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miR-34家族——肿瘤抑制蛋白p53高度相关的microRNA 被引量:16
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作者 娄文加 陈青 +1 位作者 刘立 钱程 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期423-430,共8页
若干微小RNA(microRNA,miRNA)与肿瘤抑制蛋白p53高度相关,其中miR-34家族最具代表性。一方面p53可通过对miR-34家族的调控实现对多个原癌基因如Bcl-2、c-myc以及细胞因子如cyclinE2、cyclinD1和c-Met的抑制,进而发挥抑癌作用;另一方面mi... 若干微小RNA(microRNA,miRNA)与肿瘤抑制蛋白p53高度相关,其中miR-34家族最具代表性。一方面p53可通过对miR-34家族的调控实现对多个原癌基因如Bcl-2、c-myc以及细胞因子如cyclinE2、cyclinD1和c-Met的抑制,进而发挥抑癌作用;另一方面miR-34家族也可以通过抑制沉默信息调节子SIRTI来进一步增强p53的活性。p53与miR-34家族之间形成的正反馈调节网络对抑制肿瘤的发生发展及恶化均起着重要的作用。文章对p53高度相关的miR-34家族在肿瘤发生发展及治疗的最新进展作一论述。 展开更多
关键词 miR-34家族 P53 反馈调节
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癌特异性双靶向载体的安全性及其携带基因的杀伤性 被引量:10
2
作者 王娟 顾锦法 +4 位作者 杨水云 肖田 齐荣 孙兰英 刘新垣 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第4期385-392,共8页
背景与目的:我们创导的“癌症的靶向双基因-病毒治疗”策略可消灭移植性肿瘤,目前最重要的是要提高其安全性,使其只靶向肿瘤细胞,而在正常细胞内不复制或者很少复制。本研究旨在构建肿瘤特异性的双靶向腺病毒TD55,并研究其安全性;在TD5... 背景与目的:我们创导的“癌症的靶向双基因-病毒治疗”策略可消灭移植性肿瘤,目前最重要的是要提高其安全性,使其只靶向肿瘤细胞,而在正常细胞内不复制或者很少复制。本研究旨在构建肿瘤特异性的双靶向腺病毒TD55,并研究其安全性;在TD55中插入凋亡基因TRAIL,构建成TD55-TRAIL,研究其杀伤性。方法:用hTERT启动子控制腺病毒复制必需的E1A基因,并将E1B55KD基因删除,构建肿瘤特异性的双靶向腺病毒TD55,使其只靶向p53功能缺乏的肿瘤。在TD55中插入凋亡基因TRAIL,构建成TD55-TRAIL,通过分子克隆构建质粒pTD55和pTD55-TRAIL,并与包装腺病毒的大质粒pBHGE3在293细胞中同源重组,得到腺病毒TD55和TD55-TRAIL。构建好的病毒体外感染人胚肺细胞MRC5、WI38,人结肠癌细胞SW620、HCT116、人肺癌细胞A549,分别用结晶紫染色法和MTT法检测其对细胞生长的影响。用流式细胞仪测定肿瘤细胞的凋亡率。结果:结晶紫染色结果和MTT结果表明,双靶向腺病毒TD55-TRAIL对正常细胞MRC5和WI38的杀伤作用比ZD55-TRAIL小很多。病毒复制能力分析表明,单靶向腺病毒在正常细胞中的复制倍数是双靶向腺病毒的3~5倍。TD55和TD55-TRAIL均能引起SW620细胞的凋亡,后者是前者的3.3倍。结论:双靶向腺病毒TD55-TRAIL对正常细胞的安全性比以往所构建的单靶向腺病毒ZD55-TRAIL更好,说明双靶向载体TD55比单靶向载体ZD55靶向性更高,如做为治疗药物可增加安全性,在治疗中可大大增加药物的安全性。携带的TRAIL基因能引起肿瘤细胞的凋亡,杀伤力较TD55增加数倍。 展开更多
关键词 肿瘤 生物疗法 溶瘤腺病毒 HTERT启动子 E1B 55KD基因 TD55
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乳腺生物反应器的研究和产业化进展 被引量:11
3
作者 付玉华 周秀梅 钱其军 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第8期45-51,共7页
