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SB-431542抑制乳腺癌细胞BT-549的增殖和侵袭及其机理研究
被引量：
3
1
作者
曾凡才
何宗洋
+1 位作者
莫冬阳
周红
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期602-609,共8页
肿瘤转移是导致肿瘤患者死亡的最主要原因，TGF-β超家族成员Nodal分子被证实参与肿瘤细胞的增殖和转移，因而基于Nodal信号为靶标开展抗肿瘤研究成为可能。该研究应用Western blot检测乳腺癌细胞株BT-549、T-47D、MCF-7、SK-BR-3和MDA...
肿瘤转移是导致肿瘤患者死亡的最主要原因，TGF-β超家族成员Nodal分子被证实参与肿瘤细胞的增殖和转移，因而基于Nodal信号为靶标开展抗肿瘤研究成为可能。该研究应用Western blot检测乳腺癌细胞株BT-549、T-47D、MCF-7、SK-BR-3和MDA—MB-231中的Nodal和基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）的表达水平，发现它们在BT-549细胞中表达量最高。然后采用不同浓度_Nodal信号抑制剂SB．431542（1-50μmol／L）处理BT-549细胞48h，利用MTT法揭示20～50gmol／L的SB-431542抑制该细胞增殖。进一步利用细胞划痕和Transwell实验证明，10μmol／L的SB-431542可抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭。最后，通过明胶酶谱和Westernblot显示，10～30gmol／L的sB．431542可剂量依赖性地抑制MMP-2的表达和活性。上述结果说明，SB-431542通过阻断Nodal信号通路可效抑制乳腺癌细胞BT-549的增殖、迁移和侵袭，其作用机制可能与降低MMP-2的表达和活性有关。
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关键词
乳腺癌
NODAL
基质金属蛋白酶-2
SB-431542
原文传递
针对ALK4基因的TALEN质粒构建与活性鉴定
被引量：
1
2
作者
曾凡才
顾洪
+1 位作者
王轲
周红
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期210-216,共7页
旨在利用类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)技术构建具有活性的敲除类激活素激酶受体4(Activin receptor-like kinase 4,ALK4)的TALEN质粒。利用TALEN在线设计工具,根据TALEN设计原则...
旨在利用类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)技术构建具有活性的敲除类激活素激酶受体4(Activin receptor-like kinase 4,ALK4)的TALEN质粒。利用TALEN在线设计工具,根据TALEN设计原则和ALK4剪接异构体的共同序列确定基因敲除的靶位点、TALEN识别序列和用于活性验证的限制性酶切位点。利用质粒文库试剂盒快速构建TALEN质粒,并通过酶切、测序和BLAST比对加以验证。应用脂质体转染法将构建质粒导入HEK293T细胞,通过共转染的pEGFP-N1质粒判断转染效率。利用嘌呤霉素进行阳性筛选后提取基因组DNA,PCR扩增靶序列,HhaⅠ酶切纯化后的PCR产物。结果显示,来自转染TALEN质粒细胞基因组的PCR产物的酶切效率明显下降,提示部分细胞的ALK4基因发生了突变。首次成功构建了在HEK293T细胞中有活性的TALEN质粒。
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关键词
类激活素激酶受体4
类转录激活因子效应物核酸酶
基因敲除
HEK293T细胞
质粒构建
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职称材料
Nodal基因的剪接异构体分析
被引量：
1
3
作者
曾凡才
赵太强
+1 位作者
莫冬阳
余文静
《内江师范学院学报》
2014年第8期41-47,共7页
利用GenBank数据库中Nodal分子的核酸和蛋白相关信息,采用生物信息学方法分析Nodal的分子生物学特征及其剪接异构体.应用基因克隆方法克隆人Nodal基因.结果表明Nodal基因至少有四种剪接异构体,除研究较清楚的isoform 1相对完整外,其它...
