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抗庆大霉素单克隆抗体的制备及其初步应用 被引量：9
1
作者 职爱民 李青梅 +7 位作者 刘庆堂 刘宣兵 杨继飞 杨苏珍 柴书军 杨艳艳 邓瑞广 张改平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2584-2589,共6页
【目的】制备抗庆大霉素(gentamicin,GM)的高亲和力特异性单克隆抗体,并鉴定其免疫学特性,为进一步研究GM快速检测试剂盒和试纸条打下基础。【方法】用EDC法将BSA和OVA分别和GM偶联作为免疫原或包被原,并经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE... 【目的】制备抗庆大霉素(gentamicin,GM)的高亲和力特异性单克隆抗体,并鉴定其免疫学特性,为进一步研究GM快速检测试剂盒和试纸条打下基础。【方法】用EDC法将BSA和OVA分别和GM偶联作为免疫原或包被原,并经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定。用合成的BSA-GM免疫Balb/c小鼠,经过4次免疫后,用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、敏感的小鼠进行抗原超强免疫;取其脾细胞应用杂交瘤技术与骨髓瘤细胞建立分泌GM单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;用体内诱生腹水法制备GM mAb,对GM mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定,;应用阻断ELISA试验原理组装GM-Kit,并对鲜奶中添加的GM标准样品进行测定。【结果】SDS-PAGE电泳鉴定表明BSA-GM人工抗原偶联成功;免疫的3只小鼠血清抗体效价均达到10-3;其中2号小鼠血清GM抑制效价较高且IC50最低,达17.28 ng.mL-1,融合后筛选出5E2-D7、1A3-A9、5E2-A12和2A6-B5共6株敏感特异的杂交瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1﹕1600、1﹕800、1﹕800和1﹕800,腹水效价分别为1﹕2.05×107、1﹕5.12×106、1﹕2.56×106和1﹕2.56×106,5E2-D7株对GM的IC50为0.30 ng.mL-1,与链霉素、卡那霉素等其他氨基糖苷类抗生素无交叉反应性;检测鲜牛奶样的平均添加回收率分别为96.0%,平均变异系数均低于15%。【结论】本试验获得了高效价、敏感、特异的抗GM mAb,为GM残留检测奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 庆大霉素 单克隆抗体 杂交瘤 初步应用
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西马特罗杂交瘤细胞株的建立及其单克隆抗体制备和鉴定 被引量：7
2
作者 职爱民 李青梅 +6 位作者 刘庆堂 柴书军 赵丽娜 胡骁飞 杨艳艳 邓瑞广 张改平 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1011-1014,1031,共5页
用重氮化法将牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)分别与西马特罗(CIM)偶联作为免疫原或包被原,用BSA-CIM免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,OVA-CIM包被后用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、高敏感性和高特异性的小鼠进... 用重氮化法将牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)分别与西马特罗(CIM)偶联作为免疫原或包被原,用BSA-CIM免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,OVA-CIM包被后用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、高敏感性和高特异性的小鼠进行抗原超强免疫;取脾细胞应用杂交瘤技术与骨髓瘤细胞建立分泌CIM单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;用体内诱生腹水法制备CIM mAb,对CIM mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果显示免疫的6只小鼠血清抗体效价均达到10-3;融合后筛选出3B11-H4、2A11-G11和4F5-F11共3株敏感特异的杂交瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1∶800、1∶1600和1∶1600,腹水效价分别为1∶2.56×106、1∶1.02×107和1∶2.56×107,3B11-H4株对CIM的IC50为0.40ng/ml,与瘦肉精、莱克多巴胺等其他β2激动剂交叉反应性小于0.2%。