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全人源抗狂犬病病毒G蛋白单链抗体制备及中和活性鉴定 被引量：5
1
作者 张倩倩 赵茜 +7 位作者 张晓 丁贵鹏 金秋 高畅 熊四平 陈玉平 朱进 冯振卿 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期927-931,共5页
目的:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,筛选针对狂犬病病毒G蛋白不同表位的单链抗体(scFv)并鉴定其中和活性。方法:分离130例经狂犬病疫苗免疫接种志愿者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,逆转录制备cDNA,构建全人源抗狂犬病病毒scF... 目的:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,筛选针对狂犬病病毒G蛋白不同表位的单链抗体(scFv)并鉴定其中和活性。方法:分离130例经狂犬病疫苗免疫接种志愿者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,逆转录制备cDNA,构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库。以纯化的狂犬病病毒G蛋白包板筛选,对阳性克隆进行可溶性表达,并鉴定中和活性。结果:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,库容为5.0×107,经核酸序列分析,证实插入片段为scFv。经过5轮筛选,从富集的次级抗体库中随机挑出140个克隆,通过phage-ELISA鉴定得到4株核酸序列不同的scFv抗体。经His-Trap纯化后进行中和活性鉴定,获得1株有中和活性的scFv,其中和效价为0.13 IU/mg。结论:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,获得1株具有中和活性的抗狂犬病病毒G蛋白scFv抗体,为进一步研发狂犬病治疗性抗体药物奠定了基础。 展开更多
关键词 狂犬病病毒G蛋白 噬菌体抗体库 单链抗体(scFv) 中和活性
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IgG亚类的检测方法及临床意义 被引量：2
2
作者 王更银 孙兵 +4 位作者 陈玉平 李利 兰炯采 王布强 徐丹 《检验医学与临床》 CAS 2015年第A01期280-284,共5页
IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，占70％～75％，也是最重要的抗感染分子，IgG根据其分子主链（7链）抗原性差别及二硫键数目和位置的不同，可分为四个亚类，分别是IgG1，IgG2，IgG3和IgG4，它们在正常人体内含量分别为65％、23％、8... IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，占70％～75％，也是最重要的抗感染分子，IgG根据其分子主链（7链）抗原性差别及二硫键数目和位置的不同，可分为四个亚类，分别是IgG1，IgG2，IgG3和IgG4，它们在正常人体内含量分别为65％、23％、8％、4％左右。各种亚类都有各自特性和不同的功能，IgG作用大多通过IgG亚类来完成。 展开更多
关键词 IGG亚类 检测方法 临床意义 综述
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狂犬病病毒糖蛋白在昆虫细胞中的表达及其免疫学特性分析 被引量：2
3
作者 王晓蕾 陈芳芳 +10 位作者 袁伟 钱国强 耿以如 张晓 杨瑾 熊四平 陈雅 唐奇 仇镇宁 冯振卿 朱进 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期772-776,822,共6页
目的 :利用Bac-To-Bac杆状病毒昆虫细胞表达系统对狂犬病病毒糖蛋白(rabies virus glycoprotein,RVG)基因进行克隆、表达、纯化,并对重组RVG进行免疫学特性鉴定。方法:参照Gen Bank收录的狂犬病病毒CVS-11株RVG基因序列,设计特异性引物... 目的 :利用Bac-To-Bac杆状病毒昆虫细胞表达系统对狂犬病病毒糖蛋白(rabies virus glycoprotein,RVG)基因进行克隆、表达、纯化,并对重组RVG进行免疫学特性鉴定。方法:参照Gen Bank收录的狂犬病病毒CVS-11株RVG基因序列,设计特异性引物,扩增目的基因。RVG基因经Bam HⅠ/KpnⅠ双酶切后定向克隆到p Fast Bac-GP67B载体上,阳性重组转座质粒进一步转化E.Coli DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选及PCR鉴定后获得重组穿梭载体r Bacmid-RVG,将其转染至对数生长期的Sf-9昆虫细胞,进行重组RVG的真核表达。His-Trap HP纯化目的蛋白,SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。重组RVG免疫小鼠,检测其免疫原性和血清中和活性。结果:用Bac-To-Bac杆状病毒昆虫细胞表达系统表达并纯化了重组RVG,分子量约58 000。经重组RVG免疫后的小鼠血清具有中和活性。结论:重组RVG具有天然RVG的活性,为进一步研制亚单位疫苗及制备筛选中和抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 狂犬病病毒糖蛋白 Bac-To-Bac杆状病毒昆虫细胞表达系统 纯化 抗体
