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钩藤碱通过Nrf2/HO-1信号通路抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤 被引量:3
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作者 王西彬 左瑞庭 +2 位作者 王新立 李浩亮 刘汝银 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期966-970,986,共6页
目的 探讨钩藤碱对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡、氧化应激和炎症等损伤的影响及其分子机制。方法 将大鼠软骨细胞分为对照组、IL-1β(10 ng/mL)组、IL-1β+钩藤碱(5、25、50μmol/L)组;MTT实验检测钩藤碱对细胞活性的影响;Western blot方... 目的 探讨钩藤碱对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡、氧化应激和炎症等损伤的影响及其分子机制。方法 将大鼠软骨细胞分为对照组、IL-1β(10 ng/mL)组、IL-1β+钩藤碱(5、25、50μmol/L)组;MTT实验检测钩藤碱对细胞活性的影响;Western blot方法检测Bcl2、Bax、MMP3、MMP13、CollagenⅡ、Nrf2和HO-1蛋白水平;ELISA方法检测炎性因子PGE2、COX-1、TNF-α和ROS水平;试剂盒检测MDA水平。结果 与对照组相比,IL-1β组细胞活性明显抑制(P<0.05);与IL-1β组相比,钩藤碱25μmol/L组和50μmol/L组细胞活性增强(P<0.05)。与对照组相比,IL-1β组Bcl2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加(P<0.05);与IL-1β组相比,钩藤碱25μmol/L组和50μmol/L组Bcl2蛋白表达增加,钩藤碱50μmol/L组Bax蛋白表达减少(P<0.05)。与对照组相比,IL-1β组MMP13和MMP3蛋白表达上调,CollagenⅡ蛋白表达下调(P<0.05);与IL-1β组相比,钩藤碱5、25和50μmol/L组MMP13和MMP3蛋白表达降低,钩藤碱25μmol/L组和50μmol/L组CollagenⅡ蛋白表达增加(P<0.05)。与对照组相比,IL-1β组PGE2、COX-1、TNF-α、ROS和MDA水平均升高(P<0.05);与IL-1β组相比,钩藤碱25μmol/L组和50μmol/L组PGE2、COX1、TNF-α、ROS和MDA水平均降低(P<0.05)。与对照组相比,IL-1β组Nrf2和HO-1蛋白表达减少(P<0.05);与IL-1β组相比,钩藤碱25μmol/L组和50μmol/L组Nrf2和HO-1蛋白表达增加(P<0.05)。结论 钩藤碱通过激活Nrf2/HO-1信号通路抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡、氧化应激和炎症等损伤。 展开更多
关键词 钩藤碱 NF-E2相关因子2 血红素氧合酶1 软骨细胞 白介素1Β
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葫芦素B对IL-1β诱导的软骨细胞损伤及胞外基质代谢紊乱的影响 被引量:5
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作者 王西彬 左瑞庭 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第12期1210-1214,共5页
目的明确葫芦素B对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤及胞外基质代谢紊乱的影响。方法用不同浓度(0.5、1、5、10、20μmol/L)的葫芦素B处理小鼠软骨细胞,随后用IL-1β(10μg/L)处理。采用CCK-8法检测细胞活性,试剂盒检测乳酸脱氢酶(... 目的明确葫芦素B对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤及胞外基质代谢紊乱的影响。方法用不同浓度(0.5、1、5、10、20μmol/L)的葫芦素B处理小鼠软骨细胞,随后用IL-1β(10μg/L)处理。采用CCK-8法检测细胞活性,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)及Caspase-3的活性,确定葫芦素B最佳处理浓度。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;qRT-PCR检测细胞胞外基质代谢相关的Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)及蛋白多糖aggrecan、基质金属蛋白酶(MMP)-3及MMP-13的mRNA水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测MMP-3、MMP-13、前列腺素E2(PGE2)的水平,同时检测一氧化氮(NO)的产生;采用Western blot分析葫芦素B对IL-1β介导的软骨细胞中核因子(NF)-κB信号通路活化的影响。结果葫芦素B剂量依赖性地减弱IL-1β对软骨细胞存活的抑制效应(P<0.05),同时抑制IL-1β诱导的LDH释放、细胞凋亡及Caspase-3活性(P<0.05),10μmol/L是其最佳实验剂量。与IL-1β处理组相比,葫芦素B处理可减缓IL-1β对CollagenⅡ、aggrecan的mRNA表达抑制效应(P<0.05)。此外,葫芦素B还可抑制IL-1β诱导的MMP-3及MMP-13的mRNA表达及释放(P<0.05),降低炎性介质NO、PGE2的产生(P<0.05)。同时,IL-1β可明显上调软骨细胞中p-IκB、p-p65 NF-κB的表达,而葫芦素B则可抑制上述分子的表达(P<0.05)。结论葫芦素B可能通过阻断NF-κB信号通路的激活抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤及代谢紊乱,提示其具有潜在的抗骨关节炎的功效。 展开更多
关键词 软骨细胞 骨关节炎 白细胞介素1Β NF-κB 炎性介质 葫芦素B
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金丝桃苷对IL⁃1β诱导的小鼠骶髂关节软骨细胞损伤的影响 被引量:4
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作者 王西彬 左瑞庭 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期369-373,共5页
目的探讨金丝桃苷对IL⁃1β诱导的小鼠骶髂关节软骨细胞活性、炎性因子水平、细胞外基质(ECM)平衡,以及核因子NF⁃κB信号通路的影响。方法分离培养BALB/c小鼠骶髂关节软骨细胞,并将其随机分成5组,对照组、IL⁃1β组、IL⁃1β+金丝桃苷(25... 目的探讨金丝桃苷对IL⁃1β诱导的小鼠骶髂关节软骨细胞活性、炎性因子水平、细胞外基质(ECM)平衡,以及核因子NF⁃κB信号通路的影响。方法分离培养BALB/c小鼠骶髂关节软骨细胞,并将其随机分成5组,对照组、IL⁃1β组、IL⁃1β+金丝桃苷(25、50、100μg/mL)组。MTT检测细胞活性;ELISA试剂盒检测白介素(IL)⁃6、肿瘤坏死因子(TNF)⁃α、Ⅰ型胶原(Col⁃Ⅰ)和Ⅲ型胶原(Col⁃Ⅲ)水平;Western blot检测基质金属蛋白酶(MMP)⁃3、MMP⁃9、p⁃IκB⁃α和p⁃p65的表达。结果IL⁃1β处理显著抑制软骨细胞活性,提高IL⁃6和TNF⁃α水平,降低Col⁃Ⅰ和Col⁃Ⅲ的水平,并上调MMP⁃3、MMP⁃9、p⁃IκB⁃α和p⁃p65的表达;而金丝桃苷呈浓度依赖性抑制IL⁃1β诱导的细胞活性下降,IL⁃6和TNF⁃α水平上升,Col⁃Ⅰ和Col⁃Ⅲ水平下降,以及MMP⁃3、MMP⁃9、p⁃IκB⁃α和p⁃p65的表达上调。结论金丝桃苷能够抵抗IL⁃1β诱导的小鼠骶髂关节软骨细胞损伤,提高细胞活性、抑制炎性因子和ECM紊乱,这与其抑制NF⁃κB信号通路有关。 展开更多
关键词 金丝桃苷 软骨细胞 炎性因子 细胞外基质 NF⁃κB信号通路
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