本试验获得了高效价、敏感、特异的抗CIM mAb,为CIM残留ELISA检测试剂盒和试纸条的建立奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 西马特罗 杂交瘤 单克隆抗体
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特布他林杂交瘤细胞株的建立及其单克隆抗体制备与鉴定 被引量：2
3
作者 杨艳艳 职爱民 +6 位作者 刘庆堂 李靓 李青梅 柴书军 胡骁飞 邓瑞广 张改平 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期335-339,共5页
分别通过1,4丁二醚法和EDC法将特布他林偶联于载体蛋白BSA和OVA上,用BSA-TBL免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,OVA-TBL包被后用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、高敏感性和高特异性的小鼠进行抗原进行冲击免疫;无菌手... 分别通过1,4丁二醚法和EDC法将特布他林偶联于载体蛋白BSA和OVA上,用BSA-TBL免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,OVA-TBL包被后用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、高敏感性和高特异性的小鼠进行抗原进行冲击免疫;无菌手术取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合建立分泌TBL单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备TBL mAb,并对TBL mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果显示,免疫的6只小鼠血清抗体效价均达到10-4;融合后筛选出4C08-G5和3H3-A02共2株敏感特异的杂交瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1∶800和1∶1600,腹水效价分别为1∶2.56×105和1∶1.02×106;4C08-G5株分泌的抗体对TBL的IC50为5.25ng/ml,与瘦肉精、莱克多巴胺等其他β2激动剂交叉反应性小于3%。本试验获得了抗TBL mAb,为TBL残留免疫检测方法的建立奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 特布他林 杂交瘤 单克隆抗体 鉴定
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食品中重金属检测方法研究进展 被引量：19
4
作者 王磊 胡骁飞 +5 位作者 邢广旭 邓瑞广 职爱民 孙亚宁 赵丽娜 张改平 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1390-1392,共3页
随着经济的快速发展及生活水平的提高,人们对食品质量及卫生安全和自身健康问题越来越重视。中国每年因重金属污染的粮食达千万吨,美国每年因重金属污染损失在百亿美元以上。重金属污染问题已对中国的生态环境、食品安全、百姓身体健康... 随着经济的快速发展及生活水平的提高,人们对食品质量及卫生安全和自身健康问题越来越重视。中国每年因重金属污染的粮食达千万吨,美国每年因重金属污染损失在百亿美元以上。重金属污染问题已对中国的生态环境、食品安全、百姓身体健康和农业可持续发展构成了严重威胁。未经处理的重金属进入水或土壤中,通过食物链进入人体后不能被分解，会对人体健康造成潜在危害。为建立精确度高、检测灵敏、有效快速的检测方法提供科学依据，本研究就食品中重金属检测方法及其进展综述如下。 展开更多
关键词 重金属 食品污染 食品安全 检测方法
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猪α干扰素的表达及在PAM细胞系中抗PRRSV活性检测 被引量：9
5
