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大豆GmNHX1基因克隆及其在酵母中的耐盐性分析 被引量：5
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作者 范龙 孙天杰 +2 位作者 杨郡 张洁 王冬梅 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期7-12,24,共7页
Na^+/H^+逆向转运蛋白基因在植物响应盐胁迫中具有重要作用。本研究从耐盐大豆品种‘冀豆7号'克隆Na+/H+逆向转运蛋白基因GmNHX1,并利用酵母突变体对该基因的功能进行了初步研究。结果发现,GmNHX1包含1 641 bp的开放阅读框,编码546... Na^+/H^+逆向转运蛋白基因在植物响应盐胁迫中具有重要作用。本研究从耐盐大豆品种‘冀豆7号'克隆Na+/H+逆向转运蛋白基因GmNHX1,并利用酵母突变体对该基因的功能进行了初步研究。结果发现,GmNHX1包含1 641 bp的开放阅读框,编码546个氨基酸,有典型的Na^+/H^+逆向转运蛋白特征,与已知功能的液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白具有较高同源性。半定量分析结果表明,GmNHX1受盐胁迫上调表达,在相同浓度盐胁迫下该基因在叶片中的表达量高于根系;耐盐品种‘冀豆7号'在200 mmol/L NaCl胁迫下,其GmNHX1的表达相较0 mmol/L NaCl处理下的表达增加了225%,而盐敏感品种‘冀豆17'只增加了94%。利用nhx1盐敏感酵母突变体进行功能互补试验,结果发现在50,200 mmol/L NaCl胁迫条件下,转GmNHX1酵母突变体菌株生长速度高于对照,GmNHX1具有恢复nhx1酵母突变体耐盐性的功能。 展开更多
关键词 NA+/H+逆向转运蛋白 大豆 耐盐性 酵母突变体
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小麦与叶锈菌互作过程中实时定量PCR内参基因的选择及TaSGR基因的表达分析 被引量：6
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作者 李晖 牛宏伟 +3 位作者 刘娜 陈琰 侯春燕 王冬梅 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期642-648,共7页
实时定量PCR(RT-q PCR)是确定基因功能的重要手段之一。为了量化基因表达水平,选择合适的内参基因是实验准确的先决条件。本文以小麦ACTIN1、ACTIN2、GAPDH、GAPDH2、ATUB、BTUB、EF1A1、EF1A2和TA共9个基因作为候选内参基因,在小麦(Tri... 实时定量PCR(RT-q PCR)是确定基因功能的重要手段之一。为了量化基因表达水平,选择合适的内参基因是实验准确的先决条件。本文以小麦ACTIN1、ACTIN2、GAPDH、GAPDH2、ATUB、BTUB、EF1A1、EF1A2和TA共9个基因作为候选内参基因,在小麦(Triticum aesetrum)与叶锈菌(Puccinia triticina)互作过程中,利用RT-q PCR技术,检测这9个基因的表达情况。经ge Norm和Norm Finder软件分析可知,在小麦接种叶锈菌后不同时间点,GAPDH和TA基因的表达稳定性较高,可以作为RT-q PCR的内参基因。在此基础上,利用筛选得到的最适内参GAPDH对小麦与叶锈菌互作过程中,Ta SGR基因的相对表达量做了定量分析。结果显示,在亲和组合接种后中后期,Ta SGR基因的相对表达量迅速增加,达到了对照的近7倍水平,而在不亲和组合接种后不同时间点,Ta SGR基因的表达量与对照0 h相比差异均不明显。 展开更多
关键词 小麦 叶锈菌 RT-QPCR 内参基因 GENORM NORMFINDER
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