实时质谱新技术分析南极磷虾油的脂质组学轮廓 被引量：7

1

作者 张燕平 王海星 +3 位作者 陈康 饶伟 崔益玮 沈清 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第9期226-231,共6页

快速蒸发离子化质谱(REIMS)是近几年发展的一种无需任何样品前处理的新型原位电离质谱。基于REIMS建立南极磷虾油脂质组学轮廓的实时检测方法。将南极磷虾冷冻干燥后采用95%乙醇提取虾油,通过加热探头(500℃)离子化,形成气溶胶由文丘里... 快速蒸发离子化质谱(REIMS)是近几年发展的一种无需任何样品前处理的新型原位电离质谱。基于REIMS建立南极磷虾油脂质组学轮廓的实时检测方法。将南极磷虾冷冻干燥后采用95%乙醇提取虾油,通过加热探头(500℃)离子化,形成气溶胶由文丘里泵氮气(2 bar)驱动并引入质谱,与端口处内设铬铝钴耐热钢A1灯丝(1.1Ω,3 V)碰撞发生二次电离。以丙二醇/亮氨酸脑啡肽混合物为辅助溶剂,经针泵注射进样器以0.1 mL/min的流量引入端口,用于清洗杂质,提高信号强度,锁定质量校正。结果显示,南极磷虾脂质分子离子峰主要出现在m/z 200~900区域范围内,并由脂肪酸和磷脂2个明显的峰簇组成。经结构鉴定和相对含量测定,共计20种脂肪酸和26种磷脂分子被检出,其中EPA(m/z 301,21.59%)和DHA(m/z 327,14.44%)为主要脂肪酸离子;[PG 36:7-H]-(m/z 763,11.67%)和[PC O-38:3-choline]-/[PE O-38:3-NH3]-(m/z 737,11.46%)为主要磷脂离子。经方法学验证,该REIMS高通量实时检测方法灵敏度和精密度均能满足南极磷虾油中脂肪酸和磷脂的脂质组学轮廓分析测试要求。REIMS法实时检测南极磷虾油脂质组学轮廓具有快速、高效的优点,相关数据能为质谱工作者提供理论基础,为海洋功能食品企业和部门提供相关依据和参考。 展开更多

关键词 快速蒸发离子化质谱(REIMS) 南极磷虾 脂质组学 高通量实时 原位电离

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IKnife-REIMS联用技术对南极犬牙鱼脂质组学轮廓检测 被引量：5

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作者 陈康 王海星 +4 位作者 张燕平 李诗言 王扬 饶伟 沈清 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第14期259-264,共6页

基于IKnife-快速蒸发离子化质谱技术对低脂鱼类南极犬牙鱼的肌肉组织进行脂质组学轮廓检测,并通过响应面分析优化系统参数。结果表明,最优参数为输出功率25 W、切割速率0.50 mm/s、切割长度1.0 cm。在最佳实验条件下共检出脂肪酸离子17... 基于IKnife-快速蒸发离子化质谱技术对低脂鱼类南极犬牙鱼的肌肉组织进行脂质组学轮廓检测,并通过响应面分析优化系统参数。结果表明,最优参数为输出功率25 W、切割速率0.50 mm/s、切割长度1.0 cm。在最佳实验条件下共检出脂肪酸离子17种,其中信号响应强度最大为m/z 327.23,相对含量达到了17.81%,经鉴定为脂肪酸(fatty acid,FA),结构为FA 22∶6,其次分别为m/z 255.23(FA 16∶0,9.81%)和m/z 281.25(FA 18∶1,9.09%);检出磷脂离子10种,质量范围为m/z 736.49~909.55,信号最强离子峰m/z 885.55经鉴定为磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol,PI)离子[PI 38∶4-H]-,相对丰度达到了19.30%,其次为磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)离子m/z 790.54([PE 40∶6-H]-,15.24%)。方法验证结果显示,目标离子的信噪比为35.4~95.3,偏差为4.17×10-6~9.78×10-6,日内精密度相对标准偏差为3.7%~5.6%,日间精密度相对标准偏差为5.9%~7.3%。本实验方法灵敏度和分辨率高、检测速度快、结果稳定,为脂质组学研究和鱼类生物信息检测提供了新的技术手段。 展开更多

关键词 iKnife 快速蒸发离子化质谱 脂质组学 南极犬牙鱼

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iKnife智能刀-快速蒸发离子化质谱实时检测空气油炸带鱼的脂质组学品质特征 被引量：5

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作者 张蒙娜 宋恭帅 +3 位作者 王海星 饶伟 王宏海 沈清 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第14期314-320,共7页

