基于质量源于设计理念的降脂护肝方提取工艺研究

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作者 吴作敏 李恒 +5 位作者 王韵旨 宁萌 郭丽 李宜涵 金少举 王瑞 《中南药学》 CAS 2024年第4期984-990,共7页

目的 基于质量源于设计理念,优化降脂护肝方的提取工艺。方法 以提取次数、提取时间、加水倍量为关键工艺参数(CPPs),应用正交设计从黄芪甲苷、甜菜碱、多糖含量及出膏率4项潜在关键质量属性(CQAs)中筛选CPPs对应的CQAs,通过Box-Behnke... 目的 基于质量源于设计理念,优化降脂护肝方的提取工艺。方法 以提取次数、提取时间、加水倍量为关键工艺参数(CPPs),应用正交设计从黄芪甲苷、甜菜碱、多糖含量及出膏率4项潜在关键质量属性(CQAs)中筛选CPPs对应的CQAs,通过Box-Behnken设计确定CQAs,并建立数学模型分析CPPs与CQAs之间的交互作用,最后建立设计空间并验证。结果 根据Box-Behnken试验确定甜菜碱的含量与出膏率为CQAs。通过设计空间的优化,得到最佳提取工艺为加10倍量水,提取3次,每次1.5 h。结论 本研究优选的提取工艺稳定可靠,可为降脂护肝方的制备及质量控制提供参考。 展开更多

关键词 质量源于设计 降脂护肝方 提取工艺 BOX-BEHNKEN设计 设计空间

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重组人Tim-3蛋白的制备及基于亲和超滤-液质联用技术的天然配体筛选 被引量：2

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作者 杨忠杰 李森森 +3 位作者 曹娟 应真真 张永威 王瑞 《药物评价研究》 CAS 2023年第3期545-551,共7页

目的构建人T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(Tim-3)-His表达载体,表达纯化Tim-3重组蛋白,建立亲和超滤-液质联用技术筛选Tim-3蛋白天然配体。方法利用DNA重组技术构建人Tim-3-His表达质粒,转染HEK293细胞表达Tim-3重组蛋白,通过Ni柱亲和色谱柱... 目的构建人T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(Tim-3)-His表达载体,表达纯化Tim-3重组蛋白,建立亲和超滤-液质联用技术筛选Tim-3蛋白天然配体。方法利用DNA重组技术构建人Tim-3-His表达质粒,转染HEK293细胞表达Tim-3重组蛋白,通过Ni柱亲和色谱柱进行蛋白纯化,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析Tim-3重组蛋白纯度。10μL受试物(黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、白术内酯Ⅰ、芒柄花黄素、毛蕊异黄酮)溶液、180μL磷酸盐缓冲溶液(pH 7.4,50 mmol·L−1)与10μL Tim-3(0.84 mg·mL^(−1))混合,在37°C黑暗孵育1 h后,转移至1×10^(4)超滤离心管中以12000 r·min^(−1)离心10 min,将沉淀加入200μL甲醇-水(90∶10)中室温解离10 min,12000 r·min^(−1)离心10 min,收集滤液,进行UPLC-MS/MS分析。通过比较受试物组和Tim-3蛋白变性组中超滤液中待测物的峰面积,计算各待测物特异结合率。结果经双酶切及测序鉴定证明,人Tim-3-His重组表达质粒构建正确;纯化的人Tim-3重组蛋白质量分数达90%以上;建立的亲和超滤-液质联用筛选体系专属性、精密度、重复性、稳定性良好;白术内酯Ⅰ可与Tim-3蛋白特异性结合。结论成功表达了可溶性、高纯度的人Tim-3重组蛋白,成功建立亲和超滤-液质联用筛选体系,白术内酯Ⅰ可与Tim-3蛋白特异性结合。 展开更多

关键词 T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3 重组蛋白 亲和超滤-液质联用 白术内酯Ⅰ

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基于层次分析-熵权法优选温肺平喘汤的提取工艺

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作者 王博 王瑞 +2 位作者 王佳 吴作敏 于晓涛 《中国现代中药》 CAS 2024年第2期364-369,共6页

