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EB病毒BARF1基因表达对胃癌细胞株SGC7910生物学行为的影响 被引量：7
1
作者 李友琼 张雪怡 +5 位作者 曾健 陈巧林 李良菊 成静 訾瑞峰 周天戟 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2009年第3期214-219,共6页
目的:了解EB病毒BARF1基因表达对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:构建pSG5/BARF1真核表达载体,转染到EB病毒阴性的胃癌细胞系SGC7901,经RT-PCR鉴定,获得BARF1稳定表达的细胞克隆。以pSG5空载体转染细胞为对照,进行细胞凋亡诱导实验、... 目的:了解EB病毒BARF1基因表达对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:构建pSG5/BARF1真核表达载体,转染到EB病毒阴性的胃癌细胞系SGC7901,经RT-PCR鉴定,获得BARF1稳定表达的细胞克隆。以pSG5空载体转染细胞为对照,进行细胞凋亡诱导实验、细胞增殖实验、软琼脂集落形成实验和细胞迁移实验。结果:与对照组相比,BARF1表达细胞组经抗癌药顺铂诱导后的细胞凋亡率显著降低(P<0.01),增殖速度显著加快(P<0.01),软琼脂集落形成率显著提高(P<0.05),细胞迁移能力显著增强(P<0.05)。结论:BARF1基因能够全面增强胃癌细胞的肿瘤原性,可能在EB病毒相关胃癌发生与演化的整个过程中起重要作用。 展开更多
关键词 EB病毒 BARF1 胃癌细胞 细胞生物学行为
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伤寒沙门菌鞭毛素基因fljB:z66的克隆表达及其多克隆抗体的制备 被引量：3
2
作者 张海方 高宇琳 +3 位作者 黄新祥 生秀梅 徐顺高 许化溪 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2009年第5期376-379,共4页
目的:克隆表达H:z66阳性伤寒沙门菌鞭毛素基因fljB:z66,并纯化制备相应的多克隆抗体。方法:利用PCR技术从H:z66阳性伤寒沙门菌基因组DNA中得到鞭毛素基因fljB:z66,将该基因克隆到表达载体pET-28 a(+)上并在大肠埃希菌JM109中进行表达;fl... 目的:克隆表达H:z66阳性伤寒沙门菌鞭毛素基因fljB:z66,并纯化制备相应的多克隆抗体。方法:利用PCR技术从H:z66阳性伤寒沙门菌基因组DNA中得到鞭毛素基因fljB:z66,将该基因克隆到表达载体pET-28 a(+)上并在大肠埃希菌JM109中进行表达;fljB:z66的表达产物经N i柱纯化后作为抗原免疫兔以制备多克隆抗体。结果:经PCR及序列分析证实,伤寒沙门菌鞭毛素基因fljB:z66被成功导入表达载体pET-28 a(+),并在大肠埃希菌JM109中获得了高效表达,以此作为抗原成功制备了兔抗z66的多克隆抗体。结论:成功克隆表达了H:z66阳性伤寒沙门菌鞭毛素基因fljB:z66,并制备了相应的多克隆抗体,为今后深入研究H:z66阳性伤寒沙门菌的单向相变换机制奠定了基础。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 fljB:z66 多克隆抗体
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mig-14对伤寒沙门菌在高渗应激早期基因表达的调节 被引量：2
3
作者 夏秋风 邹昕 +2 位作者 杜鸿 高宇琳 黄新祥 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2009年第3期192-196,共5页
目的:探查伤寒沙门菌mig-14在高渗应激下对若干基因表达的调节作用。方法:用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌mig-14基因缺陷变异株,用基因芯片分析高渗应激早期野生株和mig-14缺陷株基因表达差异,并对部分结果采用实时荧光定... 目的:探查伤寒沙门菌mig-14在高渗应激下对若干基因表达的调节作用。方法:用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌mig-14基因缺陷变异株,用基因芯片分析高渗应激早期野生株和mig-14缺陷株基因表达差异,并对部分结果采用实时荧光定量PCR进行验证。结果:成功制备伤寒沙门菌mig-14缺陷株,高渗应激早期mig-14变异株与野生株相比有77个基因表达下调和72个基因表达上调。结论:mig-14可能是一种调节基因,主要参与调节细菌的物质和能量代谢。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 mig-14 高渗应激 基因芯片分析
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丙烯腈对体外培养鼠胚中脑神经细胞增殖分化的影响
4
作者 端礼荣 吴全义 王卉芳 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2005年第3期137-139,共3页
目的研究丙烯腈(ACN)对大鼠胚胎中脑神经细胞增殖分化的影响。方法16d的大鼠胚胎中脑组织经取材、分离、消化后作原代细胞培养,加入不同浓度(0.01,0.1,1.0,10.0,50.0,100.0,200.0μg/ml)的ACN,从细胞形态学及细胞计数角度观察细胞生长... 目的研究丙烯腈(ACN)对大鼠胚胎中脑神经细胞增殖分化的影响。方法16d的大鼠胚胎中脑组织经取材、分离、消化后作原代细胞培养,加入不同浓度(0.01,0.1,1.0,10.0,50.0,100.0,200.0μg/ml)的ACN,从细胞形态学及细胞计数角度观察细胞生长与分化过程,同时测定蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性并与对照组进行比较。结果不同浓度的ACN明显抑制胚胎中脑神经细胞的增殖和分化,集落形成率明显减少,细胞体积小;其半数分化抑制剂量(ICD50)为29μg/ml,半数存活抑制剂量(ICV50)为42μg/ml,均显示剂量效应关系。结论ACN能抑制胚胎中脑神经细胞增殖和分化,可能与其能抑制蛋白质合成,并引起脂质过氧化有关。 展开更多