引入一种高通量、快速、实时的质谱检测技术--iKnife智能刀-快速蒸发离子化质谱(rapid evaporative ionization mass spectrometry,REIMS),将其实际应用于海洋食品中脂质的检测。在优化iKnife智能刀切割输出功率的基础上,探究不同空气... 引入一种高通量、快速、实时的质谱检测技术--iKnife智能刀-快速蒸发离子化质谱(rapid evaporative ionization mass spectrometry,REIMS),将其实际应用于海洋食品中脂质的检测。在优化iKnife智能刀切割输出功率的基础上,探究不同空气油炸温度对带鱼中脂肪酸和磷脂组成的影响。结果表明,最佳电刀输出功率20 W,该条件下特征脂质离子峰的信噪比达到最大值。带鱼经空气油炸后无需任何处理直接通过REIMS系统实时检测得到脂质组成,其中含量最高的脂肪酸为二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA),含量最多的磷脂分子形式是磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl ethanolamines,PE)和磷脂酰胆碱(phosphatidyl cholines,PC)。总体来说,脂质分子的饱和度随着油炸温度的升高而提高,DHA相对含量由38.91%降低至30.74%。经主成分分析得到第1主成分和第2主成分的累计贡献率为78.6%,不同样品间能明显地区分开。选取特征离子对iKnife-REIMS检测方法进行验证,结果显示此方法精密度和重复性较好,检测得到的脂质组成数据有效可靠。 展开更多

关键词 iKnife智能刀-快速蒸发离子化质谱 空气油炸温度 脂肪酸 磷脂 带鱼

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基于iKnife智能手术刀质谱技术金枪鱼内脏脂质组学研究 被引量：2

4

作者 王海星 张燕平 +3 位作者 李诗言 陈康 饶伟 沈清 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期113-119,共7页

本研究利用iKnife智能手术刀质谱建立了一种金枪鱼内脏组织脂质组学检测新技术,用于对金枪鱼内脏营养价值进行深入研究。iKnife智能手术刀切割组织样品产生含有大量含磷脂离子的气溶胶,经专门的质谱接口装置直接引入质谱进行实时检测。... 本研究利用iKnife智能手术刀质谱建立了一种金枪鱼内脏组织脂质组学检测新技术,用于对金枪鱼内脏营养价值进行深入研究。iKnife智能手术刀切割组织样品产生含有大量含磷脂离子的气溶胶,经专门的质谱接口装置直接引入质谱进行实时检测。结果显示,金枪鱼内脏中共鉴定出磷脂离子峰41种,质量范围m/z 699.5~911.6,其中信号最强离子峰m/z 790.5经鉴定为[PE 40:6-H]^-(相对丰度10.03%),其次为m/z 745.5([PA 40:7-H]^-,相对丰度9.02%)。该方法选择性强、精密度高、灵敏度好。本研究结果为质谱相关技术发展提供了参考,为金枪鱼副产物中脂质检测与综合利用提供了依据。 展开更多

关键词 智能手术刀(iKnife) 快速蒸发电离质谱(REIMS) 金枪鱼副产物 脂质组学 高通量实时

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基于快速蒸发离子化质谱实时检测空气油炸鲳鱼的脂质组学轮廓 被引量：2

5

作者 张蒙娜 薛静 +3 位作者 宋恭帅 王海星 王宏海 沈清 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第5期502-510,I0005,共10页

快速蒸发离子化质谱(rapid evaporative ionization mass spectrometry,REIMS)是一种无需样品预处理的新型质谱技术,通过手持智能手术刀切割样品采集数据从而获得脂质组学轮廓。本研究采用REIMS技术和主成分分析(principal component an... 快速蒸发离子化质谱(rapid evaporative ionization mass spectrometry,REIMS)是一种无需样品预处理的新型质谱技术,通过手持智能手术刀切割样品采集数据从而获得脂质组学轮廓。本研究采用REIMS技术和主成分分析(principal component analysis,PCA)、隐结构正交投影(orthogonal projection to latent structure,OPLS)等数理统计方法实时监测鲳鱼在空气油炸过程中脂质组学轮廓变化,并探究不同空气油炸温度对鲳鱼肌肉组织脂质组成的影响。通过单因素条件优化得到适宜的REIMS系统参数,电刀输出功率20 W、电刀切割功率1 mm/s、辅助溶剂流速100μL/min,从而获得稳定可靠的质谱轮廓图。在PCA分析的基础上进行OPLS分析,得到10个重要的特征离子(VIP>1),其中PE(O-16∶1/22∶6)只在原料中检测到,为4.61%;此外,PE(22∶5/22∶6)在10个磷脂离子中的不饱和度最高,其相对含量随油炸温度的升高而降低,同样可见于PA(18∶1/22∶6)和PI(18∶0/22∶6),说明磷脂的饱和度有随油炸温度升高而上升的趋势。经方法验证显示,REIMS检测离子的信噪比范围为49.58~205.30,日内和日间精密度的相对标准偏差为3.10%~7.28%,灵敏度和精密度均较高,因此,该方法将成为脂质组学研究过程中一种简单、高效、准确的新型技术手段。 展开更多

关键词 快速蒸发离子化质谱(REIMS) 脂质组学 主成分分析(PCA) 隐结构正交投影(OPLS) 空气油炸

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布比卡因脂质体用于髋关节囊周围神经阻滞对老年髋关节置换术后镇痛的有效性及安全性分析