随着转基因技术的发展,利用乳腺生物反应器生产珍贵药用蛋白已成为一种极具潜力的生物技术,它为商业化前景广阔的药用蛋白提供了高产量、低成本的生产方式,开创了基因工程制药的新途径。目前,应用乳腺生物反应器已表达百余种药用蛋白,... 随着转基因技术的发展,利用乳腺生物反应器生产珍贵药用蛋白已成为一种极具潜力的生物技术,它为商业化前景广阔的药用蛋白提供了高产量、低成本的生产方式,开创了基因工程制药的新途径。目前,应用乳腺生物反应器已表达百余种药用蛋白,其中近30种进入临床试验不同阶段,用于治疗抗凝血酶缺乏症的抗凝血酶Ⅲ(ATryn)已上市,乳腺生物反应器生产重组蛋白显示出广阔的产业化前景。作者概述了乳腺生物反应器的原理、优点、国内外研究进展和产业化进程,讨论了其目前存在问题和应对策略。 展开更多
关键词 转基因动物 乳腺生物反应器 重组蛋白 多潜能干细胞
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腺相关病毒载体的靶向策略探讨 被引量:6
4
作者 王毅刚 黄芳 +2 位作者 蔡荣 钱程 刘新垣 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1107-1115,共9页
与其他病毒载体相比,腺相关病毒(adenovirus-associated virus,AAV)由于具有宿主范围广、病原性低和携带的治疗基因表达期长等优势而成为目前最有前景的基因转移载体之一.然而,在临床基因治疗过程中,AAV具有广泛的宿主范围同时也导致缺... 与其他病毒载体相比,腺相关病毒(adenovirus-associated virus,AAV)由于具有宿主范围广、病原性低和携带的治疗基因表达期长等优势而成为目前最有前景的基因转移载体之一.然而,在临床基因治疗过程中,AAV具有广泛的宿主范围同时也导致缺乏组织或细胞特异性,对靶细胞的基因转染效率不高,同时也缺乏安全性.因此,提高重组AAV(rAAV)的靶向能力对于基因治疗成功与否非常关键.目前,各种不同血清型AAVs的分离、鉴定、应用以及rAAV制备技术的发展使得rAAV载体可用于更多的临床基因治疗实验.而且,当前针对rAAV载体各种靶向策略的研究也显示了很好的基因治疗应用前景.这些靶向策略主要包括转录靶向、受体靶向、共价偶联靶向、各种不同血清型AAV的应用以及基因重组靶向策略等.本文就近年来基于rAAV载体的各种靶向策略的进展作一评述. 展开更多
关键词 腺相关病毒 基因治疗 靶向
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肿瘤干细胞起源及其生物学特性 被引量:8
5
作者 陈晶 蔡荣 钱程 《细胞生物学杂志》 CSCD 2007年第2期202-206,共5页
肿瘤干细胞与正常成体干细胞在自我更新与增殖分化能力、表型标记和强耐药性等诸多方面存在着相类似的生物学特征,所以肿瘤干细胞被推测为肿瘤发生的细胞起源。基于肿瘤干细胞与正常干细胞之间的相似性质和肿瘤发生的分子机制,科学家建... 肿瘤干细胞与正常成体干细胞在自我更新与增殖分化能力、表型标记和强耐药性等诸多方面存在着相类似的生物学特征,所以肿瘤干细胞被推测为肿瘤发生的细胞起源。基于肿瘤干细胞与正常干细胞之间的相似性质和肿瘤发生的分子机制,科学家建立了一系列从肿瘤组织或肿瘤细胞系分离肿瘤干细胞的实验方法和研究肿瘤干细胞起源的动物实验模型。现就目前在肿瘤干细胞起源和生物学特性领域的研究作概括阐述。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 成体干细胞 表型标记
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一种制作大鼠膝关节和椎间盘石蜡组织切片的方法 被引量:7
6
作者 李会贤 朱顺英 +2 位作者 戚亦萍 张忠辉 韩伟 《细胞生物学杂志》 CSCD 2009年第1期125-129,共5页