关键词 丙烯腈 胚胎中脑神经细胞 增殖 分化 脂质过氧化
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沙门菌鞭毛基因表达的相变换研究进展 被引量：1
5
作者 张海方 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第34期19254-19255,19265,共3页
沙门菌是目前研究较多的细菌之一,广泛分布于脊椎动物的肠道和很多种类的节肢动物中。大多数沙门菌为Ⅱ相菌株,具有鞭毛相变换的特征,这与其毒力和逃避宿主免疫监视有关。综述了沙门菌鞭毛相变换的研究进展,为进一步研究沙门菌的致病机... 沙门菌是目前研究较多的细菌之一,广泛分布于脊椎动物的肠道和很多种类的节肢动物中。大多数沙门菌为Ⅱ相菌株,具有鞭毛相变换的特征,这与其毒力和逃避宿主免疫监视有关。综述了沙门菌鞭毛相变换的研究进展,为进一步研究沙门菌的致病机制提供了理论依据。 展开更多
关键词 沙门菌 鞭毛 相变换
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抗H:z66抗体诱导z66^+伤寒沙门菌鞭毛相变换特点的探讨 被引量：1
6
作者 张海方 黄新祥 +4 位作者 张晓磊 倪斌 生秀梅 徐顺高 许化溪 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第6期1171-1175,共5页
目的探讨抗H∶z66抗体诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换的特点。方法利用含抗H∶z66抗体的半固体培养基诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛发生相变换,通过提取z66+伤寒沙门菌和其相变株的线性质粒,利用脉冲场凝胶电泳和核酸内切酶分析比较z66+伤寒沙... 目的探讨抗H∶z66抗体诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换的特点。方法利用含抗H∶z66抗体的半固体培养基诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛发生相变换,通过提取z66+伤寒沙门菌和其相变株的线性质粒,利用脉冲场凝胶电泳和核酸内切酶分析比较z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换前后线性质粒的结构,最后通过测定相变株的线性质粒全序列和Southern blot进一步揭示抗H∶z66抗体诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换的特点。结果 z66+伤寒沙门菌在抗H∶z66抗体的诱导下成功发生了鞭毛的单向相变换;这种单向相变换是由于伤寒沙门菌在抗体诱导下线性质粒缺失了含fljBA的2.6 kb末端区域所致,同时首次发现在鞭毛相变换后线性质粒结构反而变大,提示线性质粒可能形成了非共价结合的二聚体。结论该研究揭示了z66+伤寒沙门菌鞭毛的相变换特点,为更深入地研究z66+伤寒沙门菌奠定了基础。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 z66 鞭毛 相变换 线性质粒
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细菌Ⅵ型分泌系统研究进展 被引量：1
7
作者 张海方 王敏 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第35期19908-19909,19943,共3页
Ⅵ型分泌系统(T6SS)是最新发现的细菌分泌系统之一,该分泌系统与细菌的致病性密切相关。综述了细菌Ⅵ型分泌系统的组成成分、调控及假设模型等方面的研究进展。
关键词 细菌 Ⅵ型分泌系统 组成成分 调控
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一组特异存在于猪乳中的高分子量蛋白质
8
作者 张海方 邹思湘 +2 位作者 秦宜德 宗亚锋 陈伟华 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第6期13-15,共3页
猪乳中含有多种蛋白质,介绍了猪乳中新发现的一组高分子量蛋白质的研究现状,对其生化性质和功能作了综述,并探讨对其进一步研究和开发的重要意义。
关键词 猪乳 高分子量蛋白质 多态性
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伤寒沙门菌线性质粒pBSSB1的p17基因的生物学功能分析
9
作者 朱云霞 吴佳 +4 位作者 龚明玉 侯书宁 张绮思 陈敏洁 张海方 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期168-173,共6页
H:z66阳性伤寒沙门菌含有一特有的介导鞭毛单向相变换的线性质粒pBSSB1,其上第17号基因(p17)编码一未知功能蛋白(P17)。利用λ-Red系统制备p17基因缺陷变异株,测定变异株和野生株的生长曲线,比较其生长差异,同时通过半固体LB培养基进行... H:z66阳性伤寒沙门菌含有一特有的介导鞭毛单向相变换的线性质粒pBSSB1,其上第17号基因(p17)编码一未知功能蛋白(P17)。利用λ-Red系统制备p17基因缺陷变异株,测定变异株和野生株的生长曲线,比较其生长差异,同时通过半固体LB培养基进行动力试验比较其动力差异。利用PCR技术扩增获得p17基因,构建其重组表达载体pET28a(+)-p17,通过镍柱纯化目的蛋白P17-His6,纯化后蛋白作为抗原免疫兔子以制备多克隆抗体。结果显示,制备了p17基因缺陷变异株,变异株的生长明显迟缓于野生株(P<0.05),变异株的动力明显减弱。构建了重组表达载体pET28a(+)-p17,纯化获得了高纯度的目的蛋白P17-His6并制得相应的多克隆抗体。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 线性质粒 pBSSB1 p17
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