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阴沟肠杆菌铁氢酶(hydA)基因在大肠杆菌中的表达及其产氢特性 被引量：1
1
作者 赵锦芳 程军 +1 位作者 戚峰 张传溪 《太阳能学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第6期829-832,共4页
合成Enterobacter cloacae IIT-BT 08的铁氢酶(hydA)基因片段,PCR扩增出全长ORF。将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-2,构建了表达质粒pGEX-4T-2-hydA,转化大肠杆菌BL21(DE3)并在IPTG诱导下表达。SDSPAGE分析表明在约42kDa处有特异... 合成Enterobacter cloacae IIT-BT 08的铁氢酶(hydA)基因片段,PCR扩增出全长ORF。将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-2,构建了表达质粒pGEX-4T-2-hydA,转化大肠杆菌BL21(DE3)并在IPTG诱导下表达。SDSPAGE分析表明在约42kDa处有特异性条带。用抗GST多克隆抗体对GST-hydA融合蛋白进行了Western blot检测,进一步证明了hydA得到了正确的融合表达。产氢活性检测结果表明表达的重组hydA在大肠杆菌中具有明显的产氢活性。测定了培养基初始pH值、温度和底物浓度对重组大肠杆菌产氢的影响。 展开更多
关键词 氢气 阴沟肠杆菌 铁氢酶 原核表达 发酵
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