-
题名4-羟基壬烯酸诱导酒精性肝病的分子机制
被引量：2
- 1
-
-
作者
杜仲燕
高佳
王伟茜
于晨辉
窦晓兵
-
机构
浙江中医药大学生命科学学院浙江中医药大学细胞生物学研究所
浙江中医药大学管理学院
-
出处
《中华肝脏病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期747-752,共6页
-
基金
国家自然科学基金（81241145）
浙江省自然科学基金（LY12C07002）
浙江省医药卫生科技项目（2013KYA138）
-
文摘
目的 通过体内动物实验和体外细胞实验,探讨4-羟基壬烯酸（4-HNE）对肿瘤坏死因子（TNF）介导的肝细胞内核因子κB （NF-κ B）抗凋亡通路的抑制作用及其机制,进一步从细胞信号通路及蛋白质翻译后修饰水平揭示4-HNE促TNF介导酒精性肝病（ALD）的发病机制.方法 用Lieber-DeCarli小鼠模型、人肝癌细胞株HepG2和小鼠原代肝细胞,通过四甲基偶氮唑盐法、乳酸脱氢酶测定、Westem blot、免疫荧光染色等检测4-HNE对TNF介导的肝细胞损伤作用及4-HNE表达水平；通过酶联免疫吸附实验、实时荧光定量PCR检测肝细胞内NF-κ B的含量、其与DNA的结合活性及其所调控的抗凋亡基因的表达情况；用Western blot及免疫共沉淀技术检测NF-κB抑制蛋白（IκBα）及其激酶（IKK）的磷酸化以及4-HNE对IκBα、IKK的翻译后修饰水平.计量资料两个样本均数间比较用t检验,多个样本均数间比较用方差分析. 结果 （1）体内动物实验：模型组小鼠肝内甘油三酯水平（36.1±6.9） mg/g、血浆ALT水平（39.8±8.9） U/L和肝内TNF水平（650.8±28.9） pg/g明显高于对照组[分别为（13.6±3.2） mg/g、（18.3±4.1） U/L和TNF （320.2±14.1）pg/pg,差异有统计学意义,JP值均＜0.01.与对照组相比,模型组小鼠4-HNE与蛋白质形成的加合物增多,肝细胞脂质变性、细胞凋亡增多,肝细胞核内NF-κ B（p65）与DNA的结合活性（0.13±0.01）也较对照组（0.17±0.03）明显下降（t=4.178,P＜0.05）,NF-κB（p65）蛋白表达水平降低,IκBα蛋白磷酸化水平降低,4-HNE-I κ B α加合物增多.（2）体外细胞实验：①在HepG2及小鼠原代肝细胞中,与TNF组相比,4-HNE/TNF组肝细胞增殖活性下降,随着4-HNE、TNF浓度的增加,增殖活性呈剂量依赖性降低,细胞凋亡增多,细胞释放的乳酸脱氢酶活性升高（F=7.262,P＜0.05）,4-HNE/TNF组明显诱导聚腺苷二磷酸核糖聚合酶蛋白剪切.②在HepG2细胞和小鼠�
-
关键词
肝疾病
酒精性
NF-ΚB
肿瘤坏死因子Α
4-羟基壬烯酸
-
Keywords
Liver diseases, alcoholic
NF-kappa B
Tumor necrosis factor-α
4-Hydroxynonenal
-
分类号
R575.5
[医药卫生—消化系统]
-
