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CRISPR/Cas系统在核酸检测中的应用和挑战
1
作者 张钧 张路 孔莹莹 《浙江医学》 CAS 2024年第3期225-233,250,共10页
成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关基因(Cas)系统是古菌和细菌适应性免疫系统,最初被发现用来进行基因编辑,近年其特异识别和切割特性以及可编程性使其在核酸和非核酸靶标检测中崭露头角。目前基于CRISPR/Cas系统的核... 成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关基因(Cas)系统是古菌和细菌适应性免疫系统,最初被发现用来进行基因编辑,近年其特异识别和切割特性以及可编程性使其在核酸和非核酸靶标检测中崭露头角。目前基于CRISPR/Cas系统的核酸检测系统主要与核酸扩增技术如PCR、链置换扩增(SDA)、滚环扩增(RCA)和EXPAR等恒温扩增技术结合,以提高灵敏度;多项研究也在尝试开发基于CRISPR/Cas的无预扩增核酸检测系统;另外也有研究尝试通过生物祖体(包括适体、DNAzymes和抗原-抗体反应)特异性识别靶物质实现非核酸信号转换为核酸信号,实现基于CRISPR/Cas的蛋白质、小分子、细胞等非核酸物质的检测。但仍存在一些挑战,其中目标中痕量原始浓度的信号转换和放大是分析系统的关键挑战;其他挑战包括CRISPR/Cas存在一定背景活性,CRISPR RNA和单链DNA/单链RNA信号报告序列有降解风险等。随着技术的逐渐成熟,CRISPR/Cas系统将在生物靶标检测中发挥更大作用。本文就CRISPR/Cas系统在核酸检测这一领域的最新发展方向作一述评。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas系统 检测 诊断 核酸
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尼克酰胺-N-甲基转移酶在多种肿瘤组织中的表达及其在甲状腺乳头状癌中的预后价值
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作者 刘佳 王燕忠 +2 位作者 于飞 王冰洁 张钧 《肿瘤研究与临床》 CAS 2023年第12期887-893,共7页
目的探讨尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)在多种肿瘤组织中的表达及其在甲状腺乳头状癌中的预后价值。方法收集2016年1月至2021年12月浙江大学医学院附属邵逸夫医院和浙江中医药大学附属第三医院168例结直肠癌、75例胃癌、178例肺癌、15例... 目的探讨尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)在多种肿瘤组织中的表达及其在甲状腺乳头状癌中的预后价值。方法收集2016年1月至2021年12月浙江大学医学院附属邵逸夫医院和浙江中医药大学附属第三医院168例结直肠癌、75例胃癌、178例肺癌、15例肝癌、60例甲状腺癌、7例前列腺癌、74例乳腺癌、14例肾癌的手术切除组织石蜡样本,其中58例甲状腺乳头状癌及另外19例甲状腺炎组织样本收集时间为2016年1月至12月。制备免疫组织化学试剂盒,并进行性能测试。选择胃癌、结直肠癌、肺癌、甲状腺癌、前列腺癌、乳腺癌、肾癌组织标本及癌旁组织标本(距肿瘤边缘3 cm)和正常组织标本(距癌旁组织边缘5 cm以上)。采用免疫组织化学试剂盒检测正常组织标本、不同肿瘤组织及其癌旁组织中NNMT蛋白的表达;使用X-tile软件结合甲状腺乳头状癌肿瘤组织和癌旁组织NNMT诊断肿瘤的受试者工作特征曲线,明确NNMT诊断肿瘤的最佳临界值为41.5,NNMT蛋白低表达为<41.5,高表达为≥41.5。比较不同临床病理特征甲状腺乳头状癌患者的NNMT蛋白表达情况;采用Kaplan-Meier法分析甲状腺乳头状癌患者的总生存;采用Cox比例风险模型对总生存的影响因素进行多因素分析。结果制备的免疫组织化学试剂盒有效期至少为12个月,具有良好的批内、批间重复性及良好的稳定性和特异性。NNMT蛋白在结直肠组织、肺组织、甲状腺组织、前列腺组织、乳腺组织、肾组织以及胃组织中均不表达或偶见低表达。NNMT蛋白在结直肠癌、胃癌、乳腺癌、肾癌、甲状腺癌、肺癌、前列腺癌组织中均高表达;在相应的癌旁组织中均低表达。甲状腺炎组织、甲状腺乳头状癌组织以及癌旁组织中NNMT蛋白高表达率分别为15.79%(3/19)、68.97%(40/58)、31.03%(18/58),甲状腺乳头状癌组织NNMT蛋白高表达率高于甲状腺炎组织和癌旁组织。甲状腺� 展开更多