作者 万博 鲍登克 +4 位作者 乔松林 徐德 杨苏珍 王彦斌 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第3期93-95,99,共4页
为研究猪α干扰素蛋白功能和了解猪α干扰素蛋白的抗病毒活性,扩增并测序了猪α干扰素基因(IFN-α),并克隆至原核表达载体pET-28a中,构建原核表达载体pET-IFN-α,将pET-IFN-α转化至BL21进行表达。Western-Blot结果表明,表达的蛋白具有... 为研究猪α干扰素蛋白功能和了解猪α干扰素蛋白的抗病毒活性,扩增并测序了猪α干扰素基因(IFN-α),并克隆至原核表达载体pET-28a中,构建原核表达载体pET-IFN-α,将pET-IFN-α转化至BL21进行表达。Western-Blot结果表明,表达的蛋白具有很好的生物学活性。用细胞病变抑制法在PAM细胞系上进行抗病毒活性测定,结果表明,猪α干扰素有较为显著的抗PRRSV活性,其抗病毒活性效价约为1.13×106U/mg。 展开更多
关键词 猪Α干扰素 表达 抗病毒活性 猪繁殖与呼吸综合征病毒
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传染性法氏囊病毒VP2蛋白抗原表位多肽P22的免疫原性及生物学功能鉴定 被引量：8
6
作者 宋幸辉 王睿 +6 位作者 王选年 鲍登克 杨苏珍 卢清侠 王寅彪 赵东 张改平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期692-697,共6页
为鉴定IBDV VP2蛋白线性B细胞抗原表位肽P22的免疫原性及生物学功能,作者采用固相多肽合成方法合成多肽P22,经纯化后用SMCC法分别与牛血清白蛋白(BSA)和细胞穿膜肽(PNT)进行偶联,得到免疫抗原P22-BSA和检测抗原P22-PNT;用P22-BSA免疫BAL... 为鉴定IBDV VP2蛋白线性B细胞抗原表位肽P22的免疫原性及生物学功能,作者采用固相多肽合成方法合成多肽P22,经纯化后用SMCC法分别与牛血清白蛋白(BSA)和细胞穿膜肽(PNT)进行偶联,得到免疫抗原P22-BSA和检测抗原P22-PNT;用P22-BSA免疫BALB/c小鼠3只,经3次免疫后得到多抗血清3份。应用ELISA检测了抗P22抗体的特异性,并通过抗P22多肽抗体作为特异性抗体检测了P22多肽结合CEF细胞的特性。结果经鉴定3份多抗血清均与P22多肽特异性反应,效价均达到1∶105,且能特异性检测P22多肽与CEF细胞的特异性结合。本试验成功制备了P22免疫原,获得了效价高、特异性较好的鼠源抗P22多抗血清,并证明P22多肽与CEF细胞能够特异性结合,为进一步研究多肽疫苗的设计或试纸条的研制及表位单抗的制备提供了新的思路和基础。 展开更多
关键词 IBDV VP2蛋白 P22多肽 抗原表位 免疫
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黄曲霉毒素B_1人工抗原及鼠源多克隆抗血清的制备 被引量：7
7
作者 王磊 胡骁飞 +3 位作者 职爱民 刘庆堂 孙亚宁 邓瑞广 《食品科技》 CAS 北大核心 2011年第3期277-281,共5页
目的:研究合成并鉴定了黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源AFB1多克隆抗血清。方法:采用N-羟琥珀酰亚胺酯(N-hydroxy-succinimide NHS)法将AFB1分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成... 目的:研究合成并鉴定了黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源AFB1多克隆抗血清。方法:采用N-羟琥珀酰亚胺酯(N-hydroxy-succinimide NHS)法将AFB1分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫抗原AFB1-BSA和包被抗原AFB1-OVA,采用紫外分光光度法和SDS-PAGE进行鉴定,通过动物免疫实验获得鼠源多抗血清,并使用间接ELISA和阻断ELISA的方法对多抗血清进行了鉴定。结果:结果表明半抗原AFB1分别和载体蛋白BSA及OVA偶联成功;免疫的6只小鼠效价均达1×10-4以上,3号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50(50% inhibitive concentration,IC50)为8.199ng/mL。结论:实验成功合成了AFB1人工抗原,并生产了高效价、高敏感性的鼠源多克隆抗体血清,为AFB1单克隆抗体制备及其快速检测试剂的研制奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 免疫原制备 合成 多抗血清 ELISA