改良一种制作大鼠完整膝关节和椎间盘的石蜡切片的方法,为观察骨关节透明软骨和椎间盘纤维软骨的结构提供实验基础。取正常大鼠完整膝关节和胸椎(T3-T4),10%中性福尔马林溶液固定24h,流水冲洗后分别采用3%硝酸脱钙液、混合脱钙液及EDTA... 改良一种制作大鼠完整膝关节和椎间盘的石蜡切片的方法,为观察骨关节透明软骨和椎间盘纤维软骨的结构提供实验基础。取正常大鼠完整膝关节和胸椎(T3-T4),10%中性福尔马林溶液固定24h,流水冲洗后分别采用3%硝酸脱钙液、混合脱钙液及EDTA脱钙液3种不同的脱钙液配合不同脱钙条件进行脱钙,制作石蜡切片,苏木精-伊红和番红O/固绿染色方法染色,显微镜下观察并评价其效果。结果表明,采用混合脱钙液4℃搅拌脱钙条件下制作的切片颜色鲜艳,细胞和细胞核清晰,组织破坏程度小,且耗时短,全部过程仅需一周即可完成。采用混合脱钙液方法制作的大鼠膝关节和椎间盘石蜡组织切片,骨和软骨组织结构完整,细胞形态清晰,能够满足组织学评价骨关节和椎间盘的要求。 展开更多
关键词 大鼠 膝关节 椎间盘 混合脱钙液 石蜡切片
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肿瘤靶向腺相关病毒携带干扰素β和TRAIL对A549肺癌移植瘤的增强治疗效应(英文) 被引量:6
7
作者 王毅刚 何凌峰 +5 位作者 何国清 孔彦平 刘旭平 蔡海波 刘新垣 谭文松 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期780-788,共9页
干扰素β(IFN-β)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是有效抗癌药物。腺相关病毒(AAV)为目前最有应用前景的基因转移载体之一。利用AAV携带IFN-β和TRAIL基因并置于hTERT启动子控制下分别构建成肿瘤靶向病毒AAV-hTERT-IFN-β和AAV-... 干扰素β(IFN-β)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是有效抗癌药物。腺相关病毒(AAV)为目前最有应用前景的基因转移载体之一。利用AAV携带IFN-β和TRAIL基因并置于hTERT启动子控制下分别构建成肿瘤靶向病毒AAV-hTERT-IFN-β和AAV-hTERT-TRAIL,且单个IFN-β或TRAIL基因治疗发挥了一定的抗癌效果。将AAV-hTERT-IFN-β和AAV-hTERT-TRAIL进行联合,旨在研究其对A549肺癌细胞体内外的生长抑制效应。ELISA法检测了AAV-hTERT-IFN-β感染A549细胞后分泌型IFN-β的表达;MTT法检测AAV-hTERT-IFN-β联合AAV-hTERT-TRAIL对肿瘤细胞的生长抑制作用;凋亡细胞染色和流式细胞仪分别检测了AAV-hTERT-IFN-β、AAV-hTERT-TRAIL及其联合对A549细胞的凋亡效应;进一步评价了联合AAV-hTERT-IFN-β和AAV-hTERT-TRAIL对A549裸鼠移植瘤的抑癌效果。结果显示,联合治疗优于任一单独治疗并且导致了增强的肿瘤细胞毒性和凋亡诱导效应。更进一步显示,联合AAV-hTERT-IFN-β和AAV-hTERT-TRAIL治疗发挥了重要的抑制裸鼠移植瘤效果甚至消除全部移植瘤,为探究IFN-β和TRAIL联合抗癌的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 干扰素Β TRAIL 腺相关病毒 肺癌 抗肿瘤效应
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MG132抑制肝癌细胞Bel-7404生长的机制研究 被引量:6
8
作者 张静 李伟 +5 位作者 章康健 刘锡君 孔彦平 牛娜 蒋海 周秀梅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第6期627-634,共8页
MG132(Z-Leu-leu-leu-CHO)是一种蛋白酶体抑制剂,它可逆地抑制蛋白酶体活性,从而抑制泛素-蛋白酶体通路所介导的蛋白质降解,诱导细胞凋亡.实验研究MG132抑制肝癌细胞Bel-7404生长的机制.采用不同浓度梯度和时间梯度,通过荧光显微镜、透... MG132(Z-Leu-leu-leu-CHO)是一种蛋白酶体抑制剂,它可逆地抑制蛋白酶体活性,从而抑制泛素-蛋白酶体通路所介导的蛋白质降解,诱导细胞凋亡.实验研究MG132抑制肝癌细胞Bel-7404生长的机制.