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特殊蚕品种培育现状及审定指标探讨 被引量:5
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作者 王欣 沈兴家 《中国蚕业》 2017年第3期63-67,共5页
随着经济和社会的不断发展,蚕丝业对蚕品种的需求趋向多元化,特殊蚕品种应运而生。但是,目前尚未见特殊蚕品种审定的研究报道。概述了目前我国特殊蚕品种培育应用现状,包括抗性蚕品种、雄蚕品种、三眠蚕品种、粗纤度蚕品种、彩色茧蚕品... 随着经济和社会的不断发展,蚕丝业对蚕品种的需求趋向多元化,特殊蚕品种应运而生。但是,目前尚未见特殊蚕品种审定的研究报道。概述了目前我国特殊蚕品种培育应用现状,包括抗性蚕品种、雄蚕品种、三眠蚕品种、粗纤度蚕品种、彩色茧蚕品种等;提出了特殊蚕品种的鉴定方法,各类特殊蚕品种的审定指标,以期为开展特殊蚕品种的鉴定审定提供借鉴。 展开更多
关键词 家蚕 特殊品种 培育 推广 鉴定 审定 标准
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藏鸡二元杂交组合生产性能及血液生理指标分析 被引量:5
2
作者 胡玉萍 王星果 +4 位作者 沈曼曼 曲亮 窦套存 郭军 王克华 《中国家禽》 北大核心 2020年第6期25-30,共6页
研究旨在通过藏鸡杂交确定其对藏鸡生产性能的提高效果。以藏鸡纯系及其他2个地方鸡培育品系为素材,组成3个藏鸡二元杂交组合和2个纯系组合,测定5个组合13周龄公鸡屠宰性能、肉品质和血液生理指标及52周龄母鸡产蛋性能和40周龄蛋品质。... 研究旨在通过藏鸡杂交确定其对藏鸡生产性能的提高效果。以藏鸡纯系及其他2个地方鸡培育品系为素材,组成3个藏鸡二元杂交组合和2个纯系组合,测定5个组合13周龄公鸡屠宰性能、肉品质和血液生理指标及52周龄母鸡产蛋性能和40周龄蛋品质。结果显示:杂交组合活重大于藏鸡纯系,屠宰率高于C3纯系,52周龄产蛋率和入舍鸡产蛋数均高于藏鸡纯系,40周龄蛋重、蛋白高度、哈氏单位、蛋壳强度也高于藏鸡纯系,红细胞分布宽度等高于C3纯系。综合分析表明,含藏鸡血缘的杂交鸡性能与藏鸡纯系和C3纯系相比有一定优势,且血液生理指标优于C3纯系,研究结果为藏鸡杂交利用奠定基础。 展开更多
关键词 藏鸡 杂交组合 生产性能 血液生理指标
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miR-34家族抑制肿瘤作用的研究进展 被引量:5
3
作者 陈晨 王欣 沈兴家 《温州医科大学学报》 CAS 2016年第3期231-234,F0003,共5页
miR-34家族包括miR-34a、miR-34b和miR-34c,广泛分布于节肢动物、线虫纲动物以及哺乳动物中。最近研究发现,miR-34家族可通过多种途径参与肿瘤、心血管疾病和衰老相关信号转导网络的调控,与肿瘤、心血管疾病和衰老的发生、发展密切相关... miR-34家族包括miR-34a、miR-34b和miR-34c,广泛分布于节肢动物、线虫纲动物以及哺乳动物中。最近研究发现,miR-34家族可通过多种途径参与肿瘤、心血管疾病和衰老相关信号转导网络的调控,与肿瘤、心血管疾病和衰老的发生、发展密切相关。本文对miR-34家族在上述领域中的功能研究进行综述。 展开更多
关键词 MICRORNA miR-34 肿瘤 心血管疾病 衰老 综述文献
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强健优质家蚕新品种丝雨二号的育成 被引量:3
4
作者 赵巧玲 吴怀民 +4 位作者 裘智勇 楼黎静 夏定国 钱文春 刘震玲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期672-677,共6页
为适应高效省力化蚕业生产发展需求,培育健康体质和优良茧丝质均衡的家蚕新品种,采用杂交育种方法进行亲本筛选、性状选择及杂交组配,通过实验室比较鉴定和农村比较鉴定同时进行的培育模式,培育出综合性状优良的家蚕新品种丝雨二号。其... 为适应高效省力化蚕业生产发展需求,培育健康体质和优良茧丝质均衡的家蚕新品种,采用杂交育种方法进行亲本筛选、性状选择及杂交组配,通过实验室比较鉴定和农村比较鉴定同时进行的培育模式,培育出综合性状优良的家蚕新品种丝雨二号。其体质强健、发育整齐、丝质较优、稳产性好、繁育性能好。该品种的全国秋蚕期实验室共同鉴定成绩为:四龄起蚕虫蛹率92.44%,万蚕产茧量18.38kg,洁净95.49分,解舒率79.26%,鲜毛茧出丝率18.69%,茧层率23.68%,茧丝长1230m;秋蚕期生产鉴定成绩中的每盒种产茧量38.67kg;其原种公斤茧制种量在4.2张以上。丝雨二号于2015年9月2日通过国家农作物品种审定委员会审定,适宜在长江流域、黄河流域秋季饲养。 展开更多