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三聚氰胺的毒害作用及其残留检测 被引量：3
8
作者 职爱民 邓瑞广 +1 位作者 刘庆堂 张改平 《中国饲料》 北大核心 2009年第2期38-40,共3页
三聚氰胺是塑料工业中一种重要的有机化工中间产品,本文就三聚氰胺的理化特性、代谢机理、毒害作用以及残留检测方法等进行简要阐述。
关键词 三聚氰胺 毒害作用 残留检测
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诺氟沙星单克隆抗体的制备及其特性鉴定 被引量：5
9
作者 刘庆堂 职爱民 +5 位作者 李青梅 柴书军 赵东 张磊 邓瑞广 张改平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期716-720,共5页
为制备诺氟沙星单克隆抗体(MAb),用碳二亚胺法将诺氟沙星(Norfloxacin,NFLX)分别偶联于载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA),合成免疫原BSA-NFLX和包被原OVA-NFLX,并用紫外(UV)扫描、SDS-PAGE电泳和免疫小鼠进行鉴定;用BSA-NFLX免... 为制备诺氟沙星单克隆抗体(MAb),用碳二亚胺法将诺氟沙星(Norfloxacin,NFLX)分别偶联于载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA),合成免疫原BSA-NFLX和包被原OVA-NFLX,并用紫外(UV)扫描、SDS-PAGE电泳和免疫小鼠进行鉴定;用BSA-NFLX免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立分泌NFLX MAb的细胞株,用体内诱生腹水法制备NFLX MAb;对NFLX MAb的效价、敏感性和特异性等特性进行测定。结果表明:NFLX人工抗原制备成功,融合筛选后获得3C6、3G11两株特异敏感的杂交瘤细胞,两株细胞培养上清液效价为1∶512,腹水效价为1∶6.4×105,3C6株对NFLX的IC50为2.52μg/L,与二氟沙星、沙拉沙星有小于0.03%的交叉反应性,与其他抑制物无交叉反应性。本实验获得了高效价、敏感、特异的抗NFLXMAb,为NFLX残留快速检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 诺氟沙星 单克隆抗体 免疫学特性
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2,4-二氯苯氧乙酸人工抗原合成及鼠源多克隆抗血清的制备 被引量：4
10
作者 龚芳 席俊 +4 位作者 职爱民 胡骁飞 邓瑞广 张改平 陆启玉 《食品科技》 CAS 北大核心 2012年第9期315-319,共5页
采用碳化二亚胺法(EDC法)将2,4-D与牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联,合成免疫原2,4-D-BSA和包被原2,4-D-OVA,采用紫外扫描(UV)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法进行鉴定;用2,4-D人工免疫抗原(2,4-D-BSA)免疫BALB/c纯系小鼠,采用... 采用碳化二亚胺法(EDC法)将2,4-D与牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联,合成免疫原2,4-D-BSA和包被原2,4-D-OVA,采用紫外扫描(UV)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法进行鉴定;用2,4-D人工免疫抗原(2,4-D-BSA)免疫BALB/c纯系小鼠,采用间接ELISA测定多抗血清效价、阻断ELISA鉴定其抑制。结果表明:BSA与2,4-D偶联后,波峰出现右移,表明偶联成功;SDS-PAGE电泳中BSA的泳动速度大于2,4-D-BSA,表明2,4-D已与BSA成功偶联;6只小鼠血清效价均达到了1:1.28×104,且1号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制IC50为72.48ng/mL,表明成功获得了高效价、特异性好、亲和力较高的鼠源抗2,4-D多克隆抗体血清,为2,4-D残留免疫学检测方法的建立奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 2 4-D 人工抗原 合成 多抗血清 ELISA
