录激活因子 (tTA或rtTA)基因的真核表达质粒pTL 8/AMA 1和pTL 8/AMA 1(rtTA) ,并大量制备这两种质粒及表达转录抑制子 (tTS)的质粒pUHS6 1。以pTL 8/AMA 1、pTL 8/AMA 1(rtTA)和pTL 8/AMA 1(rtTA)加pUHS6 1/tTS免疫小鼠后 ,用四环素类似物强力霉素 (doxcycline ,dox)诱导或抑制上述DNA载体内AMA 1的表达 ,并分离小鼠血清检测针对AMA 1抗体的表达情况。结果 :①构建了真核表达质粒pTL 8/AMA 1和pTL 8/AMA 1(rtTA) ;②pTL 8/AMA 1和pTL 8/AMA 1(rtTA)在没有被诱导表达时 (仅基础表达 ) ,可诱导明显的免疫应答。在以pTL 8/AMA 1(rtTA)与含tTS的pUHS6 1共同免疫后 ,可极大地降低其免疫应答。应用dox诱导pTL 8/AMA 1(rtTA)中的AMA 1基因表达后 ,可明显引起免疫应答。结论 :pTL 8/AMA 1(rtTA)附加pUHS6 1构成了可调节的DNA免疫系统。该系统的建立将对进一步深入研究DNA疫苗的免疫机制和调控基因表达 。 展开更多
关键词 四环素可调控系统 DNA疫苗 顶端膜抗原1
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神经节苷脂GM1促进Alzheimer病长β-淀粉样蛋白(βA4_(42))分泌以及干扰β-淀粉样蛋白前体(APP)代谢 被引量：6
2
作者 张岱 《中国心理卫生杂志》 CSSCI CSCD 北大核心 1998年第2期97-100,96,共5页
与短β┐淀粉样蛋白（βＡ４４０）比较，长β┐淀粉样蛋白（βＡ４４２）在Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病老年斑生成中具有更重要的作用。本研究发现神经节苷脂ＧＭ１同时促进人类β┐淀粉样蛋白前体基因转染细胞βＡ４４０和βＡ４４２分泌，... 与短β┐淀粉样蛋白（βＡ４４０）比较，长β┐淀粉样蛋白（βＡ４４２）在Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病老年斑生成中具有更重要的作用。本研究发现神经节苷脂ＧＭ１同时促进人类β┐淀粉样蛋白前体基因转染细胞βＡ４４０和βＡ４４２分泌，这种促进作用不具有突出的选择性。此外，本研究亦证明ＧＭ１干扰β┐淀粉样蛋白前体细胞内代谢并抑制其分泌片断的跨膜释放，β┐淀粉样蛋白前体的代谢异常也有利于βＡ４的生成。以上结果进一步提供了ＧＭ１有可能参与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病脑病理变化的实验证据。 展开更多
关键词 ALZHEIMER病 淀粉样蛋白前体 βA440 神经节苷脂
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RT-PCR方法检测非神经元、类神经元、神经元细胞系中淀粉样前体蛋白基因表达 被引量：1
3
作者 乌永忠 马康涛 张迺蘅 《北京医科大学学报》 CSCD 1999年第1期17-19,共3页
目的与方法：根据人淀粉样前体蛋白（ａｍｙｌｏｉｄｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｒｏｔｅｉｎ，ＡＰＰ）基因ｃＤＮＡ序列设计的引物，提取总ＲＮＡ，利用ＲＴＰＣＲ方法检测非神经、类神经及神经细胞系ＡＰＰ基因的表达。结果：利用专门设... 目的与方法：根据人淀粉样前体蛋白（ａｍｙｌｏｉｄｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｒｏｔｅｉｎ，ＡＰＰ）基因ｃＤＮＡ序列设计的引物，提取总ＲＮＡ，利用ＲＴＰＣＲ方法检测非神经、类神经及神经细胞系ＡＰＰ基因的表达。结果：利用专门设计的引物不能检测野生型ＣＯＳ７细胞中ＡＰＰ基因的表达，但可以检测转染人ＡＰＰ基因的非神经元类ＣＯＳ７细胞，类神经元的野生型ＰＣ１２及人神经母细胞瘤细胞ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ＡＰＰ基因的表达。 展开更多
关键词 早老性痴呆 病因学 基因表达 RT-PCR APP基因
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神经节苷脂GMI和Alzheimer氏病β-淀粉样蛋白关系的研究 被引量：1
4
作者 张岱 《中国心理卫生杂志》 CSSCI CSCD 北大核心 1998年第1期12-14,共3页
本研究应用人类β－淀粉样蛋白前体基因转染细胞模型，探讨神经节苷脂ＧＭＩ对该细胞系β－淀粉样蛋白生成的影响。结果表明ＧＭＩ促进细胞β－淀粉样蛋白分泌，提示ＧＭＩ可能增加β－淀粉样蛋白的聚积和沉淀，参与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ... 本研究应用人类β－淀粉样蛋白前体基因转染细胞模型，探讨神经节苷脂ＧＭＩ对该细胞系β－淀粉样蛋白生成的影响。结果表明ＧＭＩ促进细胞β－淀粉样蛋白分泌，提示ＧＭＩ可能增加β－淀粉样蛋白的聚积和沉淀，参与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ氏病老年斑的形成。ＧＭＩ代谢异常可能是Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ氏病的危险因素之一。 展开更多
关键词 早老性痴呆 神经节苷脂 GMI Β-淀粉样蛋白
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