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葛根芩连汤促进糖尿病大鼠棕色脂肪分化改善糖脂紊乱的分子机制 被引量：19
1
作者 张小清 许文华 +3 位作者 肖鑫 丁浚峰 姜月 涂珺 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期4462-4470,共9页
研究葛根芩连汤(GQD)对糖尿病大鼠棕色脂肪组织(BAT)分化及能量代谢的影响。给药干预高脂喂养加小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠13周,在确认降糖药效基础上,提取大鼠肩胛骨周围BAT总RNA,qPCR法检测核转录基因Prdm16、Pparγc1α、P... 研究葛根芩连汤(GQD)对糖尿病大鼠棕色脂肪组织(BAT)分化及能量代谢的影响。给药干预高脂喂养加小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠13周,在确认降糖药效基础上,提取大鼠肩胛骨周围BAT总RNA,qPCR法检测核转录基因Prdm16、Pparγc1α、Pparα、Pparγ和Sirt1,BAT标志基因Ucp1、Cidea、Dio2和能量消耗基因Ampkα2,脂肪分泌因子Adpn、Fndc5、Angptl8、IL-6和Rbp4表达。IPA通路软件分析qPCR数据干预差异。提取BAT总蛋白,Western blot法检测PRDM16、PGC1α、PPARγ、PPARα、SIRT1、ChREBP、AMPKα、UCP1、ADPN、NRG4、GLUT1和GLUT4等表达水平。结果显示,与模型组相比,GQD显著上调糖尿病大鼠Pparγc1α、Pparα、Pparγ、Ucp1、Cidea、Ampkα2、Dio2、Fndc5、Rbp4和Angptl8表达水平(P<0.05),显著下调Adpn和IL-6表达水平(P<0.05),Prdm16表达有上调趋势(P=0.182),而Sirt1表达有下调趋势(P=0.104)。IPA通路功能分析显示GQD促进脂肪组织棕色化,激活PPARα/RXRα和SIRT1信号通路,减少脂质积累。与正常组相比,模型组PRDM16、PGC1α、PPARα、PPARγ、SIRT1、ChREBP、AMPKα、UCP1、GLUT1、GLUT4和NRG4蛋白表达下调(P<0.01),给药后表达上调(P<0.05);与正常组相比,模型组ADPN蛋白表达上调(P<0.01),给药后表达下调(P<0.01)。研究表明GQD促进BAT分化成熟,增加能量消耗,有助于减轻机体糖脂代谢紊乱,改善糖尿病症状。 展开更多
关键词 棕色脂肪组织 糖脂代谢 糖尿病 能量消耗 葛根芩连汤
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葛根芩连汤缓解肝内质网应激改善体内外糖代谢的效应机制
2
作者 姜月 延李科 +4 位作者 王颖 丁浚峰 徐中华 崔灿 涂珺 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第20期5565-5575,共11页
探讨葛根芩连汤(Gegen Qinlian Decoction,GQD)缓解内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)改善体内外糖代谢的效应机制。分子对接预测GQD入血主要药效成分与ERS相关靶点的结合活性。取冻存正常组、高脂诱导糖尿病模型组、二甲... 探讨葛根芩连汤(Gegen Qinlian Decoction,GQD)缓解内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)改善体内外糖代谢的效应机制。分子对接预测GQD入血主要药效成分与ERS相关靶点的结合活性。取冻存正常组、高脂诱导糖尿病模型组、二甲双胍组和GQD组大鼠肝组织,提取RNA和蛋白质,qPCR检测ERS标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,Grp78)、未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)通路基因肌醇需求酶1(inositol requiring enzyme 1,Ire1)、转化因子6(activating transcription factor 6,Atf6)、Atf4、C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,Chop)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-12基因mRNA表达;Western blot检测GRP78、IRE1、蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase,PERK)、ATF6、X-盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)、ATF4、CHOP、caspase-12、caspase-9和caspase-3蛋白表达;比色法检测肝组织钙离子含量。体外采用衣霉素诱导6 h建立ERS-HepG2细胞模型,2.5%、5%、10%GQD含药血清(GQD-containing serum)给药9 h,葡萄糖氧化酶法检测细胞外液葡萄糖含量;流式细胞术检测细胞凋亡;糖原染色检测细胞糖原含量;免疫荧光检测ERS标志蛋白GRP78表达;比色法检测胞内钙离子含量;Western blot检测GRP78和ERS诱导IRE1、PERK、ATF6和真核翻译启动因子2α(eukaryotic translation initiation factor 2α,eIF2α)磷酸化,同时检测胰岛素降糖通路蛋白胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS1)、磷脂酰肌醇3-激酶p85调控亚基(phosphatidylinositol 3-kinase regulatory subunit p85,PI3Kp85)和蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)的磷酸化水平。此外,Western blot检测沟通ERS与胰岛素降糖通路的c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNKs)磷酸化水平。分子对接结果显示,GRP78、IRE1、PERK、ATF4与黄芩素、小檗碱、大豆黄酮、药根碱、甘草苷、棕榈碱、葛根素、汉黄芩苷有较强结合活性,提示GQD可能干� 展开更多
关键词 糖尿病 糖代谢 胰岛素抵抗 内质网应激 葛根芩连汤
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