6

作者 南洋 王阳阳 +5 位作者 蒋学斌 白玥 励建琳 罗婧予 张旭彤 李军 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期180-185,共6页

目的探讨布比卡因脂质体行髋关节囊周围神经阻滞用于老年髋关节置换术后镇痛的有效性和安全性。方法选取2023年5至7月在温州医科大学附属第二医院行全髋关节置换术老年患者42例,美国麻醉医师协会(ASA)分级Ⅰ~Ⅲ级,男19例,女23例,年龄(68... 目的探讨布比卡因脂质体行髋关节囊周围神经阻滞用于老年髋关节置换术后镇痛的有效性和安全性。方法选取2023年5至7月在温州医科大学附属第二医院行全髋关节置换术老年患者42例,美国麻醉医师协会(ASA)分级Ⅰ~Ⅲ级,男19例,女23例,年龄(68.8±6.3)岁。按随机数字表法分为布比卡因脂质体组(观察组)和盐酸左布比卡因组(对照组),每组21例,均采用腰麻联合髋关节囊周围神经阻滞的麻醉方法。行髋关节囊周围神经阻滞时,观察组注入布比卡因脂质体10 ml(133 mg)+生理盐水5 ml,对照组注入盐酸左布比卡因10 ml(75 mg)+生理盐水5 ml。主要观察指标为患者术前及术后6、12、24、36、48、60、72 h静止与运动时视觉模拟量表(VAS)评分,镇痛泵中舒芬太尼消耗量、镇痛泵按压次数及病房额外帕瑞昔布钠使用率。次要观察指标为下肢肌力变化、患者住院时间及不良反应发生情况。结果两组患者术前及术后6 h时静息与运动VAS评分差异均无统计学意义(均P>0.05);而在术后12、24、36、48、60、72 h时,观察组患者静息与运动VAS评分均低于对照组(均P<0.05);各组在术后6、12、24、36、48、60、72 h的静息与运动VAS评分均低于术前(均P<0.05)。观察组术后12、24、36、48 h时镇痛泵舒芬太尼消耗量及帕瑞昔布钠用量均低于对照组(均P<0.05),48 h内镇痛泵总按压次数、有效按压次数及无效按压次数均低于对照组(均P<0.05)。所有患者在术后12 h时下肢肌力均能对抗重力活动;术后48 h内观察组恶心发生率为9.5%(2/21),低于对照组的42.9%(9/21,P=0.014);所有患者无术后呕吐发生。观察组住院时间为(9.3±2.2)d,对照组为(8.9±1.9)d,差异无统计学意义(P=0.500)。结论与盐酸左布比卡因相比,布比卡因脂质体用于髋关节囊周围神经阻滞可为老年髋关节置换术患者提供72 h的镇痛效应,减少术后阿片类药物及其他镇痛药物用量,降低术后 展开更多

关键词 髋关节 麻醉 镇痛 布比卡因脂质体 左布比卡因

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邻苯二甲酸单乙基己基酯对神经干细胞增殖和迁移的作用 被引量：3

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作者 黄意湘 马晓晓 +6 位作者 郝欣蕊 刘劲 廖双菊 梅虹霞 苏颖 郑丽丹 林函 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期545-552,共8页

目的探讨邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)对原代神经干细胞(NSC)和NE-4C小鼠细胞增殖和迁移的影响。方法原代NSC来源于孕15 d(E15)远交群SD胎大鼠脑皮质;NE-4C细胞为小鼠NSC。MEHP 0,1,10,100和1000μmol·L^(-1)处理72 h后,CCK-8法... 目的探讨邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)对原代神经干细胞(NSC)和NE-4C小鼠细胞增殖和迁移的影响。方法原代NSC来源于孕15 d(E15)远交群SD胎大鼠脑皮质;NE-4C细胞为小鼠NSC。MEHP 0,1,10,100和1000μmol·L^(-1)处理72 h后,CCK-8法检测细胞活力;5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)法检测细胞增殖能力;Transwell小室检测细胞迁移;Western蛋白印迹法检测糖皮质激素受体(GR)、Y性别决定区框2(Sox2)、信号传导与转录激活因子3(Stat3)等基因及蛋白的表达。结果 CCK-8结果显示,与正常对照组相比,MEHP1000μmol·L^(-1)作用72 h后,NE-4C和NSC细胞活力明显减弱,分别为正常对照组的70.3%和40.0%。Ed U结果显示,与正常对照组相比,MEHP 100μmol·L^(-1)组细胞增殖率降低,分别为正常对照组的74.8%和12.0%(P<0.05)。Transwell实验发现,MEHP 100μmol·L^(-1)处理72 h后,NE-4C细胞的迁移率降低至(63.4±2.0)%(P<0.05)。MEHP 100μmol·L^(-1)组NE-4C中与增殖和迁移相关的基因GR,Stat3和Sox2的表达下调,分别为正常对照组的49.8%,26.0%和14.0%(P<0.05);在NSC中的相应基因也下调,分别为正常对照组的10.0%,14.0%和15.3%;在NE-4C中与增殖及迁移相关的蛋白GR,GRβ,p-Stat3和Sox2的表达下调,相对表达量分别为0.92±0.17,0.87±0.35,0.62±0.24和0.81±0.22(P<0.05);在NSC中相应蛋白表达也下调,相对表达量分别为0.82±0.20,0.56±0.12,0.53±0.20和0.84±0.36(P<0.05)。结论大剂量MEHP可抑制NSC的增殖和迁移能力,其机制可能是通过GR介导的Stat3及Sox2的作用实现。 展开更多

