目的研究bcl-2基因转染对保护体外培养缺血再灌注损伤的大鼠皮层神经细胞的影响。方法体外培养24h大鼠大脑皮层神经细胞,随机分为正常对照组(Control)、缺血再灌注组(Ischemia-reperfusion,I/R)和bcl-2基因转染组(bcl-2)。建立缺血再灌...目的研究bcl-2基因转染对保护体外培养缺血再灌注损伤的大鼠皮层神经细胞的影响。方法体外培养24h大鼠大脑皮层神经细胞,随机分为正常对照组(Control)、缺血再灌注组(Ischemia-reperfusion,I/R)和bcl-2基因转染组(bcl-2)。建立缺血再灌注模型,应用脂质体将bcl-2基因转入神经细胞。流式细胞术检测各组细胞凋亡率,MTT法测定细胞活力。Western-Blot法检测各组细胞bcl-2、葡萄糖调节蛋白78(Glucose regulated protein 78,GRP78)的蛋白含量。结果缺血再灌注组细胞凋亡率较对照组明显升高,bcl-2转染后细胞凋亡率显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。I/R组细胞活力较对照组明显下降,转染组细胞活力较I/R组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。I/R组bcl-2比对照组明显表达减少,转染后细胞bcl-2蛋白高表达;I/R组细胞GRP78含量比对照组明显增多,bcl-2转染后GRP78显著下降。结论 bcl-2基因转染对缺血再灌注的鼠大脑神经元有明显保护作用,可能与其降低内质网相关性凋亡蛋白表达有关。展开更多
文摘目的研究bcl-2基因转染对保护体外培养缺血再灌注损伤的大鼠皮层神经细胞的影响。方法体外培养24h大鼠大脑皮层神经细胞,随机分为正常对照组(Control)、缺血再灌注组(Ischemia-reperfusion,I/R)和bcl-2基因转染组(bcl-2)。建立缺血再灌注模型,应用脂质体将bcl-2基因转入神经细胞。流式细胞术检测各组细胞凋亡率,MTT法测定细胞活力。Western-Blot法检测各组细胞bcl-2、葡萄糖调节蛋白78(Glucose regulated protein 78,GRP78)的蛋白含量。结果缺血再灌注组细胞凋亡率较对照组明显升高,bcl-2转染后细胞凋亡率显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。I/R组细胞活力较对照组明显下降,转染组细胞活力较I/R组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。I/R组bcl-2比对照组明显表达减少,转染后细胞bcl-2蛋白高表达;I/R组细胞GRP78含量比对照组明显增多,bcl-2转染后GRP78显著下降。结论 bcl-2基因转染对缺血再灌注的鼠大脑神经元有明显保护作用,可能与其降低内质网相关性凋亡蛋白表达有关。