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丹皮酚对大鼠糖尿病视网膜病变的改善作用及其调节miR-802-5p表达的作用机制 被引量：5
1
作者 孙俊波 高达 +3 位作者 赵逸菲 许华 邱帆 赵璐 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期82-93,共12页
目的:探讨丹皮酚对大鼠糖尿病视网膜病变(DR)的改善作用,并阐明其可能的作用机制。方法:40只SPF级SD大鼠随机分为对照组、DR模型组、15 mg·kg^(-1)丹皮酚组和30 mg·kg^(-1)丹皮酚组,每组10只,除对照组外其余3组大鼠腹腔注射55... 目的:探讨丹皮酚对大鼠糖尿病视网膜病变(DR)的改善作用,并阐明其可能的作用机制。方法:40只SPF级SD大鼠随机分为对照组、DR模型组、15 mg·kg^(-1)丹皮酚组和30 mg·kg^(-1)丹皮酚组,每组10只,除对照组外其余3组大鼠腹腔注射55 mg·kg^(-1)链脲佐菌素(STZ)构建DR模型。建模成功后,对照组和DR模型组大鼠皮下注射8 mL·kg^(-1)生理盐水,15和30 mg·kg^(-1)丹皮酚组大鼠皮下注射15和30 mg·kg^(-1)丹皮酚磺酸钠注射液,每日1次,共2周。取大鼠视网膜组织用于实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blotting和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测,HE染色观察各组大鼠视网膜组织病理形态表现。采用高糖(HG,33 mmol·L^(-1)葡萄糖)培养基培养人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)。采用不同剂量(0、5、25、50、70和100 mg·L^(-1))丹皮酚分别干预HRMECs和HG处理24 h后的HRMECs,采用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞活性和凋亡率,以确定后续实验中丹皮酚最适作用剂量。HRMECs进行转染后分为对照组、HG组、HG+NC inhibitor组、HG+miR-802-5p inhibitor组、HG+丹皮酚(25 mg·L^(-1))组、HG+丹皮酚+NC mimic组和HG+丹皮酚+miR-802-5p mimic组。采用RT-qPCR法检测各组大鼠视网膜组织和各组细胞中miR-802-5p表达水平,荧光素酶报告基因和RNA免疫共沉淀法检测HRMECs中miR-802-5p与SIRT6的结合关系,Western blotting法检测各组大鼠视网膜组织和各组细胞中沉默调节蛋白6(SIRT6)、色素上皮衍生因子(PEDF)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平,ELISA法检测各组大鼠视网膜组织和各组细胞中活性氧(ROS)水平及过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与对照组比较,DR模型组大鼠视网膜组织中miR-802-5p表达水平和VEGF蛋白表达水平明显升高(P<0.01),SIRT6和PEDF蛋白表达水平明显降低(P<0.01),ROS水平明显升高(P<0.01),CAT和SOD活性明显降低(P<0.01);与DR模型组比较,不同剂量丹皮酚组大 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 丹皮酚 微小RNA-802-5p 沉默调节蛋白6 高糖
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姜油酮通过激活Nrf2通路减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤 被引量：11
2
作者 杨敏华 姚友杰 王娟 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期150-156,共7页
目的探究姜油酮(zingerone)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的作用机制。方法将小鼠随机分为对照(Control)组、Zingerone组、LPS组和LPS+Zingerone组,腹腔注射姜油酮或生理盐水预处理,2 h后腹腔注射LPS复制小... 目的探究姜油酮(zingerone)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的作用机制。方法将小鼠随机分为对照(Control)组、Zingerone组、LPS组和LPS+Zingerone组,腹腔注射姜油酮或生理盐水预处理,2 h后腹腔注射LPS复制小鼠ALI模型。4 h后处死小鼠,收集肺组织和血清,HE染色观察肺组织损伤情况,Tunel染色观察肺组织细胞凋亡情况。