采用不同浓度梯度和时间梯度,通过荧光显微镜、透射电子显微镜、Hoechst33342染色、MTT检测、AnnexinⅤ/PI流式细胞术、Westernblot分别检测MG132对Bel-7404细胞的形态学变化、细胞内质网压力变化、自噬泡形成、凋亡小体形成、细胞存活率、细胞凋亡水平、凋亡及自噬信号途径中相关蛋白质表达的影响.结果显示,MG132能明显抑制Bel-7404细胞生长.通过增加内质网压力激活Caspase-12,也可通过线粒体途径调节Bcl-2/Bax水平,促进细胞色素c的释放,两者皆可激活下游效应Caspase-3,剪切PARP,诱导细胞凋亡.同时,MG132可诱导Beclin1和LC3B的上调,促使Bel-7404细胞发生自噬,可在透射电镜下观察到自噬泡形成.上述结果表明,MG132作用Bel-7404细胞涉及两类细胞程序性死亡途径:细胞凋亡和自噬. 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂 肝癌细胞 凋亡 自噬 内质网应激
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非编码RNA与人类重大疾病的发生及其在生物医学领域内的应用 被引量:7
9
作者 郭艳合 张义玲 +2 位作者 刘立 蔡荣 钱程 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1232-1239,共8页
Noncoding RNA(ncRNA) is a kind of transcripts without the ability of coding proteins,which exist widely in highly eukaryotic.The amount of the ncRNA transcripts is up to 98% of the whole genome’s transcripts.The diff... Noncoding RNA(ncRNA) is a kind of transcripts without the ability of coding proteins,which exist widely in highly eukaryotic.The amount of the ncRNA transcripts is up to 98% of the whole genome’s transcripts.The difference in molecular structure and expressive pattern from other kinds of RNA endows them specific biological functions.Although exact functions of most ncRNA are not well known,it has been demonstrated that ncRNA was associated with some major human diseases.It would be helpful to design effective therapeutic strategies,if we understand how ncRNA is involved in the pathogenesis of human major diseases.This review will shed light on the expressive pattern and distribution of ncRNA,the relationship between diseases and ncRNA and finally the application of ncRNA in the therapeutic fields. 展开更多
关键词 非编码RNA 神经系统疾病 肿瘤 调节RNA
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冬凌草甲素诱导乳腺癌Bcap37细胞凋亡的探索 被引量:7
10
作者 余越美 严巧灵 +2 位作者 章康健 岳学田 周秀梅 《浙江理工大学学报(自然科学版)》 2013年第3期377-382,共6页
