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逆转录病毒介导IL-18基因在大鼠胶质瘤细胞C6中的表达 被引量：3
1
作者 李文玲 闫蕴力 +3 位作者 单保恩 郑力芬 李巧霞 周娜静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期522-525,共4页
目的 :建立表达IL 18基因的大鼠胶质瘤细胞C6 /IL 18,并探讨外源性IL 18基因对C6细胞生长的影响。方法 :应用逆转录病毒载体 ,将IL 18基因导入C6细胞。经G4 18筛选后 ,获得表达IL 18分子的细胞克隆C6 /IL 18。用RT PCR法检测目的基因mRN... 目的 :建立表达IL 18基因的大鼠胶质瘤细胞C6 /IL 18,并探讨外源性IL 18基因对C6细胞生长的影响。方法 :应用逆转录病毒载体 ,将IL 18基因导入C6细胞。经G4 18筛选后 ,获得表达IL 18分子的细胞克隆C6 /IL 18。用RT PCR法检测目的基因mRNA的表达 ;用流式细胞和免疫细胞化学染色法检测目的蛋白的表达。用ELISA法检测C6 /IL 18细胞培养上清诱导脾细胞分泌IFN γ的能力 ,以确定IL 18的生物学活性。用MTT比色法检测细胞体外增殖的状况 ,用流式细胞技术检测细胞的增殖活性 ,并建立大鼠胶质瘤模型 ,观察C6 /IL 18细胞体内致瘤性的改变。结果 :外源IL 18基因于mRNA水平和蛋白水平可获得稳定表达 ,并可诱生大鼠脾细胞分泌IFN γ。同时 ,该细胞系的体外增殖率及体内致瘤性 ,均较亲代C6胶质瘤细胞明显下降。结论 :外源性IL 18基因能部分地抑制C6细胞的体外增殖率和体内致瘤性。建立了可进一步用于相关肿瘤基因免疫和基因治疗研究的大鼠胶质瘤细胞系C6 /IL 18。 展开更多
关键词 IL-18 大鼠 表达 胶质瘤细胞 目的基因 C6细胞 体内致瘤性 体外增殖 MRNA水平 分泌
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卡介苗蛋白提取物体外对小鼠腹腔巨噬细胞产生NO的影响 被引量：2
2
作者 蒋翡翎 单保恩 +3 位作者 姚敏 魏小斌 伍燕 邓碧兰 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第4期621-623,共3页
目的:分离活卡介苗(BCG)的有效组分,分析其对小鼠腹腔巨噬细胞产生NO的影响。方法:采用酶裂解法和超声波破碎法对活BCG进行裂解,取上清夜,通过Sephadex G100凝胶层析对BCG提取物(BCGE)有效组分BCGE1、BCGE2和BCGE3进行分离及相对分子质... 目的:分离活卡介苗(BCG)的有效组分,分析其对小鼠腹腔巨噬细胞产生NO的影响。方法:采用酶裂解法和超声波破碎法对活BCG进行裂解,取上清夜,通过Sephadex G100凝胶层析对BCG提取物(BCGE)有效组分BCGE1、BCGE2和BCGE3进行分离及相对分子质量测定;以RPMI1640培养液为对照,采用Gress方法检测不同质量浓度的BCG蛋白活性组分对小鼠腹腔巨噬细胞NO的诱导作用。结果:与对照组相比,BCGE2和BCGE3均具有诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生NO的作用,且随着质量浓度的增加,诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生NO的作用更强(FBCGE2=34.750,FBCGE3=31.730,P均<0.001),在相同质量浓度时BCGE2的诱导作用最强(F640mg/L=22.000,P=0.002)。结论:BCGE2和BCGE3可能是BCG免疫调节作用的有效组分。 展开更多
关键词 卡介苗蛋白提取物 巨噬细胞 小鼠 NO 体外
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乳腺癌干细胞研究现状 被引量：1
3
作者 王欣荣(综述) 单保恩(审校) 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2009年第11期846-850,共5页
肿瘤干细胞理论认为肿瘤可能是由肿瘤干细胞和其所处微环境产生，而肿瘤干细胞由正常干细胞突变而来。乳腺癌干细胞是第一个在实体瘤中被鉴定的肿瘤干细胞，人们采用多种策略成功分离出乳腺癌千细胞，对其生物学行为的认识正逐渐深入。... 肿瘤干细胞理论认为肿瘤可能是由肿瘤干细胞和其所处微环境产生，而肿瘤干细胞由正常干细胞突变而来。乳腺癌干细胞是第一个在实体瘤中被鉴定的肿瘤干细胞，人们采用多种策略成功分离出乳腺癌千细胞，对其生物学行为的认识正逐渐深入。乳腺癌干细胞的自我更新、分化等特性受到微环境和许多信号转导通路的调控。如何靶向治疗乳腺癌干细胞，最终根治乳腺癌，正逐渐成为肿瘤靶向治疗研究的一个热点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 肿瘤干细胞
原文传递
肿瘤干细胞研究:一个漫长且不寻常的旅程 被引量：1
4
作者 周凯旋 艾军 单保恩 《药品评价》 CAS 2012年第18期4-11,共8页
一直以来,传统的肿瘤研究理论把肿瘤看作为一个均一的细胞团体,并认为肿瘤生长是所有肿瘤细胞共同增殖的结果。治疗癌症的传统方法则是通过手术切除、放化疗或生物治疗等方法尽量去除已经存在的肿瘤细胞,
关键词 肿瘤干细胞 干细胞标记物
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转染自体胃癌细胞总RNA的树突状细胞诱导个体化免疫治疗的体外实验 被引量：14
5
作者 谢绍建 闫庆辉 +4 位作者 单保恩 付泽娴 孟繁杰 李保东 蔡建辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期92-95,共4页
目的探讨转染自体胃癌细胞总RNA的树突状细胞(DC)体外介导抗胃癌的免疫效应。方法制备短期培养的原代胃癌细胞。用rhGM-CSF、rhIL-4和TNF-α体外诱导胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中DC的发育和成熟,并转染自体肿瘤细胞总RNA,激活自体... 目的探讨转染自体胃癌细胞总RNA的树突状细胞(DC)体外介导抗胃癌的免疫效应。方法制备短期培养的原代胃癌细胞。用rhGM-CSF、rhIL-4和TNF-α体外诱导胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中DC的发育和成熟,并转染自体肿瘤细胞总RNA,激活自体T细胞产生CTL,用CCK-8试剂盒检测CTL的杀伤活性。应用流式细胞术及混合淋巴细胞培养技术检测DC的免疫功能状态。用ELISA法测定IL-12和INF-γ的水平。结果转染自体肿瘤细胞总RNA的成熟DC,不仅可高表达MHC-I、II类分子及CD80、CD83和CD86协同刺激分子,并可获得高效刺激自体或异体T细胞增殖的能力。转染RNA的成熟DC,分泌IL-12的水平及其刺激产生的CTL培养上清液中INF-γ的水平显著高于单纯成熟DC及未成熟DC;且CTL对自体胃癌细胞的杀伤率显著高于异体组。结论转染自体胃癌细胞总RNA的成熟DC能够体外诱导产生对自体肿瘤细胞具有高度抗原特异性杀伤活性的CTL。 展开更多
关键词 胃癌 树突状细胞 细胞毒性T细胞 免疫治疗
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