关键词 家蚕 新品种 优质 强健 丝雨二号
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二化性家蚕滞育、非滞育和即时浸酸卵中糖代谢相关酶mRNA水平和活性的变化 被引量:3
5
作者 许瑾 蒋涛 +6 位作者 薛鹏 沈广胜 黄静怡 朱娟 王梅仙 唐顺明 沈兴家 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1431-1440,共10页
【目的】探究家蚕Bombyx mori胚胎发育早期卵内糖代谢与滞育的关系。【方法】以家蚕二化性品种"秋丰"活化越年卵为材料,一部分于17℃暗催青,孵化后常规饲养,制备非滞育命运卵(ND);另一部分于25℃明催青,孵化后常规饲养,制备... 【目的】探究家蚕Bombyx mori胚胎发育早期卵内糖代谢与滞育的关系。【方法】以家蚕二化性品种"秋丰"活化越年卵为材料,一部分于17℃暗催青,孵化后常规饲养,制备非滞育命运卵(ND);另一部分于25℃明催青,孵化后常规饲养,制备滞育命运卵(DD),再用盐酸溶液处理部分DD卵制备即时浸酸卵(IA)。在卵产下或浸酸后0,2,6,12,24,48,72和96 h分别取样,利用qRT-PCR测定家蚕卵中己糖激酶(hexokinase,HK)、磷酸果糖激酶(phosphofructokinase,PFK)、山梨醇脱氢酶(sorbitol dehydrogenase,SDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)和海藻糖酶(trehalase,TRE)5种糖代谢相关酶基因的mRNA表达水平,利用紫外-可见分光光度法测定家蚕卵中这5种酶的活性。【结果】家蚕糖酵解途径关键酶己糖激酶(BmHK)和磷酸果糖激酶(BmPFK),以及糖分解代谢关键酶山梨醇脱氢酶(BmSDH-1)和海藻糖酶(BmTRE)在ND和IA中的mRNA水平和活性均普遍高于在DD中的;而糖异生途径相关的磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(BmPEPCK)在DD中的mRNA水平和活性均高于在ND和IA中的。【结论】结果提示,DD因胚胎滞育的需要,胚胎发育早期卵内糖代谢以能量和物质的贮存为主;而ND和IA由于胚胎发育进程较快,糖代谢以物质分解代谢为主。本研究初步揭示了家蚕卵内糖代谢与滞育的关系,有助于更好地理解家蚕滞育的分子机制。 展开更多
关键词 家蚕 滞育 糖代谢 转录水平 酶活性
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家蚕滞育生理及其分子调控机制研究进展 被引量:3
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作者 蒋涛 沈兴家 +1 位作者 唐顺明 钱平 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1031-1038,共8页
滞育是昆虫等动物应对周期性不利环境表现出的一种发育停滞的生理过程。家蚕既是重要的经济昆虫,也是鳞翅目模式生物,研究家蚕滞育生理及分子调控机制,对于理解昆虫的发育生理与适应性进化以及制定农林害虫防治策略等都有重要的理论和... 滞育是昆虫等动物应对周期性不利环境表现出的一种发育停滞的生理过程。家蚕既是重要的经济昆虫,也是鳞翅目模式生物,研究家蚕滞育生理及分子调控机制,对于理解昆虫的发育生理与适应性进化以及制定农林害虫防治策略等都有重要的理论和实践意义。国内外学者的研究证实,家蚕滞育是环境因素与遗传因素共同作用的结果,当环境信号被蚕体感知后转化形成滞育信号,再经复杂的信号转导途径,通过激素调节和营养物质储备与代谢的调控,使家蚕体内建立起适应滞育的生理代谢体系。近年来的研究进一步表明,家蚕滞育激素受体蛋白、热休克蛋白以及磷酸化作用参与的基因表达调控是家蚕滞育重要的分子调控机制,与滞育的起始、维持、终止密切相关。本文系统概述了上述家蚕滞育生理机制与分子调控机制的研究成果。 展开更多
关键词 家蚕 昆虫 滞育 生理基础 分子机制
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Bmo-miR-2755*对丝素蛋白基因BmFib-L和BmP25表达的调控作用 被引量:3
7
作者 范洋洋 陈晨 +4 位作者 王欣 宋菲 唐顺明 易咏竹 沈兴家 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期847-853,共7页