关键词 乳头状甲状腺癌 免疫组织化学 尼克酰胺-N-甲基转移酶 预后
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Morphogo骨髓细胞形态分析系统对正常、感染及多发性骨髓瘤骨髓涂片辅助诊断的效率评价 被引量：3
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作者 齐超 钟玉虹 +5 位作者 王小粉 付鑫焱 乔赛 金红 杨肃文 张钧 《临床检验杂志》 CAS 2022年第7期551-553,共3页
目的观察Morphogo骨髓细胞形态分析系统在正常、感染及多发性骨髓瘤骨髓涂片辅助诊断的效率。方法收集正常、感染和多发性骨髓瘤骨髓涂片各30例,采用人工显微镜检查和仪器预分类、人工复核的方式进行分析与诊断,通过比对人、机总耗时来... 目的观察Morphogo骨髓细胞形态分析系统在正常、感染及多发性骨髓瘤骨髓涂片辅助诊断的效率。方法收集正常、感染和多发性骨髓瘤骨髓涂片各30例,采用人工显微镜检查和仪器预分类、人工复核的方式进行分析与诊断,通过比对人、机总耗时来评估仪器的辅助诊断效率。结果Morphogo对正常、感染和多发性骨髓瘤骨髓涂片有核细胞预分类的总准确度分别为85.7%、84.4%和63.0%。仪器组、人工显微镜检查组的诊断与临床诊断之间的符合率均为100%。正常组、感染组中,仪器辅助下的分片与诊断耗时较人工显微镜检查短(P<0.001)。而多发性骨髓瘤组中,耗时差异无统计学意义(P=0.098)。结论Morphogo能辅助提高正常和感染患者骨髓涂片的诊断效率。 展开更多
关键词 骨髓涂片 细胞分类 细胞形态 诊断效率 感染 多发性骨髓瘤
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流式细胞术在非造血系统肿瘤诊断和治疗监测中的临床应用进展 被引量：1
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作者 胡倩雯 杨肃文 +2 位作者 乔赛 谢鑫友 张钧 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期722-728,共7页
流式细胞术(FCM)是一项集光学、应用流体学、电子学和计算机等多门学科为一体的细胞分析技术。目前,FCM在血液系统肿瘤的诊断与治疗监测中广泛应用,但在非造血系统肿瘤(NHN)的临床应用仍处于初级阶段。近年来,随着分析需求的日益增长和... 流式细胞术(FCM)是一项集光学、应用流体学、电子学和计算机等多门学科为一体的细胞分析技术。目前,FCM在血液系统肿瘤的诊断与治疗监测中广泛应用,但在非造血系统肿瘤(NHN)的临床应用仍处于初级阶段。近年来,随着分析需求的日益增长和科学技术的发展,一系列与现有高新技术高度整合的新型FCM逐步受到关注,例如质谱流式细胞术(CyTOF)、全光谱流式细胞术(SFC),这些新型FCM的出现为NHN患者临床实验室辅助诊断提供了更多的可能。该文阐述传统FCM、CyTOF与SFC原理及其在NHN诊断和治疗中的应用及前景,为FCM在临床检验的进一步拓展应用提供参考。 展开更多
关键词 流式细胞术 临床实验室技术 质谱流式细胞术 全光谱流式细胞术 肿瘤
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流式细胞术在慢性病诊疗与评估中的应用
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作者 谢鑫友 张钧 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期713-716,共4页
流式细胞术(FCM)是一种可对单个细胞的理化特性及生物学表型进行多参数分析的技术。FCM已成为辅助慢性病管理的重要手段,不仅用于慢性病的早期诊断,还可监测患者免疫状态、了解疾病进展和疗效以及评估预后,其临床应用范围从白血病、淋... 流式细胞术(FCM)是一种可对单个细胞的理化特性及生物学表型进行多参数分析的技术。FCM已成为辅助慢性病管理的重要手段,不仅用于慢性病的早期诊断,还可监测患者免疫状态、了解疾病进展和疗效以及评估预后,其临床应用范围从白血病、淋巴瘤等血液系统疾病扩展到实体肿瘤和慢性阻塞性肺疾病等。且随着技术的不断革新,一些新型FCM将在各类慢性病诊疗中发挥更多的作用,为优化慢性病的管理提供强有力的支持。 展开更多
关键词 流式细胞术 慢性病 血液病 淋巴细胞 细胞因子
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