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题名乙型肝炎病毒的亚克隆及其应用
被引量：2
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作者
许蕙
孙峥嵘
胥婧
吴美华
孙睿
卜丽虹
鲁润铭
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机构
沈阳医学院附属中心医院手外科研究所
沈阳市传染病院中心实验室
沈阳医学院生理教研室
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出处
《中国公共卫生》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第1期17-18,共2页
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文摘
目的 应用酶切pBP32 2 HBV ,回收HBVDNA ,将其克隆到高拷贝载体 ,获得亚克隆株 pUC19 HBV ,再酶切、HBVDNA标记探针 ,核酸杂交检测临床血清标本 72份 ,与定量PCR ,定性PCR方法对比。方法 由此获得了亚克隆株pUC19 HBV ,用地高辛标记的HBVDNA探针杂交、定量PCR、定性PCR方法同时检测临床血清标本 72份。结果 阳性标本份数分别为 40、5 1、49份 ,阳性率分别为 5 5 6 %、70 8%、6 8 1%。阳性符合率分别为 88 9%、84 6 %、80 8%。结论 3种HBV核酸检测方法的比较 ,以定量PCR法最为敏感 。
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关键词
乙型肝炎病毒
亚克隆
核酸杂交
应用
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Keywords
HBV
subcloning
nucleic acid
hybridization
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分类号
R373.21
[医药卫生—病原生物学]
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题名HBVX基因及其调控序列的克隆
- 2
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作者
刘慧杰
王桂珍
鲁润铭
张东威
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机构
中国医科大学基础医学院病原生物学教研室
沈阳市传染病院中心实验室
中国医科大学第二临床学院小儿外科
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出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第1期1-4,共4页
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文摘
目的 :构建一个含有 HBV X(HBx)基因和它的调控序列的重组质粒。方法 :通过 PCR法获取目的基因 ,将目的基因与 p GEM- 5 zf(+) T载体相连组成重组质粒 ,转入大肠杆菌 JM10 9株后获得重组克隆。并分别通过PCR、限制性内切酶酶切图谱和序列分析 3种方法对重组质粒进行鉴定。结果 :PCR、限制性内切酶酶切图谱和序列分析均证实所获重组质粒中含有目的基因。结论 :得到了含有 HBx结构基因及其上游调控序列的重组克隆 ,为进一步研究
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关键词
乙型肝炎病毒
X基因
基因克隆
反式作用因子
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Keywords
hepatitis B virus X gene
gene cloning
transactivator
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分类号
R512.62
[医药卫生—内科学]
R378.21
[医药卫生—临床医学]
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题名增加CpG基元的汉坦病毒核蛋白基因疫苗的免疫作用
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作者
郑兰艳
于月新
张姝娜
牟玲
罗恩杰
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机构
中国医科大学基础医学院病原生物教研室
中国人民解放军
沈阳市传染病院中心实验室
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出处
《中国病毒学》
CSCD
2005年第1期24-27,共4页
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基金
辽宁省教育厅2002年高等学校科学研究项目资助(NO.202013130)
沈阳市科委课题(沈科发[2001]38号)
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文摘
以往的研究表明非甲基化胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸为基元构成的特定结构是一种很有希望的候选疫苗佐剂。为了研究增加CpG基元的汉坦病毒核蛋白基因疫苗的免疫作用,在本实验中,将重组真核表达质粒 pcDNA3.1+S(ISS)直接肌注免疫BALB/c 小鼠,分别用ELISA法检测血清特异性抗体的变化,MTT法检测 T细胞增殖反应,以及用ELISA kit检测免疫鼠脾细胞上清液中细胞因子IL 4和IFN γ的动态变化,从而了解免疫鼠的体液免疫反应和细胞免疫反应。结果显示 pcDNA3.1+S(ISS)接种组的小鼠血清抗体水平、T细胞增殖反应以及细胞因子IFN γ的产生水平较对照组 pcDNA3.1+S和空载体 pcDNA3.1+接种组的要高。而细胞因子 IL 4 较对照组却无明显变化。由此可见,增加CpG基元的质粒能够增强其所诱导的免疫反应,可用于那些需要借助强有力细胞免疫来清除病原体的疫苗研制中。
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关键词
汉坦病毒
核酸疫苗
核蛋白
CPG基元
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Keywords
Hantavirus
DNA vaccine
Nucleiocapsid protein,CpG motif
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分类号
R392
[医药卫生—免疫学]
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题名丙型肝炎病毒基因分型及其临床意义
被引量：3
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作者
黄芬
赵桂珍
王兆荃
李颖
乔光彦
刘国玉
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机构
中国医科大学附属第二临床医院传染科
沈阳市传染病院中心实验室
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出处
《中华肝脏病杂志》
CAS
CSCD
1997年第1期11-11,共1页
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文摘
对沈阳地区100例各型丙型肝炎(其中6例伴原发性肝癌)进行 HCV 基因分型,旨在了解 HCV 基因型在本地区分布及在不同类型丙型肝炎中分布及其临床意义。材料与方法一、检测对象急性肝炎9例、慢性肝炎73例(轻度50例、中度14例、重度9例),肝炎后肝硬化(均为活动性)12例,原发性肝癌6例,血清抗 HCV 及 HCV RNA 均阳性.诊断符合1995年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议制定的诊断标准。部分病例及肝癌经病理证实。二、方法HCV 基因分型按 Okamoto(1992年)HCV 核心区特异引物PCR 法进行。
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关键词
丙型肝炎病毒
基因分型
临床
丙型肝炎
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分类号
R512.63
[医药卫生—内科学]
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