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三脉菝葜醇提物及其不同极性萃取部位的抗肿瘤作用研究 被引量:8
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作者 鲁遇 余英才 梁永红 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第19期2645-2649,共5页
目的:研究三脉菝葜醇提物及其不同极性萃取部位的抗肿瘤作用,为其抗肿瘤活性部位的筛选提供参考。方法:采用MTT法检测不同质量浓度的三脉菝葜醇提物及其石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水层萃取部位对人肝癌细胞株HepG2、人肺癌细胞株A549... 目的:研究三脉菝葜醇提物及其不同极性萃取部位的抗肿瘤作用,为其抗肿瘤活性部位的筛选提供参考。方法:采用MTT法检测不同质量浓度的三脉菝葜醇提物及其石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水层萃取部位对人肝癌细胞株HepG2、人肺癌细胞株A549、人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231、人宫颈癌细胞株HeLa以及人卵巢癌细胞株HO-8910的增殖抑制率,并计算其半数抑制浓度(IC50)。将80只KM小鼠通过右前肢腋部皮下接种S180细胞悬液的方法复制荷瘤小鼠模型,并按体质量随机分为8组,即模型组(生理盐水,每天灌胃2次),环磷酰胺(阳性药物)组(0.025 g/kg,每天腹腔注射给药1次),三脉菝葜醇提物高、中、低剂量组和醇提物乙酸乙酯萃取部位高、中、低剂量组(以浸膏计给药剂量均分别为0.1、0.05、0.025 g/kg,每天灌胃2次),每组10只;各组小鼠均连续给药14 d;末次给药后禁食不禁水12 h,检测各组小鼠的抑瘤率、脾指数和胸腺指数。结果:体外试验表明,三脉菝葜及其不同极性萃取部位对6种肿瘤细胞的增殖抑制作用均呈现明显的量-效关系。其中以醇提物乙酸乙酯萃取部位的作用最强,其对各肿瘤细胞的IC50在40~210μg/mL范围内,对MCF-7细胞、MDA-MB-231细胞和HeLa细胞的IC50分别为70.56、83.58、44.67μg/mL。体内实验表明,各给药组小鼠的瘤质量较模型组均显著降低(P<0.05或P<0.01),并且三脉菝葜醇提物高剂量组和醇提物乙酸乙酯部位萃取部位高、中剂量组小鼠瘤质量显著低于环磷酰胺组(P<0.01);环磷酰胺组、三脉菝葜醇提物高剂量组和醇提物乙酸乙酯萃取部位高、中剂量组小鼠脾指数较模型组显著降低(P<0.01),环磷酰胺组小鼠胸腺指数较模型组和其余各给药组均显著升高(P<0.01)。结论:在4个极性部位中,三脉菝葜醇提物乙酸乙酯萃取部位的抗肿瘤效果最佳,并且免疫抑制作用较小。 展开更多
关键词 三脉菝葜 醇提物 不同部位 抗肿瘤 小鼠
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中国莲小分子热激蛋白HSP17.5基因克隆及表达分析 被引量:1
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作者 齐麟 李军 +1 位作者 向志明 余英才 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第1期102-106,共5页
为了研究中国莲小分子热激蛋白的生理功能,通过RACE技术克隆得到小分子热激蛋白基因HSP17.5全长cDNA。该基因开放阅读框全长471bp,编码156个氨基酸,推测其分子量为17.5kD,等电点5.94。半定量RT-PCR试验结果显示,HSP17.5在中国莲授粉后... 为了研究中国莲小分子热激蛋白的生理功能,通过RACE技术克隆得到小分子热激蛋白基因HSP17.5全长cDNA。该基因开放阅读框全长471bp,编码156个氨基酸,推测其分子量为17.5kD,等电点5.94。半定量RT-PCR试验结果显示,HSP17.5在中国莲授粉后不同时期的胚轴中均有表达,表达量呈现先降低后恢复的特点。HSP17.5在授粉后10d的子叶中有低丰度表达,之后消失。表明HSP17.5蛋白在中国莲种子萌发和幼苗早期的形态建成中可能起着重要的调节作用。 展开更多
关键词 中国莲 热激蛋白17 5 半定量RT—PCR 基因克隆
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斑马鱼TNFR2基因克隆及表达分析
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作者 齐麟 余英才 +1 位作者 向志明 李军 《湖北农业科学》 北大核心 2013年第17期4171-4174,共4页
利用巢式PCR方法克隆斑马鱼(Danio rerio)肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)基因,该基因全长1 242bp,编码413个氨基酸,分子质量44.68 ku,等电点5.90。实时荧光定量PCR结果表明,TNFR2基因在斑马鱼胚胎发育时期的表达量呈现下降后趋于稳定,在斑马... 利用巢式PCR方法克隆斑马鱼(Danio rerio)肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)基因,该基因全长1 242bp,编码413个氨基酸,分子质量44.68 ku,等电点5.90。实时荧光定量PCR结果表明,TNFR2基因在斑马鱼胚胎发育时期的表达量呈现下降后趋于稳定,在斑马鱼不同组织中均能检测到,并且表达丰度差别不大,在肌肉中表达量最高,在肠道中表达量最低。 展开更多