探讨冬凌草甲素(oridonin)对人乳腺癌细胞Bcap-37的增殖、凋亡以及引起细胞凋亡机制。以不同浓度的Ori处理Bcap-37细胞,通过MTT法检测细胞生长抑制率;应用流式细胞分析术检测细胞凋亡;Western Blot检测细胞发生凋亡的机制。结果是48~96... 探讨冬凌草甲素(oridonin)对人乳腺癌细胞Bcap-37的增殖、凋亡以及引起细胞凋亡机制。以不同浓度的Ori处理Bcap-37细胞,通过MTT法检测细胞生长抑制率;应用流式细胞分析术检测细胞凋亡;Western Blot检测细胞发生凋亡的机制。结果是48~96μmol/L的Ori可显著抑制Bcap-37细胞的增殖(P<0.05)。48μmol/L的Ori作用24h后,细胞的增值抑制率达到了40%,而96μmol/L的Ori只需处理12h,增值抑制率竟达到了50%。96μmol/L Ori处理24h后,Bcap-37细胞的凋亡率为21.6%。Western Blot检测到了Fas的上调,细胞色素c的释放和随后Caspase 9的激活及其下游信号蛋白Caspase 3和它的底物PARP,ICAD的剪切。进一步检测到Survivin的下调和GADD34的上调。基于这些实验结果,推测冬凌草甲素作为一种潜在的抗乳腺癌制剂,诱导乳腺癌细胞Bcap37发生凋亡的发生可能与Survivin和GADD34相关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 细胞凋亡 乳腺癌 CASPASE SURVIVIN GADD34
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小RNA家族的新成员-piRNA 被引量:6
11
作者 郭艳合 刘立 +1 位作者 蔡荣 钱程 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期28-34,共7页
microRNA(miRNA)和small interfering RNA(siRNA)在真核生物生命活动的基本过程中发挥着重要的调节作用。随着对siRNA和miRNA研究的不断深入,最近科学家在研究大鼠雄性精子时发现哺乳动物睾丸内存在另一种新型的小RNA分子,该分子在精子... microRNA(miRNA)和small interfering RNA(siRNA)在真核生物生命活动的基本过程中发挥着重要的调节作用。随着对siRNA和miRNA研究的不断深入,最近科学家在研究大鼠雄性精子时发现哺乳动物睾丸内存在另一种新型的小RNA分子,该分子在精子发生过程中起着重要的生理调节作用,该种小分子RNA被命名为piRNA,在功能、分布和分子特征等方面piRNA较miRNA和siRNA存在着显著的不同,对piRNA深入研究有望揭示出机体内在的基因表达调节机制。 展开更多
关键词 PIRNA Miwi PIWI piRC 精子发生
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蒽贝素(Embelin)通过阻断NF-κB信号通路抑制肝癌细胞Bel-7404生长的研究 被引量:6
12
作者 王世兵 雷文 +2 位作者 徐燕华 郭科妮 王毅刚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第2期161-167,共7页
蒽贝素(Embelin)是一种X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)的小分子抑制剂,可以抑制XIAP的生成和活性,从而解除XIAP的抗凋亡作用,使凋亡顺利进行.研究了Embelin抑制肝癌细胞Bel-7404增殖的机制.采用不同... 蒽贝素(Embelin)是一种X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)的小分子抑制剂,可以抑制XIAP的生成和活性,从而解除XIAP的抗凋亡作用,使凋亡顺利进行.研究了Embelin抑制肝癌细胞Bel-7404增殖的机制.采用不同浓度梯度,通过荧光显微镜、Hochest33342染色、MTT检测、AnnexinⅤ/PI流式细胞术和Western blot分别检测Embelin对Bel-7404细胞的形态学变化、凋亡小体形成、细胞存活率、细胞凋亡水平、凋亡信号转导相关蛋白表达的影响.结果显示,Embelin能明显抑制Bel-7404细胞增殖,并通过激活caspase通路以及阻断NF-κB信号通路诱导Bel-7404细胞凋亡,为进一步利用Embelin进行肝癌治疗的研究打下一定的基础. 展开更多