关键词 邻苯二甲酸单乙基己基酯 神经干细胞 NE-4C 细胞增殖 细胞迁移 糖皮质激素受体

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七氟醚和异氟醚对大鼠大脑皮质神经干细胞增殖的影响 被引量：2

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作者 林函 刘劲 +6 位作者 李纯 王佩芳 高雅静 马晓晓 王春满 梅虹霞 连庆泉 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1306-1309,共4页

目的评价七氟醚和异氟醚对大鼠大脑皮质神经干细胞增殖的影响。方法取孕15d的SD大鼠，分离皮层进行神经干细胞原代培养，以（1～2）×10^6个／ml的细胞密度稳定传代到第3代后，接种至多聚赖氨酸包被的6孔培养板中。采用随机数字表... 目的评价七氟醚和异氟醚对大鼠大脑皮质神经干细胞增殖的影响。方法取孕15d的SD大鼠，分离皮层进行神经干细胞原代培养，以（1～2）×10^6个／ml的细胞密度稳定传代到第3代后，接种至多聚赖氨酸包被的6孔培养板中。采用随机数字表法，将其分为3组（n=24）：对照组（C组）、七氟醚组（S组）和异氟醚组（I组）。将培养板细胞置于暴露箱，s组通入4．9％七氟醚和5％CO2-95％O2的混合气体；I组通入2．8％异氟醚和5％CO2．95％O2的混合气体；C组通人5％CO2．95％02的混合气体。暴露6h后，取出培养板并于37℃细胞培养箱中继续培养2h。采用免疫细胞化学法和酶标法测定细胞增殖情况，采用实时荧光定量PCR法检测增殖相关基因：信号转导和转录激活子3（STAT3）、Sox2、Notchl和P21的mRNA表达水平。采用Westernblot法测定总STAT3蛋白和磷酸化STAT3（p-STAT3）蛋白的表达水平。结果与c组比较，s组和I组神经干细胞增殖率降低，p-STAT3蛋白表达下调，I组STAT3mRNA表达下调（P〈0．05），s组STAT3mRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05）。3组间Sox2mRNA、NotchlmRNA、P21mRNA及总STAT3蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论异氟醚和七氟醚均可抑制大鼠大脑皮质神经干细胞的增殖，其机制可能为七氟醚与抑制STAT3蛋白激活有关，而异氟醚不仅抑制了STAT3蛋白的激活，而且抑制了STAT3基因的转录。 展开更多

关键词 异氟醚 干细胞 细胞增殖 七氟醚

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内轴膝置换治疗膝骨关节炎的满意度分析及初步疗效 被引量：1

9

作者 陈雪燕 李振兴 +5 位作者 李莉 陈成旺 薛恩兴 郑文娴 张宇 樊沛 《中华关节外科杂志（电子版）》 CAS CSCD 2019年第4期493-497,共5页

分析内轴膝假体置换术后疗效,评估患者满意度。方法对温州医科大学附属第二医院关节外科单一术者2016年8月至2017年10月期间使用内轴膝假体进行膝关节置换的患者进行至少1年随访,对患者的满意度及不满意原因进行调查和分析,并调查患者... 分析内轴膝假体置换术后疗效,评估患者满意度。方法对温州医科大学附属第二医院关节外科单一术者2016年8月至2017年10月期间使用内轴膝假体进行膝关节置换的患者进行至少1年随访,对患者的满意度及不满意原因进行调查和分析,并调查患者膝关节疼痛程度及关节活动度。结果52例患者纳入此研究,手术时平均年龄(73±6)岁,随访时间(13.9±1.4)个月。内轴膝假体总体满意度达到90.38%,其中不满意的原因最主要是持续性膝关节疼痛,内轴膝假体置换后患者疼痛数字评分中位数M为0,四分位数间距为0,膝关节活动度为(93±12)°。结论内轴膝置换治疗终末期膝骨性关节炎疗效确切,患者满意度高,术后膝关节持续性疼痛仍然是患者不满意最主要的原因。 展开更多

关键词 关节成形术 置换 膝 病人满意度 假体和植入物

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基底外侧杏仁核至伏隔核环路在大鼠丙泊酚依赖中的作用

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作者 黄炳武 陈依尔 +3 位作者 崔燕华 连庆泉 苏颖 林函 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2022年第6期418-425,共8页