为了研究家蚕miRNA对丝素蛋白基因表达的调控作用,采用生物信息学方法筛选获得对家蚕丝素轻链基因(BmFib-L)和P25蛋白基因(BmP25)有潜在调控作用的Bmo-miR-2755*。利用半定量RT-PCR技术分析Bmo-miR-2755*及其靶基因BmFib-L、BmP2... 为了研究家蚕miRNA对丝素蛋白基因表达的调控作用,采用生物信息学方法筛选获得对家蚕丝素轻链基因(BmFib-L)和P25蛋白基因(BmP25)有潜在调控作用的Bmo-miR-2755*。利用半定量RT-PCR技术分析Bmo-miR-2755*及其靶基因BmFib-L、BmP25在家蚕4~5龄期幼虫后部丝腺和5龄3 d幼虫不同组织器官中的表达水平,结果显示三者在后部丝腺组织中的表达水平都较高,呈现严格的时空特异性。以pcDNA3质粒为载体,构建Bmo-miR-2755*的重组表达载体pcDNA3[ie1-egfpprimiR-2755*-SV40];以pGL3.0-Basic质粒为载体,分别构建BmFib-L 3'UTR、BmP25 3'UTR与荧光素酶报告基因luc融合的重组报告质粒pGL3.0[A3-luc-Fib-L-3'UTR-SV40]和pGL3.0[A3-luc-P25-3'UTR-SV40]。以海肾荧光素酶表达载体pRL-CMV为内参,分别将构建的Bmo-miR-2755*重组表达载体和2个重组报告质粒共转染BmN细胞,通过检测细胞中的荧光素酶活性,明确Bmo-miR-2755*可显著下调BmFib-L基因的表达,并能上调BmP25基因的表达,但上调作用未达显著水平。上述结果为研究家蚕miRNA的功能和阐明蚕丝蛋白基因表达调控分子机制提供了新的实验数据。 展开更多
关键词 miRNA 家蚕 Bmo-miR-2755* 丝素轻链基因 P25基因 表达调控
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日粮中添加桑叶DNJ对49~56周龄蛋鸡生产性能、蛋品质和机体健康的影响 被引量:2
8
作者 丰源 李涛 +5 位作者 陈子康 侯启瑞 任永利 王明珠 沈曼曼 赵卫国 《饲料工业》 CAS 北大核心 2023年第5期49-54,共6页
试验旨在探究桑叶1-脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin,DNJ)对蛋鸡生产性能、蛋品质、器官指数及繁殖激素水平的影响。选取49~56周龄海兰褐壳蛋鸡192只,随机分为4组(每组4个重复,每个重复12只),对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分... 试验旨在探究桑叶1-脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin,DNJ)对蛋鸡生产性能、蛋品质、器官指数及繁殖激素水平的影响。选取49~56周龄海兰褐壳蛋鸡192只,随机分为4组(每组4个重复,每个重复12只),对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加50、100 mg/kg和150 mg/kg的桑叶DNJ提取物。预试期1周,正式试验期8周。试验期间统计产蛋性能、饲料转化率,测定蛋品质,试验第8周屠宰测定器官指数和生殖激素水平。结果表明:①150 mg/kg的桑叶DNJ添加水平可显著提高产蛋率(P<0.05)。②150 mg/kg的桑叶DNJ添加水平可显著提高蛋黄颜色(P<0.05)。③100 mg/kg的桑叶DNJ添加水平显著降低腹脂指数(P<0.05);150 mg/kg添加水平显著提高肝脏指数,并显著降低腺胃指数(P<0.05)。④150 mg/kg的桑叶DNJ添加水平能够显著增加空肠指数,降低盲肠指数、空肠长、回肠长(P<0.05);添加不同水平的桑叶DNJ均显著降低回肠指数(P<0.05)。⑤100 mg/kg添加水平可显著提高小黄卵泡数(P<0.05);150 mg/kg添加水平显著增加小黄卵泡数、排卵后卵泡数(P<0.05)。⑥100 mg/kg和150 mg/kg桑叶DNJ添加水平可显著降低血液中三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平(P<0.05)。⑦添加不同水平的桑叶DNJ均能提高孕酮和雌二醇含量,但差异不显著(P>0.05)。综上,49~56周龄蛋鸡日粮中添加150 mg/kg的桑叶DNJ能提高海兰褐壳蛋鸡产蛋率,提高蛋黄颜色,降低腹脂指数和脂质代谢水平,提高肝脏指数,提高小黄卵泡数和排卵后卵泡数(P<0.05),桑叶DNJ的适宜添加量为150 mg/kg。 展开更多
关键词 桑叶 1-脱氧野尻霉素 蛋鸡 生产性能 繁殖性能 脂质水平
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家蚕己糖激酶基因进化分析及其多转录本在胚胎早期发育过程中的表达特性 被引量:3
9