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猪O型FMDV抗体检测试纸条与ELISA对比试验 被引量：3
11
作者 杨继飞 杨苏珍 +7 位作者 焦海燕 邓瑞广 杨艳艳 赵东 邢广旭 柴书军 李学伍 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第4期112-115,共4页
为初步评价研制的猪O型FMDV抗体检测试纸条的性能,检测了免疫FMDV多肽疫苗20 d后制备的猪血清(143份),并对比FMDV VP1抗体检测ELISA试剂盒的检测结果。结果显示,二者的符合率为100%。猪O型FMDV抗体检测试纸条特异、敏感、快速、简便,具... 为初步评价研制的猪O型FMDV抗体检测试纸条的性能,检测了免疫FMDV多肽疫苗20 d后制备的猪血清(143份),并对比FMDV VP1抗体检测ELISA试剂盒的检测结果。结果显示,二者的符合率为100%。猪O型FMDV抗体检测试纸条特异、敏感、快速、简便,具有广阔的推广应用前景。 展开更多
关键词 FMDV 试纸条 ELISA 抗体
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抗黄曲霉毒素B1单抗制备及免疫学定量方法建立 被引量：4
12
作者 王磊 胡骁飞 +5 位作者 滕蔓 王耀 孙亚宁 裴亚峰 张改平 邓瑞广 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期58-60,共3页
目的本研究合成并鉴定了AFB1人工抗原,制备AFB1的单克隆抗体(AFB1mAb)。方法采用NHS法将AFB1分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成W人工抗原AFB1-BSA和AFB1-OVA,紫外分光光度法和SDS-PAGE进行鉴定;AFB1-BSA免疫BALB/C小鼠,通过间接EL... 目的本研究合成并鉴定了AFB1人工抗原,制备AFB1的单克隆抗体(AFB1mAb)。方法采用NHS法将AFB1分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成W人工抗原AFB1-BSA和AFB1-OVA,紫外分光光度法和SDS-PAGE进行鉴定;AFB1-BSA免疫BALB/C小鼠,通过间接ELISA和阻断ELISA法选择细胞融合备用鼠;用杂交瘤技术制备AFB1mAb,并对其效价、亲和力、敏感性、特异性、亚型进行鉴定;体内诱生腹水法大量制备单抗。结果 UV图谱和SDS-PAGE图表明结半抗原AFB1和载体BSA及OVA偶联成功;筛选出2H5-F6、2H5-C9、2H9-C3三株杂交瘤细胞;鉴定单抗亚型均为IgG1;细胞上清效价1∶2.0×102～1∶1.28×103,2H5-F6的腹水效价1∶1.28×106,AFB1mAb亲和常数Ka为2.65×1010 L/moL,对AFB1的IC50为2.58 ng/mL;与AFB2的交叉反应率为1.61%,与其他类药物无交叉反应。结论通过试验获得高效价、敏感、特异的AFB1mAb,可用于各种食品中AFB1残留的快速免疫学检测试验。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 单克隆抗体 免疫学特性
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苯乙醇胺A人工抗原的制备与鉴定 被引量：3
13
作者 蔡齐超 胡骁飞 +5 位作者 侯玉泽 王耀 殷萌琪 王方雨 邓瑞广 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第7期150-155,共6页
为合成苯乙醇胺A人工抗原,并制备出鼠源苯乙醇胺A多抗血清,采用琥珀酸酐法改造苯乙醇胺A,应用活化脂法(DCC)和碳二亚胺法(EDC)与载体蛋白相连,合成人工免疫原苯乙醇胺A-BSA和检测原苯乙醇胺A-OVA,并用紫外扫描光谱法、凝胶电泳法(SDS-PA... 为合成苯乙醇胺A人工抗原,并制备出鼠源苯乙醇胺A多抗血清,采用琥珀酸酐法改造苯乙醇胺A,应用活化脂法(DCC)和碳二亚胺法(EDC)与载体蛋白相连,合成人工免疫原苯乙醇胺A-BSA和检测原苯乙醇胺A-OVA,并用紫外扫描光谱法、凝胶电泳法(SDS-PAGE)和酶联免疫吸附法(ELISA)鉴定偶联结果。结果显示,在紫外扫描光谱下,合成的免疫原在276nm处出现最大吸收峰;SDS-PAGE电泳发现,免疫原出现明显的拖尾现象;按10μg/只的剂量免疫小鼠,共免疫4次,每次间隔3周,最后1次免疫10d后,断尾采血,经测定,得到的多抗血清的效价均达到1∶10000,且1号小鼠多抗血清的敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为536.8ng/mL,与其他药物的交叉反应率均小于0.5%,具有很好的特异性。成功合成了苯乙醇胺A人工抗原,并得到了敏感性高、特异性好的多抗血清。 展开更多