目的探讨基底外侧杏仁核(BLA)至伏隔核(NAc)环路在大鼠丙泊酚自身给药行为中的作用及相关分子机制。方法①通过丙泊酚自身给药行为训练将大鼠分为丙泊酚依赖大鼠和丙泊酚非依赖大鼠,Western印迹法检测2种大鼠NAc内谷氨酸能α-氨基-3-羟... 目的探讨基底外侧杏仁核(BLA)至伏隔核(NAc)环路在大鼠丙泊酚自身给药行为中的作用及相关分子机制。方法①通过丙泊酚自身给药行为训练将大鼠分为丙泊酚依赖大鼠和丙泊酚非依赖大鼠,Western印迹法检测2种大鼠NAc内谷氨酸能α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异叶恶唑丙酸受体(AMPAR)的亚基GluA1和GluA2蛋白表达水平。②24只丙泊酚依赖大鼠随机分为对照组、NBQX(AMPAR拮抗剂)0.25,0.5和1μg组,在连续14 d丙泊酚自身给药行为训练后,第15天测试前30 min于NAc内注射生理盐水或NBQX,观察NBQX对大鼠丙泊酚自身给药行为的影响。③24只丙泊酚依赖大鼠随机分为增强型黄绿色荧光蛋白(eYFP)组、eYFP+NBQX组、光敏感通道蛋白(ChR2)-eYFP组和ChR2-eYFP+NBQX组。其中eYFP组和eYFP+NBQX组在BLA区注射腺相关病毒载体(AAV)-钙调蛋白依赖激酶Ⅱα(CaMKⅡα)-eYFP,ChR2-eYFP组和ChR2-eYFP+NBQX组在BLA区注射AAV-CaMKⅡα-ChR2-eYFP。在病毒表达4周后,进行连续14 d丙泊酚自身给药行为训练,于第15天测试前30 min,eYFP组和ChR2-eYFP组在NAc区给予生理盐水,而eYFP+NBQX组和ChR2-eYFP+NBQX组在NAc区给予NBQX 0.5μg,并在测试期间蓝光刺激BLA-NAc环路,观察兴奋BLA-NAc环路对大鼠丙泊酚觅药行为的影响。结果①与丙泊酚非依赖组相比,丙泊酚依赖组大鼠有效鼻触次数明显增加(P<0.05)。Western印迹结果显示,丙泊酚依赖大鼠较丙泊酚非依赖大鼠NAc GluA1和GluA2蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。②与对照组相比,NBQX 0.5和1μg组大鼠有效鼻触次数显著减少(P<0.01)。③与eYFP组相比,ChR2-eYFP组大鼠有效鼻触次数显著增加(P<0.01),与eYFP+NBQX组相比,ChR2-eYFP+NBQX组大鼠有效鼻触次数显著增加(P<0.01)。结论兴奋BLA-NAc环路可增加大鼠丙泊酚自身给药行为,该作用可能由NAc区AMPAR介导。 展开更多

关键词 基底外侧杏仁核 伏隔核 NBQX 丙泊酚 自身给药

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海马神经元腺苷A1受体在异氟醚麻醉诱发老龄小鼠认知功能障碍中的作用 被引量：1

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作者 林函 王春满 +4 位作者 左春龙 马晓晓 黄意湘 刘劲 连庆泉 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期690-693,共4页

目的 评价海马神经元腺苷A1受体在异氟醚麻醉诱发老龄小鼠认知功能障碍中的作用.方法 腺苷A1受体基因敲除纯合子小鼠（基因敲除小鼠）和野生型小鼠各16只,雄性,18～ 22月龄,体重27～ 32 g,采用随机数字表法,将两种小鼠各分为2组（n=8）... 目的 评价海马神经元腺苷A1受体在异氟醚麻醉诱发老龄小鼠认知功能障碍中的作用.方法 腺苷A1受体基因敲除纯合子小鼠（基因敲除小鼠）和野生型小鼠各16只,雄性,18～ 22月龄,体重27～ 32 g,采用随机数字表法,将两种小鼠各分为2组（n=8）：对照组（C组）和异氟醚麻醉组（Ⅰ组）.Ⅰ组吸入1.4％异氟醚2h,载气为纯氧,C组仅吸入纯氧.麻醉后24 h进行Morris水迷宫实验,随后处死小鼠,采用免疫组化法测定海马组织β淀粉样蛋白1-42（Aβ1-42）斑块数量,采用Western blot法检测磷酸化tau（p-tau）蛋白和含2B亚基的NMDA受体（NR2B）的表达水平.结果 与野生型小鼠的C组比较,野生型小鼠的Ⅰ组逃避潜伏期延长,海马组织Aβ1-42斑块数量增加,p-tau蛋白表达上调,NR2B表达下调（P＜0.05）;与野生型小鼠的Ⅰ组比较,基因敲除小鼠的Ⅰ组逃避潜伏期缩短,海马组织Aβ1-42斑块数量减少,p-tau蛋白表达下调,NR2B表达上调（P＜0.05）;基因敲除小鼠的Ⅰ组和C组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 海马神经元腺苷A1受体介导异氟醚麻醉诱发老龄小鼠认知功能障碍,其机制与促进Aβ沉积、tau蛋白磷酸化及抑制NR2B活性有关. 展开更多