作者 许瑾 邵云华 +5 位作者 黄静怡 沈广胜 朱娟 王梅仙 唐顺明 沈兴家 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1701-1708,共8页
【目的】明确家蚕(Bombyx mori)二化性品系胚胎早期发育过程中己糖激酶基因(BmHK)不同转录本的表达特性,为深入探究BmHK基因各转录本的生物学功能及揭示其在家蚕胚胎早期发育中的作用机制提供理论依据。【方法】从NCBI检索并下载家蚕等1... 【目的】明确家蚕(Bombyx mori)二化性品系胚胎早期发育过程中己糖激酶基因(BmHK)不同转录本的表达特性,为深入探究BmHK基因各转录本的生物学功能及揭示其在家蚕胚胎早期发育中的作用机制提供理论依据。【方法】从NCBI检索并下载家蚕等12种昆虫的HK氨基酸序列,采用MEGA 7.0的邻接法(NJ)构建基于HK氨基酸序列相似性的系统发育进化树。以家蚕二化性品系秋丰活化越年蚕卵(丙2胚胎)为材料,分别制备非滞育命运卵(ND)、滞育命运卵(DD)和即时浸酸卵(IA),采用实时荧光定量PCR检测BmHK基因各转录本在家蚕二化性品系胚胎早期发育过程中的表达特性。【结果】BmHK基因属于HSP70-actin家族,存在4个不同的转录本,其长度分别为4610、4608、2818和1520 bp,依次命名为BmHK-a、BmHK-b、BmHK-c和BmHK-d。BmHK-a在3种蚕卵胚胎早期发育过程中整体上呈先升高后降低的变化趋势,且各时间点均表现为IA蚕卵>ND蚕卵>DD蚕卵,IA蚕卵中的BmHK-a相对表达量于发育2 h达峰值,在ND蚕卵和DD蚕卵中于发育48 h达峰值,此后其表达快速下调,至发育96 h均处于较低水平;BmHK-b在3种蚕卵中的表达水平整体上表现为IA蚕卵>ND蚕卵>DD蚕卵,3种蚕卵中的BmHK-b相对表达量变化趋势基本一致,均随发育时间推移呈逐渐上升趋势;BmHK-c在3种蚕卵中的表达差异明显,初产蚕卵中已有较高的表达水平,受精后迅速升高,至发育72 h后BmHK-c在3种蚕卵中的相对表达量再次升高;BmHK-d在3种蚕卵中的相对表达量整体上呈先升高后降低的变化趋势,且各时间点均表现为ND蚕卵>IA蚕卵>DD蚕卵,但IA蚕卵中BmHK-d表达峰值出现的时间早于DD蚕卵和ND蚕卵。【结论】BmHK-a和BmHK-d主要在家蚕胚胎早期发育(产卵或浸酸后3 d)过程中发挥重要作用;BmHK-b虽然也参与家蚕胚胎早期发育过程,但不是主要的糖代谢相关酶;BmHK-c与家蚕胚胎早期发育关系密切,通过糖酵解为胚� 展开更多
关键词 家蚕 己糖激酶(HK) 转录本 滞育 糖酵解 胚胎早期发育
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家蚕2龄不眠蚕突变体的发现及遗传特性分析 被引量:3
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作者 赵巧玲 吴凡 +2 位作者 夏定国 裘智勇 沈兴家 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期423-430,共8页
在家蚕品种C603中发现了一种新的不眠蚕突变体。该突变体幼虫在2龄将眠初期体表有光泽,但进食量减少,蚕体基本不发育,且持续6~8 d仍然不能入眠和蜕皮,不能正常发育至3龄期,并终因体能耗尽陆续死亡。将该突变体命名为2龄不眠蚕(non-molt... 在家蚕品种C603中发现了一种新的不眠蚕突变体。该突变体幼虫在2龄将眠初期体表有光泽,但进食量减少,蚕体基本不发育,且持续6~8 d仍然不能入眠和蜕皮,不能正常发育至3龄期,并终因体能耗尽陆续死亡。将该突变体命名为2龄不眠蚕(non-molting at the 2nd instar,nm2)。遗传分析显示,正常情况下发生突变体的蛾区中正常型个体与突变个体的比例约3∶1,有纯合致死现象,因此认为该突变体受1个隐性单基因控制。但是,不同季节饲养该突变系统出现的性状分离比不太稳定;与正常型品种杂交的F2、BC1F和BC1M世代其突变性状分离比率远低于25%。2龄第2天添食蜕皮激素能拯救2龄不眠蚕向正常发育转变,但不能改变不眠蚕的遗传特性。在nm2突变体检测到蜕皮激素合成相关基因cyp307a2的表达,而在与该突变体表型相似的nm-g突变体中未检测到该基因的表达,因此判断nm2是一个新的突变体,并初步推测蚕体内蜕皮激素水平低是nm2突变体产生的重要生理因素。 展开更多
关键词 家蚕 2龄不眠蚕 突变体 隐性遗传 蜕皮激素
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T/CNFIA 104—2018《桑椹(果)酒》标准简介 被引量:3