目的:采用层次分析(AHP)-熵权法(EWM)建立多指标综合评价复方的方法,优化温肺平喘汤的提取工艺。方法:以芍药苷、甘草苷、迷迭香酸、丹酚酸B、甘草酸含量和干浸膏得率为评价指标,采用AHPEWM确定权重系数,通过L9(34)正交设计考察加水倍... 目的:采用层次分析(AHP)-熵权法(EWM)建立多指标综合评价复方的方法,优化温肺平喘汤的提取工艺。方法:以芍药苷、甘草苷、迷迭香酸、丹酚酸B、甘草酸含量和干浸膏得率为评价指标,采用AHPEWM确定权重系数,通过L9(34)正交设计考察加水倍量、提取时间、提取次数对温肺平喘汤提取工艺的影响。结果:最佳提取工艺为8倍量水提取3次,每次1 h。结论:优选的提取工艺重复性好、稳定性好、提取率高,适用于温肺平喘汤的标准化生产。 展开更多

关键词 温肺平喘汤 提取工艺 层次分析-熵权法 丹酚酸B

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基于数据挖掘的中成药治疗脑卒中用药规律分析 被引量：4

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作者 吴作敏 金少举 +4 位作者 王韵旨 王隆隆 宁萌 陈恒文 王瑞 《中国合理用药探索》 2022年第7期38-44,共7页

目的:挖掘分析治疗脑卒中的中成药的组方规律,探讨高频中药配伍规则。方法:收集《中国药典》(2020版)与《中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂》(全20册)中有治疗脑卒中功效的中成药处方信息,对涉及中药进行频次、关联规则... 目的:挖掘分析治疗脑卒中的中成药的组方规律,探讨高频中药配伍规则。方法:收集《中国药典》(2020版)与《中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂》(全20册)中有治疗脑卒中功效的中成药处方信息,对涉及中药进行频次、关联规则与系统聚类分析。结果:纳入61种中成药,涉及中药253味,单味药中川芎(31次,50.82%)、当归(28次,45.90%)应用次数最多。应用频率>20%的中药共计26味,以其作为高频中药进行统计分析,其中药性以温(206例次,43.37%)为主;药味以甘(235例次,35.07%)、辛(228例次,34.03%)为主;归经以肝经(275例次,24.77%)、心经(271例次,24.41%)、脾经(246例次,22.16%)为主;类别以补虚药(106次,22.13%)、活血化瘀药(89次,18.58%)为主。关联性药味组合15个,高频中药聚类分析形成4个类别。结论:用于治疗脑卒中的中药主要功效为活血化瘀、益气补虚、平肝息风、安神开窍、清热凉血,佐以健脾利湿、解表散寒。 展开更多

关键词 中成药 脑卒中 用药规律 数据挖掘 关联规则 聚类分析

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AHP-CRITIC法结合正交设计优化红黄丹酊提取工艺

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作者 吴作敏 于晓涛 +2 位作者 王韵旨 宁萌 王瑞 《食品与药品》 CAS 2023年第6期488-493,共6页

目的 优选红黄丹酊复方的制备工艺。方法 以羟基红花黄色素A(HYSA)、大黄游离蒽醌的提取率和总固体得率作为考察指标,通过层次分析法(AHP)、基于指标相关性确定权重的方法(CRITIC)及AHP-CRITIC混合加权法对各指标的权重系数赋值,应用综... 目的 优选红黄丹酊复方的制备工艺。方法 以羟基红花黄色素A(HYSA)、大黄游离蒽醌的提取率和总固体得率作为考察指标,通过层次分析法(AHP)、基于指标相关性确定权重的方法(CRITIC)及AHP-CRITIC混合加权法对各指标的权重系数赋值,应用综合评分法对正交试验结果进行分析,优选红黄丹酊剂的的制备工艺参数。结果 AHP-CRITIC混合加权法科学合理,优选出的最佳制备工艺为4倍量50%乙醇浸渍10 d。结论 优选的制备工艺简便、稳定、成本低,可用于红黄丹酊的制备。 展开更多

