目的探究微小RNA-625-5p(miR-625-5p)是否可靶向LIM和SH3结构域蛋白1(LIM and SH3 protein 1,LASP1)影响结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞的增殖、迁移及凋亡。方法CRC细胞转染后分为空白对照组、阴性对照组、miR-625-5p类似物组、m...目的探究微小RNA-625-5p(miR-625-5p)是否可靶向LIM和SH3结构域蛋白1(LIM and SH3 protein 1,LASP1)影响结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞的增殖、迁移及凋亡。方法CRC细胞转染后分为空白对照组、阴性对照组、miR-625-5p类似物组、miR-625-5p抑制剂组、miR-625-5p类似物+LASP1组。进行荧光定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测各组LASP1、miR-625-5p的mRNA表达,双荧光素酶报告基因检测基因靶向结合关系,细胞计数试剂盒(cell counting kit,CCK)-8检测细胞活性,细胞平板克隆检测细胞克隆能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞迁移及侵袭,EDU实验测定细胞增殖,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测LASP1及侵袭转移相关蛋白神经型钙黏蛋白(neural cadherin,N-cadherin)和上皮型钙黏蛋白(epithelial cadherin,E-cadherin)的表达情况。结果qPCR检测证明细胞转染成功,双荧光素酶报告基因检测到miR-625-5p可靶向结合LASP1。与阴性对照组比较,miR-625-5p类似物组的细胞活性和细胞克隆、迁移、侵袭、增殖数量及LASP1、N-cadherin表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率及E-cadherin表达水平上升(P<0.05),miR-625-5p抑制组上述指标的结果完全相反。与miR-625-5p类似物组比较,miR-625-5p类似物+LASP1组的细胞活性和细胞克隆、迁移、侵袭、增殖数量及LASP1蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.01)。结论miR-625-5p可靶向LASP1抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移,并促进凋亡。展开更多