关键词 XIAP小分子抑制剂 肝癌细胞 凋亡 CASPASE NF-ΚB
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P-body及其与mRNA的转录后调节之间的关系 被引量:6
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作者 张义玲 郭艳合 +2 位作者 王毅刚 刘立 钱程 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期685-691,共7页
mRNA在真核生物基因表达的转录后调控中发挥着重要作用.然而最新研究发现,一种被命名为P-body胞浆复合体是mRNA转录后调控过程中的一个重要场所,在基因表达过程中起到了至关重要的调控作用.该复合体富含多种功能的蛋白,同时还有细胞因子... mRNA在真核生物基因表达的转录后调控中发挥着重要作用.然而最新研究发现,一种被命名为P-body胞浆复合体是mRNA转录后调控过程中的一个重要场所,在基因表达过程中起到了至关重要的调控作用.该复合体富含多种功能的蛋白,同时还有细胞因子与RNA等成分组成,其功能特征为参与mRNA降解、翻译抑制、mRNA监视以及RNA介导基因沉默等重要生命活动过程.研究发现,P-body是特化的细胞成分.本文详细阐述P-body的发现、结构特征以及与mRNA转录后调控的关系,使人们对P-body的生物学功能有更深入地了解和认识,另一方面将有助于更进一步深入探讨基因的表达调节机制. 展开更多
关键词 P-BODY MRNA降解 mRNA监视 转录后调节
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YB-1与肿瘤发生及治疗 被引量:4
14
作者 刘佳 瞿存业 +2 位作者 马蕾娜 石文芳 钱其军 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第7期744-750,共7页
Y-box结合蛋白(Y-box binding protein,YB)是一类广泛存在于从低等到高等多种生物中的蛋白质家族,在体内行使多种生物学功能.大量研究表明,YB-1作为该家族成员之一,与许多重要的生物大分子存在密切联系,并对细胞、组织和机体的生理机能... Y-box结合蛋白(Y-box binding protein,YB)是一类广泛存在于从低等到高等多种生物中的蛋白质家族,在体内行使多种生物学功能.大量研究表明,YB-1作为该家族成员之一,与许多重要的生物大分子存在密切联系,并对细胞、组织和机体的生理机能产生重大影响.更为重要的是,YB-1在多种疾病,尤其是恶性肿瘤的发生和发展中也起到十分关键的作用,对癌细胞表型的维持及肿瘤多药耐药性(MDR)的产生具有全方位的影响.以YB-1为作用靶点的新型肿瘤治疗策略可望有效控制癌症患者病情恶化,改善耐药状况.现就对YB-1与肿瘤发生和发展之间关系的研究进展,以及针对YB-1治疗策略的制定作一评述和展望. 展开更多
关键词 Y-box结合蛋白1(YB-1) 肿瘤发生 肿瘤病毒治疗
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PHA-767491抑制多种肿瘤细胞生长 被引量:5
15
作者 李伟 张静 +3 位作者 胡徐庞 魏旭斌 刘立 钱程 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期455-461,共7页
Cdc7激酶抑制剂PHA-767491是最新发现的一类抗肿瘤新药.本实验利用不同浓度的PHA-767491对肿瘤细胞进行抑制研究.实验结果显示,PHA-767491对肿瘤细胞有很强的生长抑制作用,且抑制效果随着药物浓度或时间的增加而增强;通过和化疗药物5-... Cdc7激酶抑制剂PHA-767491是最新发现的一类抗肿瘤新药.本实验利用不同浓度的PHA-767491对肿瘤细胞进行抑制研究.实验结果显示,PHA-767491对肿瘤细胞有很强的生长抑制作用,且抑制效果随着药物浓度或时间的增加而增强;通过和化疗药物5-氟尿嘧啶对比发现,PHA-767491只需较低剂量就能发挥出抑制肿瘤的作用,且疗效远高于5-氟尿嘧啶.研究进一步还发现,PHA-767491可通过促使PARP和casepase3蛋白的剪切诱导肿瘤细胞凋亡,同时PHA-767491还可以引起肿瘤细胞自噬.综上研究表明,PHA-767491可以通过诱导细胞凋亡和引起细胞自噬作用对多种肿瘤细胞有较好的治疗效果,而对正常细胞毒性很低.因此该实验研究为今后抗肿瘤新药PHA-767491的进一步应用于癌症的临床治疗提供了重要的实验依据. 展开更多