关键词 红黄丹酊 羟基红花黄色素A 游离蒽醌 AHP-CRITIC法 正交设计 综合评分

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蒲蓝利咽合剂的指纹图谱建立及含量测定 被引量：3

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作者 王博 于晓涛 +2 位作者 刘玉萍 赫振玉 王瑞 《中国药房》 CAS 北大核心 2022年第22期2753-2757,共5页

目的建立蒲蓝利咽合剂的指纹图谱和绿原酸等8种成分的含量测定方法,以评价蒲蓝利咽合剂的质量。方法以黄芩苷为参照峰,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立11批蒲蓝利咽合剂的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,指认共有峰并... 目的建立蒲蓝利咽合剂的指纹图谱和绿原酸等8种成分的含量测定方法,以评价蒲蓝利咽合剂的质量。方法以黄芩苷为参照峰,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立11批蒲蓝利咽合剂的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,指认共有峰并进行相似度评价,采用SPSS 20.0、SIMCA 14.1软件进行聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析,以变量重要性投影(VIP)值大于1为指标筛选影响蒲蓝利咽合剂质量的标志物;采用相同的HPLC法测定绿原酸等8种成分的含量。结果11批蒲蓝利咽合剂指纹图谱共有20个共有峰,相似度在0.973~0.994之间;指认了8个共有峰,分别为绿原酸、咖啡酸、马钱苷、菊苣酸、木蝴蝶苷B、黄芩苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸、汉黄芩苷。聚类分析结果显示,11批样品分为2大类,其中S3、S10~S11为一类,其余为一类。主成分分析结果显示,前4个主成分的累计方差贡献率为95.546%,其分类结果与聚类分析结果一致。正交偏最小二乘法-判别分析结果显示,15、14(黄芩苷)、10、18(汉黄芩苷)、11、17(千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸)、4、20、16、12、7、19号峰的VIP值大于1。11批样品中绿原酸、咖啡酸、马钱苷、菊苣酸、木蝴蝶苷B、黄芩苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸、汉黄芩苷的含量分别为0.287~1.021、0.163~0.485、0.735~3.641、0.587~4.012、1.920~9.063、37.443~115.974、3.623~13.942、7.135~18.736 mg/g。结论建立的蒲蓝利咽合剂HPLC指纹图谱及绿原酸等8种成分的含量测定方法,可用于该制剂的质量评价;黄芩苷、汉黄芩苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸等12种成分可能是影响蒲蓝利咽合剂质量的标志物。 展开更多

关键词 蒲蓝利咽合剂 指纹图谱 含量测定 高效液相色谱法 化学模式识别分析

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LC-MS/MS同时测定芪桂苓合剂中7个成分 被引量：1

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作者 王博 杨忠杰 +3 位作者 裴媛 荣晓哲 刘玉萍 王瑞 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期2202-2209,共8页

目的:建立UPLC-MS/MS法快速测定芪桂苓合剂中黄芪甲苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、甘草苷、甘草酸、橙皮苷、柴胡皂苷a的含量。方法:采用Kinetex C_(18) 100A色谱柱(50 mm×2.1 mm,2.6μm);流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-5 mmol... 目的:建立UPLC-MS/MS法快速测定芪桂苓合剂中黄芪甲苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、甘草苷、甘草酸、橙皮苷、柴胡皂苷a的含量。方法:采用Kinetex C_(18) 100A色谱柱(50 mm×2.1 mm,2.6μm);流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-5 mmol·L^(-1)乙酸铵甲醇(B),梯度洗脱;流速为0.3 mL·min^(-1)。结果:黄芪甲苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、甘草苷、甘草酸、橙皮苷、柴胡皂苷a的质量浓度分别在0.09798~4.899、0.03164~1.582、0.03212~1.606、0.052~2.6、0.06075~3.0375、0.30654~15.327、0.024~1.2 mg·L^(-1)内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率为95.4%~105.0%。4个批次样品中,7个成分的质量浓度依次为1.0744~1.104、0.2799~0.2887、0.5195~0.5455、0.4378~0.4786、0.5703~0.6543、1.1234~1.3636、0.5673~0.5974 g·L^(-1)。结论:该方法快速、灵敏、准确,可为芪桂苓合剂的质量评价提供参考。 展开更多