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作者 沈兴家 高庆国 +4 位作者 王建民 李龙 周晓杰 陈薇伊 刘挺 《中国蚕业》 2018年第3期66-69,共4页
近年来,桑椹酒的研究得到了较快的发展,市场上出现了桑椹浸泡酒、桑椹发酵酒、桑椹蒸馏酒和桑椹白兰地等多种类型的桑椹酒。但是,桑椹酒标准研究相对滞后。2018年5月1日中国食品工业协会发布了首个桑椹酒标准T/CNFIA 104—2018《桑椹(果... 近年来,桑椹酒的研究得到了较快的发展,市场上出现了桑椹浸泡酒、桑椹发酵酒、桑椹蒸馏酒和桑椹白兰地等多种类型的桑椹酒。但是,桑椹酒标准研究相对滞后。2018年5月1日中国食品工业协会发布了首个桑椹酒标准T/CNFIA 104—2018《桑椹(果)酒》。介绍了T/CNFIA 104—2018《桑椹(果)酒》标准规定的桑椹(果)酒的定义、分类、感官要求和主要理化指标,以及各指标的分析方法;阐述了该标准发布与实施的意义,有助于更好地理解和执行该标准。 展开更多
关键词 桑椹 果酒 质量标准 感官要求 理化指标
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6个种源地不同桑树品种叶柄解剖结构与水分运输能力初探 被引量:3
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作者 沈萩荻 吴艳 +2 位作者 刘利 曹旭 程嘉翎 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期1-8,共8页
叶柄是水分和营养物质在茎和叶间运输的重要组织。采用石蜡切片技术和木材离析技术,分析6个种源地不同的桑树品种一年生扦插苗叶柄的显微结构特征,对叶柄的水分运输能力和抗蒸腾能力进行评价,并对桑树的抗旱性进行探讨。结果显示在6个... 叶柄是水分和营养物质在茎和叶间运输的重要组织。采用石蜡切片技术和木材离析技术,分析6个种源地不同的桑树品种一年生扦插苗叶柄的显微结构特征,对叶柄的水分运输能力和抗蒸腾能力进行评价,并对桑树的抗旱性进行探讨。结果显示在6个桑品种中,吴堡桑的叶柄角质层和厚角组织厚度较小,但维管束最为发达,具有较高的维管束面积占比、中等水平的导管直径和最大的导管长度,水分运输能力最强,同时还能保持对栓塞较强的抵抗性,推测其抗旱能力可能较强,适宜种植在较为干旱的地区;育711号的叶柄角质层较薄,云果桑1号叶柄的厚角组织最薄,这2个品种的叶柄具有较多的维管束,但其维管束面积占比、导管孔腔面积以及导管直径在6个品种中较小,故抗蒸腾能力与水分运输能力均较低,其抗旱能力可能相对较弱,更加适合在水分充足的环境中生长。研究结果为阐释桑树叶柄结构、水分运输能力与桑树抗旱能力之间的关系提供了一定的实验依据。 展开更多
关键词 桑树 叶柄 解剖结构 水分运输
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家蚕miR-0047对丝胶蛋白基因BmSer-1表达的调控作用研究 被引量:2
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作者 钱平 蒋涛 +4 位作者 何平 陈晨 唐旭东 唐顺明 沈兴家 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期922-928,共7页
对家蚕中部丝腺小RNA高通量测序获得若干新miRNA,生物信息学分析发现Bmo-miR-0047可能对家蚕丝胶蛋白基因Bm Ser-1有调控作用。设计特异性茎环引物,利用半定量RT-PCR检测分析家蚕5龄3 d幼虫丝腺(包括前、中、后部丝腺)、头部、脂肪体、... 对家蚕中部丝腺小RNA高通量测序获得若干新miRNA,生物信息学分析发现Bmo-miR-0047可能对家蚕丝胶蛋白基因Bm Ser-1有调控作用。设计特异性茎环引物,利用半定量RT-PCR检测分析家蚕5龄3 d幼虫丝腺(包括前、中、后部丝腺)、头部、脂肪体、表皮、中肠、马氏管、精巢/卵巢、血淋巴细胞和气管等12个器官组织中Bmo-miR-0047的表达情况。结果显示,中部丝腺中Bmo-miR-0047的相对表达量明显高于其他组织,说明在家蚕5龄幼虫期Bmo-miR-0047对Bm Ser-1基因的表达调控存在时空特异性。为了进一步分析Bmo-miR-0047对Bm Ser-1基因表达的调控作用,构建重组表达载体pc DNA3.0(ie1-egfp-pri-miR-0047-SV40)和p GL3(A3-luc-Bm Ser-1 3'UTR-SV40),并以海肾荧光素酶报告质粒pRL-CMV为内参,利用家蚕卵巢培养细胞Bm N进行共转染。转染后检测发现实验组Bm N细胞中的荧光素酶活性与对照组相比显著减弱,表明Bmo-miR-0047在体外培养细胞中对Bm Ser-1基因的表达具有负调控作用。 展开更多
