许多过敏原可以介导Ⅰ型超敏反应,通过与IgE特异性结合,引起过敏症状.过敏原与细胞表面的特异性IgE结合的部分叫做表位,其与IgE的结合能力可以表征过敏原致敏性的强弱.Der p 2是一种重要的屋尘螨过敏原,其线性表位中含有的酪氨酸可被空...许多过敏原可以介导Ⅰ型超敏反应,通过与IgE特异性结合,引起过敏症状.过敏原与细胞表面的特异性IgE结合的部分叫做表位,其与IgE的结合能力可以表征过敏原致敏性的强弱.Der p 2是一种重要的屋尘螨过敏原,其线性表位中含有的酪氨酸可被空气中的NO_(2)和O_(3)硝基化,从而影响线性表位与IgE的结合能力.本实验研究了Der p 2的线性表位及其硝基化产物与IgE的结合能力.研究发现,Der p 2的两条表位多肽可以有效地结合IgE,硝基化表位多肽的IgE结合能力显著高于未硝基化的表位多肽,且不同位点的硝基化对于IgE结合能力的增强程度也不同.结果表明,硝基化能够位点特异性地增强Der p 2的致敏性.展开更多
过敏原的硝基化会引起其致敏潜能的增强,进而带来更大的致敏性健康风险.过敏原蛋白质通常含有多个酪氨酸硝基化位点,分析过敏原硝基化的位点选择性是探究硝基化对过敏原致敏性影响的重要基础.本文以尘螨过敏原为研究对象,建立了基于超...过敏原的硝基化会引起其致敏潜能的增强,进而带来更大的致敏性健康风险.过敏原蛋白质通常含有多个酪氨酸硝基化位点,分析过敏原硝基化的位点选择性是探究硝基化对过敏原致敏性影响的重要基础.本文以尘螨过敏原为研究对象,建立了基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时定量分析3种尘螨过敏原(Der f 1、Der p 1和Der p 2)的13个酪氨酸位点硝基化程度的方法,并应用于分析3种尘螨过敏原在过氧亚硝酸盐硝基化作用下的位点选择性.结果表明,3种尘螨过敏原均发生了位点特异性的硝基化,Y195、Y37和Y92分别为Der f 1、Der p 1和Der p 2中反应活性最高的硝基化位点.尘螨过敏原位点选择性的硝基化表明,在评价硝基化尘螨过敏原的致敏性变化时应当考虑其位点特异性的硝基化状况.展开更多
过敏原蛋白是引发尘螨过敏性疾病的主要因素。空气污染物O3和NOX能够引起过敏原蛋白的硝化,从而增强其致敏性。然而,目前还缺乏尘螨过敏原蛋白硝化产物的准确定量方法。本文建立了一种能够同时测定环境中两种主要尘螨过敏原蛋白(Der f 1...过敏原蛋白是引发尘螨过敏性疾病的主要因素。空气污染物O3和NOX能够引起过敏原蛋白的硝化,从而增强其致敏性。然而,目前还缺乏尘螨过敏原蛋白硝化产物的准确定量方法。本文建立了一种能够同时测定环境中两种主要尘螨过敏原蛋白(Der f 1和Der p 1)及其硝化产物(Nitrated Der f 1和Nitrated Der p 1)的检测方法。该方法将样品中的过敏原蛋白酶解消化成小分子的多肽,通过超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定小分子多肽,从而对过敏原蛋白及其硝化产物进行定性和定量分析。该方法采用同位素内标法定量,方法检测限(MDL)为0.33µg·g^(−1)(Der p 1)—0.57µg·g^(−1)(Nitrated Der p 1),相对回收率在43.0%—80.0%之间,方法选择性好,准确度和分析通量高。利用该方法对办公室灰尘中的尘螨过敏原蛋白及其硝化产物进行分析,结果表明所测灰尘样本中Der f 1含量为0.84—1.36µg·g^(−1),Nitrated Der f 1含量为3.71—35.6µg·g^(−1),Der p 1含量为10.3—30.0µg·g^(−1),Nitrated Der p 1含量为2.16—8.54µg·g^(−1)。Der f 1硝化率为80%—96%,Der p 1硝化率为14%—43%。风险评估结果显示所测灰尘样本的风险指数(RI)值为9—38,均处于高风险水平。展开更多
文摘许多过敏原可以介导Ⅰ型超敏反应,通过与IgE特异性结合,引起过敏症状.过敏原与细胞表面的特异性IgE结合的部分叫做表位,其与IgE的结合能力可以表征过敏原致敏性的强弱.Der p 2是一种重要的屋尘螨过敏原,其线性表位中含有的酪氨酸可被空气中的NO_(2)和O_(3)硝基化,从而影响线性表位与IgE的结合能力.本实验研究了Der p 2的线性表位及其硝基化产物与IgE的结合能力.研究发现,Der p 2的两条表位多肽可以有效地结合IgE,硝基化表位多肽的IgE结合能力显著高于未硝基化的表位多肽,且不同位点的硝基化对于IgE结合能力的增强程度也不同.结果表明,硝基化能够位点特异性地增强Der p 2的致敏性.
文摘过敏原的硝基化会引起其致敏潜能的增强,进而带来更大的致敏性健康风险.过敏原蛋白质通常含有多个酪氨酸硝基化位点,分析过敏原硝基化的位点选择性是探究硝基化对过敏原致敏性影响的重要基础.本文以尘螨过敏原为研究对象,建立了基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时定量分析3种尘螨过敏原(Der f 1、Der p 1和Der p 2)的13个酪氨酸位点硝基化程度的方法,并应用于分析3种尘螨过敏原在过氧亚硝酸盐硝基化作用下的位点选择性.结果表明,3种尘螨过敏原均发生了位点特异性的硝基化,Y195、Y37和Y92分别为Der f 1、Der p 1和Der p 2中反应活性最高的硝基化位点.尘螨过敏原位点选择性的硝基化表明,在评价硝基化尘螨过敏原的致敏性变化时应当考虑其位点特异性的硝基化状况.
文摘过敏原蛋白是引发尘螨过敏性疾病的主要因素。空气污染物O3和NOX能够引起过敏原蛋白的硝化,从而增强其致敏性。然而,目前还缺乏尘螨过敏原蛋白硝化产物的准确定量方法。本文建立了一种能够同时测定环境中两种主要尘螨过敏原蛋白(Der f 1和Der p 1)及其硝化产物(Nitrated Der f 1和Nitrated Der p 1)的检测方法。该方法将样品中的过敏原蛋白酶解消化成小分子的多肽,通过超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定小分子多肽,从而对过敏原蛋白及其硝化产物进行定性和定量分析。该方法采用同位素内标法定量,方法检测限(MDL)为0.33µg·g^(−1)(Der p 1)—0.57µg·g^(−1)(Nitrated Der p 1),相对回收率在43.0%—80.0%之间,方法选择性好,准确度和分析通量高。利用该方法对办公室灰尘中的尘螨过敏原蛋白及其硝化产物进行分析,结果表明所测灰尘样本中Der f 1含量为0.84—1.36µg·g^(−1),Nitrated Der f 1含量为3.71—35.6µg·g^(−1),Der p 1含量为10.3—30.0µg·g^(−1),Nitrated Der p 1含量为2.16—8.54µg·g^(−1)。Der f 1硝化率为80%—96%,Der p 1硝化率为14%—43%。风险评估结果显示所测灰尘样本的风险指数(RI)值为9—38,均处于高风险水平。