关键词 Cdc7激酶 PHA-767491 肿瘤 凋亡 自噬
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头颈部鳞状细胞癌的分子发病机制 被引量:5
16
作者 应畅 肖伯端 +1 位作者 王毅刚 崔彩霞 《医学综述》 2016年第1期51-55,共5页
头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)在人体肿瘤中常见,有着极高的发病率和病死率,严重威胁着人类健康。随着分子医学、蛋白质组学和生物信息学等学科和技术的发展,许多与HNSCC发生、发展相关的分子靶点和相关信号通路被发现,其中最重要的两种是TP5... 头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)在人体肿瘤中常见,有着极高的发病率和病死率,严重威胁着人类健康。随着分子医学、蛋白质组学和生物信息学等学科和技术的发展,许多与HNSCC发生、发展相关的分子靶点和相关信号通路被发现,其中最重要的两种是TP53和Notch,并且针对特异的突变靶点和信号通路进行的HNSCC靶向治疗也被广泛应用并取得了一定的治疗效果。抑癌基因TP53、细胞周期依赖性激酶抑制基因(CDKN2A)在HNSCC生长中具有负调控作用。Notch、磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α、RAS和表皮生长因子受体等基因在HNSCC中出现高表达,它们通过激活突变、失活突变或表观遗传改变影响下游信号,与HNSCC的治疗密切相关。Notch基因更是有着抑癌和促癌的双重作用。此外,微RNA与HNSCC的发病也有关系。因此,深入研究HNSCC发病的分子机制,寻找新的治疗策略和治疗靶点,将对HNSCC的防治起到重要作用,同时对HNSCC患者的临床治疗也具有重要意义。 展开更多
关键词 头颈部鳞状细胞癌 分子靶点 关键基因 信号通路
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蛋白酶体抑制剂MG132诱导肝癌细胞Hep3B凋亡的机制 被引量:3
17
作者 张静 刘锡君 +3 位作者 李伟 孔彦平 章康健 周秀梅 《浙江理工大学学报(自然科学版)》 2010年第5期799-804,共6页
研究探讨蛋白酶体抑制剂MG132(Z-Leu-leu-leu-CHO)诱导肝癌细胞Hep3B凋亡的作用与机制。实验采用不同浓度梯度和时间梯度,通过荧光显微镜、Hoechst33342染色、MTT检测和Western印迹分别检测MG132对Hep3B细胞的形态、凋亡小体形成、细胞... 研究探讨蛋白酶体抑制剂MG132(Z-Leu-leu-leu-CHO)诱导肝癌细胞Hep3B凋亡的作用与机制。实验采用不同浓度梯度和时间梯度,通过荧光显微镜、Hoechst33342染色、MTT检测和Western印迹分别检测MG132对Hep3B细胞的形态、凋亡小体形成、细胞存活率、细胞凋亡相关蛋白表达的影响。结果表明,MG132能够选择性抑制肝癌细胞生长,对正常肝细胞没有明显影响。此外,MG132可以通过内质网应激途径诱导肝癌细胞Hep3B凋亡,呈现剂量和时间的双重依赖性。提示通过抑制蛋白酶体来达到诱导肿瘤细胞凋亡的方法是可行的,MG132此类药物的研究与应用将为肿瘤治疗提供新的选择。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂 肝癌细胞 凋亡 内质网应激 CASPASE-12
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高效表达Smad2蛋白的A549细胞模型的建立 被引量:4
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作者 袁素敬 梁余培 +1 位作者 陈勇毅 章康健 《浙江理工大学学报(自然科学版)》 2013年第3期372-376,共5页