关键词 家蚕 微小RNA Bmo-miR-0047 丝胶蛋白基因Ser-1 转录后调控
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家蚕滞育关联基因的研究进展 被引量:2
14
作者 陈艳荣 朱娟 沈兴家 《中国蚕业》 2021年第1期36-45,共10页
昆虫滞育是受基因控制与外界环境多种因素影响的生物学过程,涉及基因众多,调控网络复杂,目前其分子机制仍未清晰。国内外滞育调控的相关研究多数基于家蚕、果蝇、麻蝇等模式昆虫。介绍了家蚕滞育关联基因的研究现状及进展,包括分类、生... 昆虫滞育是受基因控制与外界环境多种因素影响的生物学过程,涉及基因众多,调控网络复杂,目前其分子机制仍未清晰。国内外滞育调控的相关研究多数基于家蚕、果蝇、麻蝇等模式昆虫。介绍了家蚕滞育关联基因的研究现状及进展,包括分类、生理功能、基因间互作、部分基因涉及的信号通路及研究热点等,为促进其在农林害虫的防治途径或天敌保护利用等方面的应用提供参考。 展开更多
关键词 家蚕 滞育 滞育关联基因 生物钟基因 内分泌基因
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一个二化性家蚕醛酮还原酶基因的克隆及序列与表达分析(英文) 被引量:2
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作者 陈艳荣 朱娟 +4 位作者 蒋涛 谭志承 陈艳花 唐顺明 沈兴家 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期187-194,共8页
醛酮还原酶(aldo-keto reductase,AKR)超级家族成员以还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸作为其辅酶,将醛酮类化合物还原成相应的醇类,其作用底物范围广泛,包括糖类、脂肪醛和甾体类激素等,在许多重要生物学反应中发挥关键作用。以二化性... 醛酮还原酶(aldo-keto reductase,AKR)超级家族成员以还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸作为其辅酶,将醛酮类化合物还原成相应的醇类,其作用底物范围广泛,包括糖类、脂肪醛和甾体类激素等,在许多重要生物学反应中发挥关键作用。以二化性家蚕品系秋丰为材料,利用RT-PCR分别从滞育命运组和非滞育命运组克隆出AKR蛋白的cDNA序列。AKR蛋白序列由343个氨基酸组成,与黑腹果蝇和人的AKR分别有43%和38%的序列一致性。基于蛋白质序列构建的系统发育树显示,家蚕AKR蛋白属于AKR2E亚家族,其氨基酸序列与该家族成员序列一致性超过30%,故命名为AKR2E-like。将akr2e-like基因的cDNA序列克隆进表达载体pET-28a(+)中进行原核重组表达,SDS-PAGE电泳和Western blot分析显示重组蛋白被成功表达。qRT-PCR分析表明,ark2e-like基因表达受发育环境调节:在滞育诱导条件下,该基因在家蚕化蛹早期的表达量持续增加,在化蛹后第4天mRNA丰度达到最高值;而在非滞育诱导条件下,化蛹后ark2e-like基因表达量并无明显波动。上述结果表明,ark2e-like基因有可能在家蚕二化性品系的滞育准备期起关键作用。 展开更多
关键词 醛酮还原酶 滞育准备 家蚕 表达
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樗蚕孵化酶基因的克隆与表达特征分析 被引量:2
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作者 浦月霞 刘龙山 +6 位作者 龚美霞 冉艳萍 贾雪峰 黄景滩 宋宪军 安春梅 唐顺明 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期382-389,共8页
樗蚕(Philosamia cynthia cynthia)是重要的野蚕资源。为从分子水平研究樗蚕的孵化机制,以催青第9天的樗蚕卵为材料提取总RNA并反转录合成c DNA,根据鳞翅目昆虫孵化酶基因的保守序列设计简并引物,通过RACE-PCR获得樗蚕孵化酶基因全长c... 樗蚕(Philosamia cynthia cynthia)是重要的野蚕资源。为从分子水平研究樗蚕的孵化机制,以催青第9天的樗蚕卵为材料提取总RNA并反转录合成c DNA,根据鳞翅目昆虫孵化酶基因的保守序列设计简并引物,通过RACE-PCR获得樗蚕孵化酶基因全长c DNA,命名为Pcc HE(Gen Bank登录号:MH119084)。Pcc HE基因c DNA全长为964 bp,由5'-UTR、3'-UTR和885bp的ORF组成,编码294个氨基酸;Pcc HE蛋白序列含有孵化酶特征序列锌指结合基序和Met-转角基序;基于Pcc HE氨基酸序列与16种动物孵化酶同源氨基酸序列构建的系统进化分析树显示,樗蚕与蓖麻蚕之间的亲缘关系最近。半定量RT-PCR检测Pcc HE在樗蚕胚胎发育早期的表达维持在较低水平,催青第3天小幅度增加,第9天时表达水平开始大幅上升,至孵化前达到最高水平;Pcc HE在5龄3 d幼虫中肠中高水平表达,并且在马氏管中也有表达,这是首次在昆虫马氏管中发现孵化酶基因的表达。上述结果表明,Pcc HE与樗蚕的胚胎发育和孵化密切相关,还可能参与幼虫期的食物消化、蛋白质代谢等生物学过程。 展开更多
