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白藜芦醇联合放疗对食管癌细胞株凋亡的影响 被引量：17
1
作者 胡格 朱宇 +2 位作者 周月鹏 毛朝明 陈德玉 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2017年第3期194-199,共6页
目的:探讨白藜芦醇对人食管鳞癌细胞株TE-10、KYSE-150的放疗增敏作用和机制。方法:体外培养人食管鳞癌细胞株TE-10和KYSE-150,CCK8法检测不同浓度白藜芦醇(0、25、50、75、100μmol/L)对食管鳞癌细胞株增殖能力的影响,确定作用浓度;CCK... 目的:探讨白藜芦醇对人食管鳞癌细胞株TE-10、KYSE-150的放疗增敏作用和机制。方法:体外培养人食管鳞癌细胞株TE-10和KYSE-150,CCK8法检测不同浓度白藜芦醇(0、25、50、75、100μmol/L)对食管鳞癌细胞株增殖能力的影响,确定作用浓度;CCK8法检测75μmol/L白藜芦醇与不同照射剂量(2、4、8 Gy)联合应用对细胞增殖的影响;克隆形成实验检测单纯照射组和白藜芦醇联合照射组细胞放射敏感性的变化;流式细胞术分析空白对照组、单纯照射组(4 Gy)、白藜芦醇组(75μmol/L)和白藜芦醇联合照射组细胞凋亡率;蛋白质印迹法测定食管鳞癌细胞不同处理后p-H2A.X(Tyr142)、p-H2A.X(Ser139)、JNK1、cleaved-caspase3的表达。结果:CCK8结果显示,白藜芦醇对食管癌TE-10、KYSE-150细胞生长并无明显抑制作用;克隆形成实验提示,与单纯照射组相比,白藜芦醇联合照射组细胞放射敏感性明显提高(P<0.01);流式细胞术结果显示,与单纯照射组相比,白藜芦醇联合照射显著地促进了食管鳞癌细胞的凋亡(P<0.01);蛋白质印迹结果显示白藜芦醇处理后食管鳞癌细胞的p-H2A.X(Tyr142)表达水平明显高于空白对照组和照射组,结合放射处理进一步激活JNK1的表达,促进了cleaved-caspase3蛋白表达上调。结论:白藜芦醇预处理可以增加放射治疗后食管癌细胞凋亡,发挥放疗增敏的作用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 食管鳞状细胞癌 放疗敏感性
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H2-calponin在食管鳞癌中的表达及意义 被引量：2
2
作者 周玲 凌锐 +2 位作者 周月鹏 毛朝明 陈德玉 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2018年第2期104-108,116,共6页
目的:探讨H2-钙调理蛋白(H2-calponin)在食管鳞癌中的表达及意义。方法:免疫组化技术检测30例食管鳞癌患者癌组织及癌旁组织芯片中H2-calponin的表达水平;体外培养人食管鳞癌ECA109、TE-1细胞株和正常食管上皮Het-1a细胞;荧光定量PCR和... 目的:探讨H2-钙调理蛋白(H2-calponin)在食管鳞癌中的表达及意义。方法:免疫组化技术检测30例食管鳞癌患者癌组织及癌旁组织芯片中H2-calponin的表达水平;体外培养人食管鳞癌ECA109、TE-1细胞株和正常食管上皮Het-1a细胞;荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测食管鳞癌细胞株中H2-calponin的表达;将食管鳞癌TE-1细胞分为空白对照组(常规培养)、阴性对照组(转染空载体siRNA)和H2-calponin siRNA组(转染H2-calponin siRNA),采用蛋白质印迹法测定细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、内皮生长因子-A(VEGF-A)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)蛋白的表达;ELISA法测定各组细胞培养上清液中MMP-2,MMP-9和VEGF-C含量;荧光定量PCR检测NF-κB通路抑制剂PDTC处理前(0 h)及处理后0.5,1,2,4,8,12 h H2-calponin mRNA的表达;蛋白质印迹技术检测H2-calponin及NF-κB通路蛋白的表达。