关键词 受体 腺苷A1 海马 神经元 异氟醚 认知障碍 老年人

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右美托咪定减轻皮质酮抑制神经干细胞的增殖作用及机制

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作者 潘一钊 马君梅 +3 位作者 黄坚坚 胡志妍 梅虹霞 林函 《温州医科大学学报》 CAS 2020年第2期92-97,共6页

目的:探讨右美托咪定(DEX)减轻皮质酮(CORT)抑制神经干细胞(NSCs)的增殖作用及其可能的作用机制。方法:取孕15 d SD大鼠,分离胎鼠大脑皮质培养原代NSCs,进行NSCs标志蛋白神经上皮干细胞蛋白(Nestin)和胚胎干细胞关键蛋白(SOX2)染色鉴定;... 目的:探讨右美托咪定(DEX)减轻皮质酮(CORT)抑制神经干细胞(NSCs)的增殖作用及其可能的作用机制。方法:取孕15 d SD大鼠,分离胎鼠大脑皮质培养原代NSCs,进行NSCs标志蛋白神经上皮干细胞蛋白(Nestin)和胚胎干细胞关键蛋白(SOX2)染色鉴定;RT-PCR法检测肾上腺α-2受体各亚型α-2A受体、α-2B受体及α-2C受体在NSCs上的表达;将NSCs分为Control组、DMSO组、CORT组(CORT 1μmol/L孵育24 h)和DEX组(DEX 0.01、0.1、1μmol/L预处理1 h后,再加入CORT继续孵育24 h)。LDH法检测NSCs的细胞毒性;EdU法检测细胞增殖能力;Western blot检测NSCs GSK-3β/β-catenin通路GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin和Cyclin D1表达水平。结果:分离的原代细胞经Nestin蛋白和SOX2蛋白染色鉴定NSCs的纯度超过97%;RTPCR结果显示肾上腺α-2受体的3种亚型在NSCs上均有表达;LDH法显示各组之间LDH的释放量差异无统计学意义。EdU法显示与Control组比,CORT组的NSCs增殖能力显著被抑制(P<0.05);与CORT组相比,当DEX剂量增加至1μmol/L时,NSCs的增殖能力有所恢复(P<0.05)。Western blot结果表明与Control组、DMSO组比,CORT组p-GSK-3β、β-catenin、Cyclin D1蛋白的相对表达量显著下降(P<0.05),与CORT组比,1μmol/L DEX预处理后,p-GSK-3β、β-catenin、Cyclin D1蛋白的相对表达量有所提升(P<0.05),Total GSK-3β蛋白在各组间的相对表达量没有明显变化;PI3K磷酸化抑制剂LY294002拮抗DEX对NSCs增殖的保护作用(P<0.05)。结论:DEX可以减轻CORT抑制NSCs的增殖作用,其机制与GSK-3β/β-catenin信号通路有关。 展开更多

关键词 皮质酮 右美托咪定 神经干细胞 细胞增殖

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BVT-14225通过抑制11β-羟基类固醇脱氢酶1还原活性促进神经干细胞增殖和迁移

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作者 马君梅 南海函 +9 位作者 胡志妍 陈依尔 崔燕华 陈星驰 李莉 苏颖 梅虹霞 缪项慧 张旭彤 林函 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2020年第4期278-288,共11页

目的探讨BVT-14225(BVT)通过抑制11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)的还原活性对神经干细胞(NSC)增殖、分化和迁移的影响。方法取孕15 d SD胎大鼠的大脑皮质,分离培养原代NSC,采用免疫荧光染色法对NSC标志物巢蛋白和性别决定基因相关... 目的探讨BVT-14225(BVT)通过抑制11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)的还原活性对神经干细胞(NSC)增殖、分化和迁移的影响。方法取孕15 d SD胎大鼠的大脑皮质,分离培养原代NSC,采用免疫荧光染色法对NSC标志物巢蛋白和性别决定基因相关转录因子2(Sox2)进行染色,鉴定原代细胞;逆转录聚合酶链反应及核酸凝胶电泳法检测11β-HSD1 mRNA在NSC上的表达。细胞随机分为5组:细胞对照组(培养48 h)、溶剂对照组(0.1%DMSO孵育48 h)、DHC模型组(DHC 10.0μmol·L^-1处理48 h)、BVT对照组(BVT 10.0μmol·L^-1处理48 h)和BVT干预组(BVT 10μmol·L^-1处理1 h后再给予DHC10.0μmol·L^-1,继续处理48 h)。5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)细胞增殖试剂盒检测NSC的增殖能力;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞毒性;超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)检测11β-HSD1酶的还原活性;Western印迹法检测11β-HSD1蛋白表达水平;胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元核抗原(NeuN)抗体免疫荧光染色检测NSC的分化能力;划痕实验检测NSC的迁移能力。结果巢蛋白和Sox2免疫染色鉴定原代培养细胞为NSC,核酸凝胶电泳条带图证明11β-HSD1 mRNA在NSC定性表达。LDH释放实验结果显示,DHC 10.0μmol·L^-1和BVT 10.0μmol·L^-1对NSC均无毒性作用。UPLC-MS实验结果显示,BVT 10.0μmol·L^-1能显著降低11β-HSD1的还原活性(P<0.01)。Western印迹结果显示,DHC 10.0μmol·L^-1和BVT 10.0μmol·L^-1均不改变11β-HSD1蛋白表达水平。EdU实验结果显示,DHC 10.0μmol·L^-1可抑制NSC增殖(P<0.01),但BVT 10.0μmol·L^-1预处理可显著缓解DHC 10.0μmol·L^-1对NSC增殖的抑制(P<0.05)。GFAP和NeuN的免疫荧光染色实验结果表明,DHC 10.0μmol·L^-1和BVT 10.0μmol·L^-1均不影响NSC分化。划痕实验结果显示,DHC 10.0μmol·L^-1不影响NSC的迁移,但BVT 10.0μmol·L^-1预处理可显著促进NSC迁移(P<0.05)。结论糖皮质激素浓度显著升高时,BVT可通过抑制NSC 11β-HSD1的还原� 展开更多