关键词 苯乙醇胺A 人工抗原 多抗血清 酶联免疫吸附法
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特布他林人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备 被引量：3
14
作者 职爱民 王磊 +5 位作者 刘庆堂 胡骁飞 杨苏贞 柴书军 邓瑞广 张改平 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第7期1-5,共5页
合成并鉴定特布他林(Terbutaline,TBL)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源TBL多克隆抗血清。分别通过1,4丁二醚法和EDC法将特布他林偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫抗原BSA-TBL和包被抗原OVA-TBL,并采用紫外分... 合成并鉴定特布他林(Terbutaline,TBL)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源TBL多克隆抗血清。分别通过1,4丁二醚法和EDC法将特布他林偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫抗原BSA-TBL和包被抗原OVA-TBL,并采用紫外分光光度法和SDS-PAGE进行鉴定,通过动物免疫试验获得鼠源多抗血清,并使用ELISA和阻断ELISA的方法对多抗血清进行了鉴定。结果表明半抗原TBL分别和载体蛋白BSA及OVA偶联成功;受免6只小鼠效价均达1×10-4以上,且1号小鼠多抗血清抗TBL的IC50为55.88ng/mL。试验成功合成了TBL人工抗原,并生产了高效价、高敏感性的鼠源多克隆抗血清,为TBL单克隆抗体制备及其快速检测试剂的研制奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 特布他林 人工抗原 合成 多抗血清
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孔雀石绿的毒性及其残留检测研究进展 被引量：3
15
作者 赵丽娜 侯玉泽 +2 位作者 张改平 职爱民 胡骁飞 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第2期76-78,共3页
孔雀石绿因其低廉的价格和良好的效果,被广泛应用于水产养殖业,但因其对动物及人体的严重毒害作用而受到越来越多的关注。文章就孔雀石绿的毒副作用、检测技术的研究进展及其在食品安全性检测中的应用前景进行了综述,旨在促进孔雀石绿... 孔雀石绿因其低廉的价格和良好的效果,被广泛应用于水产养殖业,但因其对动物及人体的严重毒害作用而受到越来越多的关注。文章就孔雀石绿的毒副作用、检测技术的研究进展及其在食品安全性检测中的应用前景进行了综述,旨在促进孔雀石绿检测技术的发展及提高大众食品安全意识。 展开更多
关键词 孔雀石绿(MG) 检测 残留 毒性
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链霉素金标单克隆抗体快速检测试纸的研制及其特性鉴定 被引量：2
16
作者 刘庆堂 职爱民 +4 位作者 邓瑞广 杨艳艳 杨继飞 柴书军 张改平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第5期85-89,共5页
建立了分泌抗链霉素单克隆抗体(STRmAb)杂交瘤细胞株并生产了STRmAb,采用胶体金免疫层析试验(GICA)技术成功研制出STR残留快速检测试纸(STR-Strip),并对其性能进行了鉴定。结果显示,目测检测限为12.5μg/kg;与氯霉素等药物无交叉反应;... 建立了分泌抗链霉素单克隆抗体(STRmAb)杂交瘤细胞株并生产了STRmAb,采用胶体金免疫层析试验(GICA)技术成功研制出STR残留快速检测试纸(STR-Strip),并对其性能进行了鉴定。结果显示,目测检测限为12.5μg/kg;与氯霉素等药物无交叉反应;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%。研制的快速检测试纸可以在10min内显示结果,具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合STR残留的现场快速检测。 展开更多
关键词 链霉素 金标快速检测试纸 单克隆抗体 特性鉴定