结果:免疫芯片结果显示,食管鳞癌组织中H2-calponin表达量低于癌旁组织,H2-calponin阳性表达率与食管鳞癌患者性别、年龄、肿瘤部位及病理分级之间无明显相关性(P均>0.05);荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌细胞中H2-calponin表达明显低于正常食管细胞(P<0.01);下调H2-calponin表达后,PCNA、E-钙黏蛋白和VEGF-A表达无明显变化,而波形蛋白、MMP-2、MMP-9和VEGF-C表达明显增加;ELISA结果显示,MMP-2、MMP-9和VEGF-C分泌量明显增加(P<0.05);PDTC处理后可显著增加IκBα的蛋白表达进而恢复并上调H2-calponin的表达(P<0.01)。结论:NF-κB通路通过抑制H2-calponin表达保证波形蛋白,MMP-2,MMP-9,VEGF-C持续表达,促进食管鳞癌细胞侵袭、转移发生。 展开更多
关键词 H2-calponin NF-KB 食管鳞癌
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Wnt1诱导分泌蛋白-1通过NF-κB通路促进食管鳞癌细胞的增殖和侵袭转移 被引量：1
3
作者 凌锐 周玲 +2 位作者 周月鹏 毛朝明 陈德玉 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2018年第2期129-134,共6页
目的:探讨Wnt1诱导分泌蛋白-1(Wnt1 induced secreted protein-1,WISP-1)在食管鳞癌细胞侵袭转移的作用机制。方法:体外培养人食管鳞癌细胞株Eca109、TE-8和正常食管上皮细胞Het-1a,荧光定量PCR和蛋白质印迹检测WISP-1表达。将食管鳞癌... 目的:探讨Wnt1诱导分泌蛋白-1(Wnt1 induced secreted protein-1,WISP-1)在食管鳞癌细胞侵袭转移的作用机制。方法:体外培养人食管鳞癌细胞株Eca109、TE-8和正常食管上皮细胞Het-1a,荧光定量PCR和蛋白质印迹检测WISP-1表达。将食管鳞癌细胞株Eca109和TE-8分为空白对照组、阴性对照组和WISP-1 siRNA组,利用CCK8法检测各组细胞增殖改变;流式细胞术分析不同处理组细胞凋亡率;Transwell实验检测细胞侵袭能力变化;蛋白质印迹法检测细胞中VEGF-A,VEGF-C,MMP2,MMP9以及NF-κB通路相关蛋白的表达量;酶联免疫吸附法测定培养上清液中VEGF-C和MMP9分泌量。结果:荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌细胞中WISP-1表达量高于正常食管上皮细胞(P<0.01);CCK8和流式细胞术结果显示,下调WISP-1后,食管鳞癌细胞株增殖明显抑制(P<0.05),凋亡率无明显影响;蛋白质印迹结果显示,下调WISP-1对VEGF-A和MMP2表达无明显影响,而VEGF-C和MMP9表达明显得到抑制;酶联免疫吸附结果显示,VEGF-C和MMP9分泌量随WISP-1下调也出现明显下降(P<0.05);下调WISP-1后,食管鳞癌细胞株侵袭能力明显降低(P<0.01);下调WISP-1表达显著抑制NF-κB磷酸化并促进IκBα的磷酸化,抑制NF-κB信号活化水平。结论:WISP-1可通过NF-κB通路,增加MMP9,VEGF-C的表达和分泌,促进食管鳞癌细胞增殖及侵袭转移的能力。 展开更多
关键词 Wntl诱导分泌蛋白-1 食管鳞状细胞癌 VEGF-C MMP9 NF-KB信号通路
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不同垫底材料对磨牙深龋充填的疗效分析 被引量：1
4
作者 严嵚 周月鹏 +2 位作者 吴胜利 周飞军 许建辉 《齐齐哈尔医学院学报》 2017年第10期1167-1168,共2页
目的比较不同垫底材料对磨牙深龋充填长期疗效的影响。方法 60颗深龋磨牙Dycal盖髓后分为三组,分别给予磷酸锌、Fuji Ⅸ GP、Beautifil flow垫底,Beautifil Ⅱ聚合体充填;术后1年、2年复查进行疗效分析。结果磷酸锌组术后1年敏感率高于... 目的比较不同垫底材料对磨牙深龋充填长期疗效的影响。方法 60颗深龋磨牙Dycal盖髓后分为三组,分别给予磷酸锌、Fuji Ⅸ GP、Beautifil flow垫底,Beautifil Ⅱ聚合体充填;术后1年、2年复查进行疗效分析。结果磷酸锌组术后1年敏感率高于其它两组,术后2年充填体脱落率高于其它两组;三组在色泽变化、边缘密合、继发龋、牙髓炎方面无统计学差异。结论 Dycal结合Fuji Ⅸ GP、Beautifil flow是磨牙深龋充填的有效垫底。 展开更多
关键词 垫底 深龋 敏感 脱落
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