关键词 BVT-14225 神经干细胞 11Β-羟基类固醇脱氢酶1 糖皮质激素

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伤害可塑性疼痛的研究进展及其在肌肉骨骼系统中的研究现状

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作者 高祥 黄锐 +1 位作者 李莉 樊沛 《中华疼痛学杂志》 2024年第1期135-141,共7页

伤害可塑性疼痛作为慢性疼痛的一种新类型,为我们提供了研究和治疗肌肉骨骼系统慢性疼痛的新方向。本综述系统回顾了伤害可塑性疼痛的定义、流行病学、机制、诊断、治疗等方面进展及其在肌肉骨骼系统中的研究现状,以期为从伤害可塑性疼... 伤害可塑性疼痛作为慢性疼痛的一种新类型,为我们提供了研究和治疗肌肉骨骼系统慢性疼痛的新方向。本综述系统回顾了伤害可塑性疼痛的定义、流行病学、机制、诊断、治疗等方面进展及其在肌肉骨骼系统中的研究现状,以期为从伤害可塑性疼痛的角度指导肌肉骨骼系统的治疗提供基础。 展开更多

关键词 慢性疼痛 伤害可塑性疼痛 肌肉骨骼系统

原文传递

α-突触核蛋白在红核中异常沉积对运动和痛觉的影响

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作者 宋越 苏颖 +2 位作者 何艳 陈江帆 郭卫 《温州医科大学学报》 CAS 2024年第4期259-265,共7页

目的:在红核(RN)中利用病毒表达α-突触核蛋白(α-Syn)探讨RN中α-Syn异常沉积对运动和感觉障碍的影响。方法:将C57BL/6J小鼠随机分成两组:实验组(在RN注射表达α-Syn的病毒)和对照组(在RN注射对照病毒)。采用旷场实验评估小鼠的运动能... 目的:在红核(RN)中利用病毒表达α-突触核蛋白(α-Syn)探讨RN中α-Syn异常沉积对运动和感觉障碍的影响。方法:将C57BL/6J小鼠随机分成两组:实验组(在RN注射表达α-Syn的病毒)和对照组(在RN注射对照病毒)。采用旷场实验评估小鼠的运动能力,转棒测试评估小鼠的平衡协调能力,爬杆实验评估小鼠的运动控制功能,铁丝悬挂实验评估小鼠的前肢肌肉力量和运动协调能力,握力测量评估小鼠的神经肌肉力量,机械刺激和热刺激测试评估小鼠的痛阈。结果:与对照组相比,实验组小鼠α-Syn异常沉积在RN,并显著损毁该区域神经元;实验组小鼠在旷场中的运动距离(P<0.001)和运动时间(P<0.001)显著增加,不动时间明显降低(P<0.001),转棒测试中掉落潜伏期明显减少(P<0.05),爬杆实验中转身到达底部的时间增加(P<0.05),肌力实验中四肢肌力和体质量归一化的四肢肌力增加(P<0.05),热缩足反射潜伏期显著降低(P<0.05)。结论:α-Syn在RN异常沉积促进小鼠的自主运动,降低小鼠的平衡协调能力和运动控制功能,增强小鼠的四肢肌肉力量,对热痛刺激较为敏感。 展开更多

关键词 帕金森病 Α-突触核蛋白 红核 运动功能 痛觉

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不同时机超声引导腹直肌鞘阻滞对术后镇痛的影响

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作者 付品国 李兴旺 +1 位作者 杨建军 黄梦朦 《中国现代医生》 2024年第15期59-62,78,共5页