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猪小肠粘膜上皮细胞的分离及体外原代培养模型的建立 被引量：2
17
作者 职爱民 左建军 +2 位作者 黄志毅 邹仕庚 冯定远 《饲料工业》 北大核心 2010年第1期10-13,共4页
用机械刮取小肠粘膜加胶原酶Ⅱ消化的方法，采用新生未吮乳仔猪小肠组织，成功地分离了猪小肠粘膜上皮细胞（Intestinal epithelial cells，IEC）且在体外培养传代，并采用碱性磷酸酶和角蛋白免疫学试验鉴定，结果表明：体外培养的猪IEC... 用机械刮取小肠粘膜加胶原酶Ⅱ消化的方法，采用新生未吮乳仔猪小肠组织，成功地分离了猪小肠粘膜上皮细胞（Intestinal epithelial cells，IEC）且在体外培养传代，并采用碱性磷酸酶和角蛋白免疫学试验鉴定，结果表明：体外培养的猪IEC在DMEM—F12培养基中，细胞在1～2d贴壁，5～6d形成细胞克隆，9～11d融合成片；碱性磷酸酶和生物素标记的细胞角蛋白抗体鉴定结果显示90％培养的细胞为阳性，分别从生化的角度证明和细胞生物学角度鉴定了所培养的细胞为IEC。 展开更多
关键词 猪 小肠粘膜细胞 原代培养
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马杜霉素对人体健康危害及其检测方法研究进展 被引量：2
18
作者 张小辉 张改平 +5 位作者 职爱民 胡骁飞 龚芳 赵启发 王耀 侯玉泽 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期145-147,共3页
马杜霉素又名马度米星、马度米星铵,是一种聚醚类离子载体抗生素。早在1983年由liu和labeda在微生物Actinomadura yumaensis的发酵产物中分离而得[1]。由于马杜霉素具有抗球虫谱广、活性高、用药量小和球虫不易产生耐药性等优点,被广泛... 马杜霉素又名马度米星、马度米星铵,是一种聚醚类离子载体抗生素。早在1983年由liu和labeda在微生物Actinomadura yumaensis的发酵产物中分离而得[1]。由于马杜霉素具有抗球虫谱广、活性高、用药量小和球虫不易产生耐药性等优点,被广泛添加在动物饲料中[2]。 展开更多
关键词 马杜霉素 危害 检测方法
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我国动物疫病防控的问题与思考 被引量：2
19
作者 张改平 《中国家禽》 北大核心 2011年第1期2-4,共3页
文章对我国当前动物疫病形势进行简单概括,重点探讨动物疫病防控存在的问题与困惑,并从抗原和抗体两个方面介绍免疫试纸检测技术的成果与应用,提出新型疫苗理念。指出建立和完善疫苗检测技术和免疫评价技术是解决当前动物疫病防控问题... 文章对我国当前动物疫病形势进行简单概括,重点探讨动物疫病防控存在的问题与困惑,并从抗原和抗体两个方面介绍免疫试纸检测技术的成果与应用,提出新型疫苗理念。指出建立和完善疫苗检测技术和免疫评价技术是解决当前动物疫病防控问题的重要途径;强调动物免疫潜力是有限的,应尽量少用或使用高效疫苗,确保用则有效。 展开更多
关键词 动物疫病 检测试纸 新型疫苗 免疫评价
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奶山羊胎儿成纤维细胞系的建立及其生物学特性分析 被引量：1
20
作者 马呈瑞 常卫华 +3 位作者 曹会萍 张改平 卢清侠 张勇 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期16-20,共5页
试验分别采用组织块贴壁法和消化分离法对奶山羊胎儿成纤维细胞进行体外培养,通过原代培养、细胞传代、冷冻保存等成功建立了奶山羊胎儿成纤维细胞系,并对该细胞系进行了形态学观察、生长动力学分析、细胞活力测定、核型分析和微生物检... 试验分别采用组织块贴壁法和消化分离法对奶山羊胎儿成纤维细胞进行体外培养,通过原代培养、细胞传代、冷冻保存等成功建立了奶山羊胎儿成纤维细胞系,并对该细胞系进行了形态学观察、生长动力学分析、细胞活力测定、核型分析和微生物检测等多种生物学特性分析.结果表明:成纤维细胞原代培养采用贴块培养时所需时间较长,消化培养有较多死细胞;传代细胞生长情况良好,群体倍增时间(PDT)约为40.4h;生长总体趋势呈"S"型;冻存后活力为92.3%,生长状况与冻存前一致;细胞染色体中二倍体(2 n=60)占主体;细菌、真菌和支原体检测结果均为阴性,细胞系的各项指标均达到ATCC细胞系鉴定标准. 展开更多
关键词 奶山羊 成纤维细胞系 细胞培养 生物学特性
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