关键词 樗蚕 孵化酶 基因克隆 表达特性
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家蚕追寄蝇谷胱甘肽硫转移酶GST1-1的特性分析及其在灭蚕蝇胁迫下的活性变化 被引量:2
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作者 王闪闪 王耒耒 +7 位作者 陈诺婧依 Zufan Bekele Kassa 张彩红 王梅仙 朱娟 沈兴家 沈中元 唐顺明 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期198-208,共11页
家蚕追寄蝇(Exorista sorbillans Wiedemann)寄生家蚕幼虫导致蝇蛆病的发生。谷胱甘肽硫转移酶(glutathione S-transferase, GST)是一类多功能酶家族,对昆虫在解毒、杀虫剂抗性、氧化应激保护等方面起到重要的作用。本文以家蚕追寄蝇为... 家蚕追寄蝇(Exorista sorbillans Wiedemann)寄生家蚕幼虫导致蝇蛆病的发生。谷胱甘肽硫转移酶(glutathione S-transferase, GST)是一类多功能酶家族,对昆虫在解毒、杀虫剂抗性、氧化应激保护等方面起到重要的作用。本文以家蚕追寄蝇为实验材料,使用RACE技术,获得了家蚕追寄蝇谷胱甘肽硫转移酶基因的全长cDNA序列,将其命名为EsGST1-1(GenBank:OK104864)。EsGST1-1全长813 bp,包含一段627 bp完整开放阅读框(ORF),编码208个氨基酸残基,分子质量为23.58 kD,等电点为5.498,该蛋白属于GST的Delta类家族。序列比对结果显示,EsGST1-1与丝光绿蝇(Lucilia sericata)的GST基因亲缘关系最近。进一步检测了家蚕追寄蝇EsGST1-1基因在不同发育时期和不同组织的表达模式,结果显示在卵产后0 h、幼虫脂肪体和表皮、蛹期第6天以及雌雄成虫的腹部与足部中EsGST1-1高量表达。此外,利用原核体外诱导表达获得了EsGST1-1的重组蛋白。酶活试验结果显示EsGST1-1酶活性为0.820 4 U/mg。热稳定性实验结果显示EsGST1-1在30~40℃时活性最高,随温度的升高活性下降。对灭蚕蝇胁迫下的GST活性测定发现:杀虫活性呈剂量依赖效应;寄蝇谷胱甘肽硫转移酶活力与灭蚕蝇剂量呈负相关;EsGST1-1基因的表达量与灭蚕蝇剂量呈负相关。上述研究结果为进一步开发防治蝇蛆病新型药剂提供基础信息。 展开更多
关键词 家蚕追寄蝇 GST1-1 基因克隆 酶学特性 活性分析
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家蚕滞育关联山梨醇脱氢酶基因的启动子活性分析 被引量:2
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作者 朱娟 谢雨辰 +3 位作者 陈艳荣 唐顺明 易咏竹 沈兴家 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期391-397,共7页
【目的】明确家蚕Bombyx mori滞育关联基因山梨醇脱氢酶基因BmSDH(BmSDH-1,BmSDH-2a和BmSDH-2b)的转录特性。【方法】用5'RACE技术确定家蚕3个BmSDH基因的转录起始位点。利用PCR技术克隆3个BmSDH基因约1 kb及BmSDH-2a不同长度的启... 【目的】明确家蚕Bombyx mori滞育关联基因山梨醇脱氢酶基因BmSDH(BmSDH-1,BmSDH-2a和BmSDH-2b)的转录特性。【方法】用5'RACE技术确定家蚕3个BmSDH基因的转录起始位点。利用PCR技术克隆3个BmSDH基因约1 kb及BmSDH-2a不同长度的启动子区序列,分别构建带有萤火虫荧光素酶报告基因的载体pGL3-BmSDH-P-luc,并与pRL-CMV报告质粒(含海肾荧光素酶报告基因)共转染家蚕BmN细胞,通过双荧光素酶检测系统检测BmSDH基因启动子活性;分别在BmN细胞培养基中添加昆虫保幼激素、蜕皮激素和滞育激素,通过双荧光素酶检测系统检测不同浓度激素处理对BmSDH-2a基因启动子活性的影响。