目的探讨单孔腹腔镜妇科手术超声引导腹直肌鞘阻滞的最佳时机。方法选取2021年8月至2022年1月温州医科大学附属第二医院妇科病房63例择期行单孔腹腔镜下妇科良性肿物切除手术的患者为研究对象,根据随机数字表法将其分为E组(32例)和O组(3... 目的探讨单孔腹腔镜妇科手术超声引导腹直肌鞘阻滞的最佳时机。方法选取2021年8月至2022年1月温州医科大学附属第二医院妇科病房63例择期行单孔腹腔镜下妇科良性肿物切除手术的患者为研究对象,根据随机数字表法将其分为E组(32例)和O组(31例),剔除3例,最终纳入60例,每组各30例。E组患者采用术前超声引导腹直肌鞘阻滞,O组患者采用术后超声引导腹直肌鞘阻滞。比较两组患者拔管后即刻(T_(1))、术后12h(T_(2))、术后24h(T_(3))静息、活动状态的数字疼痛量表(numerical rating scale,NRS)评分;比较两组患者术中切皮前后的平均动脉压及心率;比较两组患者术中瑞芬太尼使用量、术后羟考酮使用量、术后镇痛补救率;比较两组患者入室时长及手术时长;记录两组患者神经阻滞并发症的发生情况。结果整体分析发现:两组患者静息NRS评分时间点比较及交互作用差异均有统计学意义(P<0.05),活动NRS评分时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。进一步两两比较,组内比较:O组患者T_(2)、T_(3)时点静息NRS和活动NRS评分均显著低于T_(1)时点(P<0.05);E组患者T_(3)时点静息NRS评分显著低于T_(1)时点,T_(2)、T_(3)时点活动NRS评分均显著低于T_(1)时点(P<0.05)。组间比较:E组患者T_(1)时点静息NRS和活动NRS评分均显著低于O组(P<0.05)。切皮后,O组患者的平均动脉压显著高于本组切皮前,心率显著快于本组切皮前(P<0.05)。两组均无腹腔穿刺、穿刺点感染、局部麻醉药中毒等情况发生。结论单孔腹腔镜妇科手术中,术前超声引导下腹直肌鞘神经阻滞,在术后早期可为患者提供更佳的镇痛效果,且患者术中切皮前后心率和平均动脉压变化更小,值得推荐。 展开更多

关键词 单孔腹腔镜手术 腹直肌鞘阻滞 超前镇痛 术后镇痛

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孕酮调节腺苷信号通路缓解大鼠神经病理性疼痛 被引量：3

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作者 苏颖 胡志妍 +4 位作者 贾改丽 李莉 俞陈陈 朱雅冰 谢红 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期256-264,共9页

目的:探索孕酮通过调节生殖内分泌靶器官睾丸和疼痛相关脑区终纹床核(bed nuclei of the stria terminals, BST)腺苷信号通路缓解坐骨神经结扎损伤(chronic constriction injury, CCI)模型大鼠神经病理性疼痛(neuropathic pain, NP)的... 目的:探索孕酮通过调节生殖内分泌靶器官睾丸和疼痛相关脑区终纹床核(bed nuclei of the stria terminals, BST)腺苷信号通路缓解坐骨神经结扎损伤(chronic constriction injury, CCI)模型大鼠神经病理性疼痛(neuropathic pain, NP)的机制。方法:雄性SD大鼠32只,随机分为4组(每组8只):假手术组、模型组、腺苷A1受体(A1R)拮抗剂组(DPCPX, 2 mg·kg-1)和孕酮组(PROG,12 mg·kg-1)。结扎后第14天开始各组连续14天分别给予溶剂、DPCPX或孕酮干预。进行L4-5背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)和脊髓背角(spinal dorsal horn, SDH) 5’-核苷酸酶(ecto-5’-nucleotidase, CD73)免疫组化染色,并检测大鼠血清睾酮含量以及DRG、SDH、睾丸和BST的CD73或A1R蛋白表达变化。结果:与假手术组相比,模型组血清睾酮、DRG和SDH的CD73阳性细胞数以及DRG、SDH、睾丸和BST的A1R蛋白,显著下降或减少(P <0.05)。与模型组相比,PROG组和DPCPX组血清睾酮含量都有回升(P <0.05),但PROG组回升更显著(P <0.05);孕酮组DRG和SDH的CD73阳性细胞和A1R蛋白显著增多(P <0.05),但DPCPX抑制这些改变(P <0.05);孕酮组睾丸和BST的CD73蛋白和A1R蛋白均显著升高(P<0.05)。与孕酮组相比,DPCPX对睾丸和BST的CD73蛋白表达的抑制作用无统计学意义,但显著抑制了A1R蛋白水平恢复(P <0.05)。结论:孕酮通过调节DRG、SDH与生殖内分泌靶器官睾丸和疼痛相关脑区BST腺苷信号通路的上游信号CD73和下游信号A1R,缓解了大鼠NP。 展开更多

关键词 神经病理性疼痛 坐骨神经结扎损伤 5’-核苷酸酶 腺苷A1受体 生殖内分泌 终纹床核

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