利用GenBank数据库中Nodal分子的核酸和蛋白相关信息,采用生物信息学方法分析Nodal的分子生物学特征及其剪接异构体.应用基因克隆方法克隆人Nodal基因.结果表明Nodal基因至少有四种剪接异构体,除研究较清楚的isoform 1相对完整外,其它剪接异构体信息并不完整、功能未知且表达可能有组织特异性.特别是虽然Nodal基因isoform 1的氨基酸编码序列已知,但是发现目前NCBI提供的Nodal基因mRNA参考序列并不完整.通过基因克隆发现一种新的Nodal基因剪接异构体,它可能具有TGF-β超家族的特征性结构,但功能未知.结果说明人Nodal基因可能至少存在5种剪接异构体,除isoform 1外,其它isoform具体功能还有待进一步研究.
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关键词
NODAL
剪接异构体
生物信息学
表达序列标签
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职称材料
乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞的蛋白质组学分析
4
作者
刘友平
刘晓燕
+2 位作者
黄富礼
严冬梅
何涛
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期115-118,共4页
乙型肝炎（乙肝）是HBV感染所导致的免疫介导性疾病，即HBV本身并不致病，它对肝细胞的损伤主要是通过人体的免疫应答，如机体免疫反应正常，机体对感染的HBV表现为自限性痊愈（抗-HBs阳性）；如患者免疫调节功能紊乱，致使疾病迁延不...
乙型肝炎（乙肝）是HBV感染所导致的免疫介导性疾病，即HBV本身并不致病，它对肝细胞的损伤主要是通过人体的免疫应答，如机体免疫反应正常，机体对感染的HBV表现为自限性痊愈（抗-HBs阳性）；如患者免疫调节功能紊乱，致使疾病迁延不愈而成为慢性乙肝^[1。-2。
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关键词
病毒感染者
外周血单个核细胞
乙型肝炎
蛋白质组
机体免疫反应
HBV感染
抗-HBS阳性
学分
原文传递
题名
SB-431542抑制乳腺癌细胞BT-549的增殖和侵袭及其机理研究
被引量：
3
1
作者
曾凡才
何宗洋
莫冬阳
周红
机构
电子科技大
学
生命科
学
与
技术
学院
泸州
医学院
生物化学
与
分子生物学
实验室
出处
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期602-609,共8页
基金
国家自然科学基金(批准号:30972280)资助的课题~~
文摘
肿瘤转移是导致肿瘤患者死亡的最主要原因，TGF-β超家族成员Nodal分子被证实参与肿瘤细胞的增殖和转移，因而基于Nodal信号为靶标开展抗肿瘤研究成为可能。该研究应用Western blot检测乳腺癌细胞株BT-549、T-47D、MCF-7、SK-BR-3和MDA—MB-231中的Nodal和基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）的表达水平，发现它们在BT-549细胞中表达量最高。然后采用不同浓度_Nodal信号抑制剂SB．431542（1-50μmol／L）处理BT-549细胞48h，利用MTT法揭示20～50gmol／L的SB-431542抑制该细胞增殖。进一步利用细胞划痕和Transwell实验证明，10μmol／L的SB-431542可抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭。最后，通过明胶酶谱和Westernblot显示，10～30gmol／L的sB．431542可剂量依赖性地抑制MMP-2的表达和活性。上述结果说明，SB-431542通过阻断Nodal信号通路可效抑制乳腺癌细胞BT-549的增殖、迁移和侵袭，其作用机制可能与降低MMP-2的表达和活性有关。
关键词
乳腺癌
NODAL
基质金属蛋白酶-2
SB-431542
Keywords
breast cancer cell
Nodal
MMP-2
SB-431542
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
针对ALK4基因的TALEN质粒构建与活性鉴定
被引量：
1
2
作者
曾凡才
顾洪
王轲
周红
机构
电子科技大
学
生命科
学
与
技术
学院
泸州
医学院
生物化学
与
分子生物学
实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期210-216,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(30972280)
四川省教育厅自然科学基金资助项目(11ZA241)
文摘
