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苦参碱诱导人白血病耐药细胞K562/IM自噬和凋亡的研究 被引量：13
1
作者 胡美薇 傅丽娟 +3 位作者 范翠华 成志 陈霞君 郑兵荣 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期213-218,共6页
目的观察苦参碱对人白血病耐药细胞K562/IM自噬和凋亡的影响。方法 (1)苦参碱及伊马替尼对细胞增殖及自噬情况检测:分别设空白对照组、不同浓度(0.25、0.50、1.00、2.00、5.00mg/mL)苦参碱组和(0.05、0.25、0.50、5.00、20.00μmol/L)... 目的观察苦参碱对人白血病耐药细胞K562/IM自噬和凋亡的影响。方法 (1)苦参碱及伊马替尼对细胞增殖及自噬情况检测:分别设空白对照组、不同浓度(0.25、0.50、1.00、2.00、5.00mg/mL)苦参碱组和(0.05、0.25、0.50、5.00、20.00μmol/L)伊马替尼组,MTT检测K562细胞和K562/IM细胞抑制率。分别设置空白对照组、0.4 mg/mL苦参碱组和0.5μmol/L伊马替尼组,免疫荧光激光共聚焦检测K562细胞和K562/IM细胞自噬现象,Western Blot检测细胞中自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、P62的表达。(2)苦参碱联合3-甲基腺嘌呤(3-MA)或雷帕霉素(rapamycin,Rapa)诱导K562/IM细胞自噬及凋亡情况变化的检测:实验分6组,空白对照组、苦参碱组(0.4mg/mL苦参碱处理)、3-MA组(5mmol/L 3-MA处理)、Rapa组(0.5μmol/L Rapa处理)、苦参碱+3-MA组(0.4mg/mL苦参碱+5mmol/L3-MA处理)、苦参碱+Rapa组(0.4mg/mL苦参碱+0.5μmol/L Rapa处理),采用MTT检测细胞的抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡水平;Western Blot检测细胞自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、P62及凋亡相关蛋白Caspase-3表达。结果 (1)苦参碱和伊马替尼作用K562、K562/IM细胞,细胞增殖受抑制明显(P<0.05),LC3-Ⅱ/Ⅰ的聚集明显增加,Beclin-1及LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达升高,P62蛋白表达减少(P<0.05),以K562/IM细胞更明显(P<0.05)。(2)苦参碱组K562/IM细胞增殖抑制率(36.32±2.21)%,凋亡率(15.35±0.39)%。苦参碱+3-MA组K562/IM细胞增殖抑制率升高[(65.25±2.06)%,P<0.01)],凋亡率升高[(21.70±0.48)%,P<0.05],同时Beclin-1及LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达下降,P62蛋白表达增强,Caspase-3表达增强(P<0.05);而苦参碱+Rapa组作用则相反。结论苦参碱和伊马替尼均可抑制K562、K562/IM细胞增殖的同时可诱导自噬,以耐药K562/IM细胞株自噬明显。通过3-MA抑制自噬可增强苦参碱对细胞K562/IM作用的敏感性,而雷帕霉素减弱苦参碱作用。 展开更多
关键词 苦参碱 3-甲基腺嘌呤 雷帕霉素 自噬 凋亡 K562/IM细胞
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自噬与白血病耐药的研究进展 被引量：1
2
作者 胡美薇 傅丽娟 +3 位作者 范翠华 成志 陈霞君 郑兵荣 《浙江中西医结合杂志》 2018年第7期601-604,共4页
白血病是一种恶性造血系统肿瘤，大部分患者通过化疗达到完全缓解甚至治愈。目前，白血病患者的无病生存率（DFs）较前显著增加，但是，仍有些患者由于耐药存在而死亡。自噬是一种参与细胞内物质降解的溶酶体途径[1]，在各种应激条件下... 白血病是一种恶性造血系统肿瘤，大部分患者通过化疗达到完全缓解甚至治愈。目前，白血病患者的无病生存率（DFs）较前显著增加，但是，仍有些患者由于耐药存在而死亡。自噬是一种参与细胞内物质降解的溶酶体途径[1]，在各种应激条件下，自噬维持细胞内环境的稳态，它通过清除缺陷的细胞器、侵人性微生物或蛋白质聚体，维持细胞的完整性，从而在应激环境中促进细胞正常功能圈。 展开更多
关键词 白血病 自噬 化疗 耐药
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