ELISA检测白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-1β、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量,免疫印迹检测红系衍生核因子相关因子2[nuclear factor(erythroid-derived2)-like 2 protein,Nrf2]和血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的蛋白表达。采用Nrf2基因敲除小鼠,重复上述实验。结果与Control组比较,LPS组肺组织损伤明显加重,细胞凋亡率明显升高;与LPS组比较,LPS+Zingerone组肺损伤明显减轻,细胞凋亡率也明显降低;LPS组血清炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β含量及氧化产物MDA含量与Control组比较明显升高,SOD含量明显低于Control组;LPS+Zingerone组血清IL-6、TNF-α、IL-1β和MDA含量与LPS组比较明显降低,SOD含量明显升高;LPS能明显降低Nrf2和HO-1的表达水平,姜油酮能进一步升高模型小鼠Nrf2和HO-1的表达水平;敲除Nrf2后,姜油酮减轻肺损伤的能力降低,降低IL-6、TNF-α、IL-1β和MDA水平及促进SOD分泌的作用减弱。结论姜油酮可通过促进Nrf2通路激活抑制肺组织炎症反应及氧化应激,从而减轻ALI模型小鼠肺损伤。 展开更多
关键词 急性肺损伤 姜油酮 炎症 氧化应激
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穿心莲内酯对脓毒症大鼠急性心肺组织损伤和炎症反应的影响 被引量：10
3
作者 杨敏华 姚友杰 +3 位作者 王娟 陈亚奇 刘高仁 王森 《医药导报》 CAS 北大核心 2021年第4期454-460,共7页
目的探讨穿心莲内酯(AG)对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症大鼠心肺组织病理损伤和炎症反应的影响及其机制。方法将大鼠随机分为6组:正常对照组,模型对照组,AG小、中、大剂量组(LPS+AG 2.5 mg、LPS+AG 5 mg和LPS+AG 10 mg)组、利奈唑胺组(25 mg... 目的探讨穿心莲内酯(AG)对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症大鼠心肺组织病理损伤和炎症反应的影响及其机制。方法将大鼠随机分为6组:正常对照组,模型对照组,AG小、中、大剂量组(LPS+AG 2.5 mg、LPS+AG 5 mg和LPS+AG 10 mg)组、利奈唑胺组(25 mg)。给药组于造模后立即、8 h和16 h分别给予AG溶液,正常对照组和模型对照组给予等量0.9%氯化钠溶液,利奈唑胺组给予利奈唑胺。造模24 h后,称量并记录肺脏湿重/干重比值(W/D);苏木精-伊红(HE)染色检测心脏、肺脏组织病理学改变;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测心肌损伤标记物、炎症细胞因子含量;Western blotting检测炎症通路相关蛋白表达情况。另取大鼠随机分为5组:正常对照组(Control组)、模型对照组(LPS组)、LPS+AG组(AG 10 mg)、LPS+吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)组(PDTC 50 mg)和LPS+PDTC+AG组。重复上述实验。结果与模型对照组比较,AG能改善脓毒症大鼠心脏和肺脏病理损伤;且中剂量、大剂量AG能降低肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(cTnI)和肌红蛋白(Mb)含量和肺脏湿/干重比值,降低血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL^(-1)β)、IL-6和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)的含量(P<0.05或P<0.01),及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)和核因子-κB(NF-κB)p65在心肺组织中的表达水平(P<0.05或P<0.01)。AG能增加NF-κB特异性抑制剂PDTC对脓毒症大鼠心肺组织病理损伤、肺脏湿/干重比值、心肌损伤标记物含量、炎症细胞因子释放及炎症通路蛋白表达的调节作用(P<0.01)。结论AG能抑制LPS诱导的脓毒症大鼠心脏、肺脏病理损伤和炎症反应,其机制与抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路激活有关。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 脓毒症 利奈唑胺 吡咯烷二硫代氨基甲酸酯 高迁移率族蛋白B1 核因子-ΚB
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