【结果】BmSDH-1的转录起始位点为A(-41),BmSDH-2a的转录起始位点为C(-41),BmSDH-2b的转录起始位点为A(-40)(翻译起始位点为+1)。双荧光素酶检测结果表明,BmSDH-2a启动子活性极显著高于BmSDH-1和BmSDH-2b启动子,BmSDH-2a 355 bp长度片段的启动子活性极显著高于674 bp和1 117 bp长度片段。用不同浓度滞育激素处理BmN细胞后,BmSDH-2a的1 117 bp启动子活性随着滞育激素浓度的升高有上升的趋势,当浓度高于100 ng/mL时启动子活性有所降低但仍保持在较高水平;用保幼激素进行处理后,随着激素浓度的升高启动子活性逐渐降低;蜕皮激素处理后,0.1 ng/mL激素显著增强启动子活性,当激素浓度继续升高启动子活性逐渐降低。【结论】确定了BmSDH基因的转录起始位点。BmSDH-2a启动子活性显著高于BmSDH-1和BmSDH-2b启动子,一定浓度的蜕皮激素能显著提高BmSDH-2a启动子活性。研究结果有助于阐明BmSDH基因在家蚕滞育中的功能。 展开更多
关键词 家蚕 启动子 山梨醇脱氢酶 滞育 转录起始位点 表达调控
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环介导等温扩增技术原理及其在农业中的应用 被引量:2
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作者 蒋涛 曾光远 +1 位作者 唐顺明 沈兴家 《江苏科技大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2017年第1期107-113,共7页
环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种新型的能在恒定温度条件下实现核酸序列快速扩增的技术.由于该技术具有快速、便捷、高效和低成本等优势,目前已被广泛应用于分子诊断方面.文中介绍了LAMP技术的... 环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种新型的能在恒定温度条件下实现核酸序列快速扩增的技术.由于该技术具有快速、便捷、高效和低成本等优势,目前已被广泛应用于分子诊断方面.文中介绍了LAMP技术的原理、研究进展、分子检测方法,以及该技术在农业分子诊断与基因检测方面的应用. 展开更多
关键词 环介导等温扩增 检测 分子诊断 农业 应用
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家蚕bmo-miR-217对核型多角体病毒(BmNPV)lef-1基因表达的调控作用 被引量:2
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作者 王明磊 何芬 +4 位作者 王平阳 唐顺明 夏定国 沈兴家 赵巧玲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期217-224,共8页
昆虫的单链小分子RNA(microRNAs)不仅通过与自身的靶基因互补进行转录后水平调控,从而参与重要的生命过程,并且还可以与病原体靶基因相互作用,在免疫防御方面发挥重要功能。给家蚕5龄眠起幼虫接种家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)后72 h,收... 昆虫的单链小分子RNA(microRNAs)不仅通过与自身的靶基因互补进行转录后水平调控,从而参与重要的生命过程,并且还可以与病原体靶基因相互作用,在免疫防御方面发挥重要功能。给家蚕5龄眠起幼虫接种家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)后72 h,收集蚕体血淋巴提取总RNA用于高通量测序,经克隆验证获得一条由Bm NPV诱导上调表达的家蚕miRNA(bmo-miR-217),用生物信息学方法预测到bmo-miR-217对应的一个病毒靶基因为lef-1。构建bmo-miR-217及Bm NPV lef-1 3'-UTR的表达载体,并共转染家蚕卵巢培养细胞Bm N,于48 h后通过检测细胞的双荧光素酶相对活性,显示出bmo-miR-217可显著下调Bm NPV lef-1基因的表达(P<0.05)。已知lef-1是Bm NPV侵染复制的必需基因之一,因此抑制其表达是家蚕先天免疫的一种有效策略。 展开更多
关键词 家蚕 微小RNA bmo-miR-217 家蚕核型多角体病毒 lef-1基因
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