将携带Smad2-Flag基因的慢病毒包装系列质粒转染293T细胞,进行慢病毒包装。用收集并纯化好的慢病毒感染A549细胞,流式分选筛选出GFP阳性的细胞,用Flag抗体和Smad2抗体进行Western blot鉴定。流式分选得到的GFP阳性的A549细胞经Western b... 将携带Smad2-Flag基因的慢病毒包装系列质粒转染293T细胞,进行慢病毒包装。用收集并纯化好的慢病毒感染A549细胞,流式分选筛选出GFP阳性的细胞,用Flag抗体和Smad2抗体进行Western blot鉴定。流式分选得到的GFP阳性的A549细胞经Western blot鉴定能高效表达外源Smad2-Flag融合蛋白,同时空载慢病毒处理的GFP阳性细胞并不表达Smad2-Flag蛋白。结果表明成功构建了高效表达Smad2蛋白的A549细胞系,为进一步研究超级干扰素抗肺癌的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 A549细胞株 慢病毒 GFP SMAD2
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腺相关病毒外壳修饰与肿瘤靶向治疗 被引量:4
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作者 徐增辉 周秀梅 +1 位作者 石文芳 钱其军 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第21期2546-2553,共8页
靶向性是肿瘤基因治疗取得成功的关键因素.在众多基因治疗病毒载体中,腺相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)是目前广为关注的基因治疗载体系统.AAV具有广泛的宿主范围,这也导致其缺乏组织或细胞特异性,对靶细胞的基因转染效率不高.因... 靶向性是肿瘤基因治疗取得成功的关键因素.在众多基因治疗病毒载体中,腺相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)是目前广为关注的基因治疗载体系统.AAV具有广泛的宿主范围,这也导致其缺乏组织或细胞特异性,对靶细胞的基因转染效率不高.因此,提高AAV载体在体内运输的靶向性和感染目的细胞的效率,是实现AAV基因治疗的关键.迄今为止,科学家已开发出很多策略来改造腺相关病毒的外壳,期望增强其靶向性或重靶向目的细胞.这些策略不仅包括传统的化学修饰、噬菌体展示、外壳基因组改造和嵌合载体,也包括新颖的标记营救、衣壳蛋白定向进化、AAV外壳直接肽段展示和AAVP(AAV-Phage)等.本文评述了对AAV外壳改造达到靶向肿瘤细胞的研究进展. 展开更多
关键词 RAAV 靶向治疗 基因治疗
原文传递
实体瘤细胞中低氧诱导因子-1蛋白的活性调控 被引量:5
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作者 唐斌 周秀梅 钱其军 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第20期3157-3165,共9页
实体肿瘤内部广泛存在着缺氧现象,缺氧与肿瘤的远处转移、不良预后以及放化疗的耐受性关系密切.低氧诱导因子-1(HIF-1)在细胞缺氧信号途径中处于核心位置,它能增强细胞在缺氧环境下的生存能力,促进血管的增生及肿瘤的恶性转化.HIF-1所... 实体肿瘤内部广泛存在着缺氧现象,缺氧与肿瘤的远处转移、不良预后以及放化疗的耐受性关系密切.低氧诱导因子-1(HIF-1)在细胞缺氧信号途径中处于核心位置,它能增强细胞在缺氧环境下的生存能力,促进血管的增生及肿瘤的恶性转化.HIF-1所起的核心作用使其成为治疗人类恶性肿瘤时一个非常好的靶点.HIF-1在体内的调控途径异常复杂,主要有氧浓度、葡萄糖代谢途径、原癌基因和抑癌基因的突变、PI3K-MAPK-mTOR通路、自由基以及抗氧化剂等,其中研究最透彻的是氧浓度的调节.而近年来自由基、DNA的突变以及葡萄糖代谢的调节成为研究的热点.本文将围绕近年来这几方面的研究进展进行一个综合的回顾,这将有助于针对HIF-1这一重要靶点进行抗肿瘤药物的研究. 展开更多
关键词 低氧诱导因子1 缺氧 肿瘤 调控
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