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用于血型鉴定的国产微柱凝胶卡抗体试剂的选择 被引量：2
4
作者 吴涛 周俊 +4 位作者 陈震 张秋丽 晋晶 陈玉平 张永超 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第10期1064-1065,1068,共3页
目的筛选特异性强、效价高、亲和力高的用于血型鉴定的国产微柱凝胶卡抗A、抗B及抗D抗体试剂。方法按《中国生物制品规程》2000版中《抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)制造及检定规程》的要求,对4家公司的抗A、抗B及抗D抗体试剂进行特... 目的筛选特异性强、效价高、亲和力高的用于血型鉴定的国产微柱凝胶卡抗A、抗B及抗D抗体试剂。方法按《中国生物制品规程》2000版中《抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)制造及检定规程》的要求,对4家公司的抗A、抗B及抗D抗体试剂进行特异性、效价、亲和力检测。结果 3批抗A、抗B单克隆抗体试剂及3批抗D抗体试剂的特异性、效价和亲和力检测结果均符合《中国生物制品规程》2000版中《抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)制造及检定规程》的要求,选择成本相对较低的上海血液生物医药有限责任公司生产的抗A、抗B试剂和英国Millpore公司亲和力更好、效价更高的抗D抗体试剂,用于制备国产微柱凝胶卡。结论 3批抗A、抗B、抗D单克隆抗体试剂均合格,已选择更优的试剂用于制备国产微柱凝胶卡。 展开更多
关键词 微柱凝胶卡 抗体试剂 血型 鉴定
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造血干细胞体外红系定向培养方法的研究进展 被引量：1
5
作者 陈玉平 兰炯采 +2 位作者 吕毅 周同彬 王布强 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期538-541,共4页
红细胞源于骨髓多功能造血干细胞,是血液中数量最多的1种血细胞,通过血红蛋白起着运输O2和CO2的重要生理功能;红细胞输注是目前治疗贫血等多种疾病的常用手段,在成分输血中红细胞制品约占50%[1]。目前临床用血的来源基本上还是人源性的... 红细胞源于骨髓多功能造血干细胞,是血液中数量最多的1种血细胞,通过血红蛋白起着运输O2和CO2的重要生理功能;红细胞输注是目前治疗贫血等多种疾病的常用手段,在成分输血中红细胞制品约占50%[1]。目前临床用血的来源基本上还是人源性的,随着临床需求的日益增加。 展开更多
关键词 造血干细胞 定向分化 红系细胞 体外培养
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输血前试验试剂与技术的进展与方向 被引量：1
6
作者 冯振卿 朱进 +2 位作者 陈玉平 钱国强 周珍祯 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期13-14,共2页
输血作为1种不可替代的治疗方法，已广泛用于临床各科室，是现代医学的1个重要组成部分。随着人们认知的不断提高，怎样安全输血已成为医疗工作中的重要问题，其牵涉到采、供、输血中的诸多环节。红细胞血型系统中存在的一些稀有表型，... 输血作为1种不可替代的治疗方法，已广泛用于临床各科室，是现代医学的1个重要组成部分。随着人们认知的不断提高，怎样安全输血已成为医疗工作中的重要问题，其牵涉到采、供、输血中的诸多环节。红细胞血型系统中存在的一些稀有表型，虽然它们在群体中频率较低，但在临床输血实践中常会遇到此类稀有表型引起的配血和定型困难。 展开更多
关键词 输血前试验 稀有血型 血型鉴定 抗体筛查
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创建中西医结合中国特色输血医学体系 被引量：6
7
作者 兰炯采 刘志伟 +26 位作者 丁志山 杨成民 蔡辉 李碧娟 陈进凡 桂嵘 郑山根 于笑难 李晓娟 俞颖 朱培元 乐爱平 邢颜超 梁静 栾建凤 张德梅 王秋实 周世乔 易思华 宋小川 李清 桂霞 吕毅 苏品璨 陈玉平 马建川 马艳 《中国输血杂志》 北大核心 2017年第8期855-858,共4页
输血源于西方，其理论和技术属于西医。虽然中国、中医历来只有“放血”（疗法），没有输血，但是中医对中华民族几千年繁衍生存的保障功不可没，其博大精深的体系，辨证施治的理论和取用不尽中药宝库，早已成为西医（包括输血）有力的... 输血源于西方，其理论和技术属于西医。虽然中国、中医历来只有“放血”（疗法），没有输血，但是中医对中华民族几千年繁衍生存的保障功不可没，其博大精深的体系，辨证施治的理论和取用不尽中药宝库，早已成为西医（包括输血）有力的补充。 展开更多
关键词 输血医学 中医 中西医结合
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