关键词 芪桂苓合剂 皂苷 色原酮 液质联用法 含量测定 中药多成分分析

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基于生物信息学筛选特发性肺纤维化差异基因及中药预测 被引量：1

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作者 于晓涛 杨忠杰 +3 位作者 应真真 裴瑗 张永威 王瑞 《中医药信息》 2022年第9期68-74,84,共8页

目的:采用生物信息学方法研究特发性肺纤维化(IPF)基因芯片数据,筛选差异表达基因,同时预测治疗特发性肺纤维化的潜在中药药物,探讨致病的潜在靶点及治疗药物。方法:从GEO数据库下载特发性肺纤维化数据并筛选差异表达基因(DEGs),利用STR... 目的:采用生物信息学方法研究特发性肺纤维化(IPF)基因芯片数据,筛选差异表达基因,同时预测治疗特发性肺纤维化的潜在中药药物,探讨致病的潜在靶点及治疗药物。方法:从GEO数据库下载特发性肺纤维化数据并筛选差异表达基因(DEGs),利用STRING建立差异表达基因的蛋白互作网络并筛选关键基因(Hub genes),对关键基因进行GO功能注释与KEGG通路富集分析,最终通过Connectivity Map平台对关键基因筛选可能的治疗中药。结果:筛选出343个DEGs;PPI网络分析筛选出CCL2、SKIV2L2、SPP1、HSP90AA1、POLR2B等15个关键基因;GO分析表明,关键基因参与细胞外基质、细胞外基质的组织、胶原蛋白分解代谢的过程、细胞外基质结构成分等生物过程;KEGG通路分析显示,DEGs主要富集于糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、蛋白质消化吸收、IL-17信号通路、血小板激活、PI3K/Akt信号通路、细胞外基质受体相互作用等信号通路;并从CCL2、SKIV2L2、SPP1等12个关键基因筛选得到黄芪、三七、黄芩、丹参、党参等多味具有潜在疗效的中药。结论:本研究筛选了特发性肺纤维化的差异表达基因,明确了在IPF中关键基因及潜在的治疗性中药,为IPF临床治疗的新靶点及新药研发提供了新的方向。 展开更多

关键词 特发性肺纤维化 生物信息学 关键基因 中药预测

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正交试验-多指标权重分析法优选芪苓益肾颗粒的提取工艺 被引量：10

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作者 林帅军 郭丽 +3 位作者 荣晓哲 杜跃亮 王瑞 于晓涛 《现代药物与临床》 CAS 2021年第11期2259-2263,共5页

目的优选芪苓益肾颗粒的提取工艺。方法以黄芪甲苷得率、总多糖得率、干膏得率的综合评分为评价指标,采用层次分析法(AHP)确定这3个指标权重系数,设计L9(34)正交试验筛选最佳加水量、提取次数和提取时间,并进行验证试验。结果以AHP法确... 目的优选芪苓益肾颗粒的提取工艺。方法以黄芪甲苷得率、总多糖得率、干膏得率的综合评分为评价指标,采用层次分析法(AHP)确定这3个指标权重系数,设计L9(34)正交试验筛选最佳加水量、提取次数和提取时间,并进行验证试验。结果以AHP法确定的权重系数合理有效。筛选的最优提取工艺为加8倍量水,提取3次,每次1 h。3次验证试验结果显示,黄芪甲苷、总多糖、干膏得率的平均值分别为0.10%、2.51%、43.09%;平均综合评分为99.88,RSD值为0.03%。结论正交试验设计结合AHP确定的多指标权重系数法可较好地优化芪苓益肾颗粒的提取工艺。 展开更多