关键词 斑马鱼(Danio rerio) 肿瘤坏死因子受体2 实时荧光定量PCR
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斑马鱼SAA蛋白原核表达、抗体制备及菌结合试验
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作者 齐麟 李军 +1 位作者 向志明 余英才 《湖北农业科学》 2015年第2期382-384,共3页
通过构建斑马鱼(Danio rerio)SAA原核表达载体,在大肠杆菌(E.coli)TB1中诱导表达并纯化获得了斑马鱼SAA融合蛋白,将纯化的斑马鱼SAA蛋白免疫Balb/c小鼠,制备了特异性多克隆抗血清,并研究了斑马鱼SAA融合蛋白与细菌的结合能力及检测了抗... 通过构建斑马鱼(Danio rerio)SAA原核表达载体,在大肠杆菌(E.coli)TB1中诱导表达并纯化获得了斑马鱼SAA融合蛋白,将纯化的斑马鱼SAA蛋白免疫Balb/c小鼠,制备了特异性多克隆抗血清,并研究了斑马鱼SAA融合蛋白与细菌的结合能力及检测了抗体效价。结果表明,纯化的斑马鱼融合SAA蛋白能够与5种细菌直接结合,血清效价达到1∶2 000以上。 展开更多
关键词 斑马鱼(Danio rerio) 血清淀粉样蛋白A 原核表达 抗体制备 菌结合
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慢性非细菌性前列腺炎大鼠前列腺线粒体损伤及解毒活血汤干预作用研究 被引量:6
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作者 董德刚 宋梅 +2 位作者 易军 严张仁 王万春 《中华男科学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第6期483-488,共6页
目的:从线粒体角度探讨慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠可能发病机制,以及解毒活血汤干预作用。方法:清洁级SD雄性大鼠随机分为4组,即假手术组、模型组、阳性药组及解毒活血汤组,采用前列腺内注射角叉菜胶法制备CNP大鼠模型,其中假手术... 目的:从线粒体角度探讨慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠可能发病机制,以及解毒活血汤干预作用。方法:清洁级SD雄性大鼠随机分为4组,即假手术组、模型组、阳性药组及解毒活血汤组,采用前列腺内注射角叉菜胶法制备CNP大鼠模型,其中假手术组和模型组灌服生理盐水,阳性药组则按2 g/kg灌服前列康片,解毒活血汤组按生药量2 g/kg灌服解毒活血汤,每天1次,连续给药30 d后处死,收集血清与前列腺组织,计算各组前列腺组织脏器系数比,并分别进行常规HE染色,采用线粒体提取试剂盒提取各组大鼠前列腺组织线粒体,比色法检测前列腺线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平及Na^(+)-K^(+)-ATPase活性。透射电镜观察前列腺超微结构变化。结果:前列腺脏器系数假手术组[(1.50±0.42)%]、阳性药组[(1.54±0.32)%]和解毒活血汤组[(1.47±0.53)%]均显著低于模型组[(1.95±0.39)%,P<0.05];光镜下显示假手术组大鼠前列腺组织无明显病理变化,模型组间质内纤维组织明显增生,腺体结构紊乱,炎性细胞浸,两药物治疗组炎性细胞减少,腺泡内上皮细胞与间质内纤维组织增生程度改善;模型组大鼠前列腺组织线粒体SOD、GSH-PX、Na^(+)-K^(+)-ATPase活性均低于其他组(P<0.05或P<0.01),其中解毒活血汤组与模型组比较[SOD:(22.52±3.88)U/mg prot vs(17.42±2.91)U/mg prot,P<0.05;GSH-Px:(89.95±7.65)U/mg prot vs(38.35±6.98)U/mg prot,P<0.01;Na^(+)-K^(+)-ATPase:(1.85±0.32)μmol Pi/mg prot/hvs(0.98±0.40)μmol Pi/mg prot/h,P<0.01],MDA含量均高于其他各组(P<0.01),其中解毒活血汤组与模型组MDA比较为(0.59±0.17)nmol/mg prot vs(1.70±0.22)nmol/mg prot;超微结构显示,模型组大鼠前列腺组织有显著线粒体损伤,解毒活血汤能诱导线粒体自噬增强。结论:CNP大鼠前列腺存在线粒体功能障碍,解毒活血汤能促进CNP大鼠前列腺线粒体功能恢复,其机制可能与线 展开更多
关键词 慢性非细菌性前列腺炎 线粒体损伤 氧化应激 解毒活血汤 线粒体自噬 大鼠
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