旨在利用类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)技术构建具有活性的敲除类激活素激酶受体4(Activin receptor-like kinase 4,ALK4)的TALEN质粒。利用TALEN在线设计工具,根据TALEN设计原则和ALK4剪接异构体的共同序列确定基因敲除的靶位点、TALEN识别序列和用于活性验证的限制性酶切位点。利用质粒文库试剂盒快速构建TALEN质粒,并通过酶切、测序和BLAST比对加以验证。应用脂质体转染法将构建质粒导入HEK293T细胞,通过共转染的pEGFP-N1质粒判断转染效率。利用嘌呤霉素进行阳性筛选后提取基因组DNA,PCR扩增靶序列,HhaⅠ酶切纯化后的PCR产物。结果显示,来自转染TALEN质粒细胞基因组的PCR产物的酶切效率明显下降,提示部分细胞的ALK4基因发生了突变。首次成功构建了在HEK293T细胞中有活性的TALEN质粒。
关键词
类激活素激酶受体4
类转录激活因子效应物核酸酶
基因敲除
HEK293T细胞
质粒构建
Keywords
Activin receptor-Like kinase 4 Transcription activator-like effector nuclease Gene knock-out HEK293T cell Plasmidconstruction
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
Nodal基因的剪接异构体分析
被引量：
1
3
作者
曾凡才
赵太强
莫冬阳
余文静
机构
泸州
医学院
生物化学
与
分子生物学
实验室
四川省人民医院检验科
出处
《内江师范学院学报》
2014年第8期41-47,共7页
基金
四川省教育厅自然科学基金重点项目(11ZA241)
泸州医学院大学生科研项目(2012028)
文摘
利用GenBank数据库中Nodal分子的核酸和蛋白相关信息,采用生物信息学方法分析Nodal的分子生物学特征及其剪接异构体.应用基因克隆方法克隆人Nodal基因.结果表明Nodal基因至少有四种剪接异构体,除研究较清楚的isoform 1相对完整外,其它剪接异构体信息并不完整、功能未知且表达可能有组织特异性.特别是虽然Nodal基因isoform 1的氨基酸编码序列已知,但是发现目前NCBI提供的Nodal基因mRNA参考序列并不完整.通过基因克隆发现一种新的Nodal基因剪接异构体,它可能具有TGF-β超家族的特征性结构,但功能未知.结果说明人Nodal基因可能至少存在5种剪接异构体,除isoform 1外,其它isoform具体功能还有待进一步研究.
关键词
NODAL
剪接异构体
生物信息学
表达序列标签
Keywords
Nodal
Nodal
splicing isoform
bioinformatics
EST
分类号
Q71 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞的蛋白质组学分析
4
作者
刘友平
刘晓燕
黄富礼
严冬梅
何涛
机构
泸州
医学院
生物化学
教研
室
医学
分子生物学
实验室
四川省高校重点
实验室
泸州
医学院
附属医院感染病科
出处
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期115-118,共4页
基金
四川省教育厅科技基金资助项目（2006c085）
四川省卫生厅科技基金资助项目（2007-431）
文摘
乙型肝炎（乙肝）是HBV感染所导致的免疫介导性疾病，即HBV本身并不致病，它对肝细胞的损伤主要是通过人体的免疫应答，如机体免疫反应正常，机体对感染的HBV表现为自限性痊愈（抗-HBs阳性）；如患者免疫调节功能紊乱，致使疾病迁延不愈而成为慢性乙肝^[1。-2。
关键词
病毒感染者
外周血单个核细胞
乙型肝炎
蛋白质组
机体免疫反应
HBV感染
抗-HBS阳性
学分
分类号
R51 [医药卫生—内科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SB-431542抑制乳腺癌细胞BT-549的增殖和侵袭及其机理研究
曾凡才
何宗洋
莫冬阳
周红
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
原文传递
2
针对ALK4基因的TALEN质粒构建与活性鉴定
曾凡才
顾洪
王轲
周红
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
下载PDF
职称材料
3
Nodal基因的剪接异构体分析
曾凡才
赵太强
莫冬阳
余文静
《内江师范学院学报》
2014
1
下载PDF
职称材料
4
乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞的蛋白质组学分析
刘友平
刘晓燕
黄富礼
严冬梅
何涛
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
原文传递
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