关键词 芪苓益肾颗粒 层次分析法 正交试验 黄芪甲苷 总多糖 干膏得率 提取工艺

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AHP-CRITIC法结合正交设计优选丹参心脑通胶囊提取工艺 被引量：3

10

作者 郭丽 赵变 +3 位作者 吴作敏 王瑞 金少举 于晓涛 《辽宁中医杂志》 CAS 2023年第1期130-134,共5页

目的通过正交试验设计优选丹参心脑通胶囊的提取工艺,为其后续制备工艺的研究提供参考。方法采用HPLC-UV法测定丹酚酸B、葛根素的含量,采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测器(RP-HPLC-ELSD)法测定黄芪甲苷的含量,通过AHP-CRITIC法赋予... 目的通过正交试验设计优选丹参心脑通胶囊的提取工艺,为其后续制备工艺的研究提供参考。方法采用HPLC-UV法测定丹酚酸B、葛根素的含量,采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测器(RP-HPLC-ELSD)法测定黄芪甲苷的含量,通过AHP-CRITIC法赋予指标性成分含量和干膏得率的权重系数,以综合评分为最终评价指标,优选提取工艺并进行验证试验。结果AHP-CRITIC法确定的权重系数科学、有效,优选的提取工艺条件为处方加8倍量水提取2次,每次1.5h。验证试验结果显示,综合评分均值为98.26(RSD=0.67%,n=3)。结论优选的提取工艺稳定性和重复性强,可以为丹参心脑通胶囊制备工艺的研究提供实验数据。 展开更多

关键词 丹参心脑通胶囊 AHP-CRITIC法 正交设计 丹酚酸B 葛根素 黄芪甲苷

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基于指纹图谱及化学模式识别的归芪通脉合剂质量评价 被引量：3

11

作者 王韵旨 郭丽 +5 位作者 吴作敏 宁萌 应真真 金少举 于晓涛 王瑞 《中国药房》 CAS 北大核心 2022年第20期2503-2507,共5页

目的建立归芪通脉合剂的指纹图谱,结合化学模式识别评价其质量。方法以芸香柚皮苷为参照峰,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立13批归芪通脉合剂的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,指认共有峰并进行相似度评价;进行层次聚... 目的建立归芪通脉合剂的指纹图谱,结合化学模式识别评价其质量。方法以芸香柚皮苷为参照峰,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立13批归芪通脉合剂的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,指认共有峰并进行相似度评价;进行层次聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),以变量重要性投影(VIP)值大于1为标准筛选影响制剂质量的差异标志物。结果13批归芪通脉合剂指纹图谱共有19个共有峰,相似度为0.928~0.990;指认了8个共有峰,分别为7号峰(羟基红花黄色素A)、8号峰(芍药内酯苷)、9号峰(芍药苷)、10号峰(毛蕊异黄酮葡萄糖苷)、12号峰(甘草苷)、14号峰(甘草酸铵)、16号峰(芸香柚皮苷)、19号峰(橙皮苷)。HCA结果显示,13批样品可分为3类,其中S5、S9、S11~S13为一类,S4、S8为一类,S1~S3、S6~S7、S10为一类。PCA结果显示,主成分1~7的累计方差贡献率为92.115%。OPLS-DA结果显示,芸香柚皮苷、芍药苷、甘草苷、甘草酸铵和11、1号峰对应成分的VIP值均大于1。结论建立了归芪通脉合剂的HPLC指纹图谱,结合化学模式识别技术可用于评价该制剂的整体质量;芸香柚皮苷等6个成分是影响归芪通脉合剂质量的差异标志物。 展开更多

关键词 归芪通脉合剂 高效液相色谱法 指纹图谱 化学模式识别分析 差异标志物 质量评价

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