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MiR-4443通过抑制PEBP1的表达促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭 被引量：3
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作者 王金焱 王晋秋 +4 位作者 顾诠 杨艳 马亚军 朱静 张全安 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1712-1719,共8页
目的探讨miR-4443对乳腺癌转移的影响。方法使用高通量测序技术测定检测3例乳腺癌患者原位癌组织及其配对的癌旁组织中miR-4443的表达。使用TCGA数据库验证miR-4443在乳腺癌组织以及正常乳腺组织中的表达水平。以MCF-7细胞(低侵袭性乳... 目的探讨miR-4443对乳腺癌转移的影响。方法使用高通量测序技术测定检测3例乳腺癌患者原位癌组织及其配对的癌旁组织中miR-4443的表达。使用TCGA数据库验证miR-4443在乳腺癌组织以及正常乳腺组织中的表达水平。以MCF-7细胞(低侵袭性乳腺癌细胞)和MDA-MB-231细胞(高侵袭性乳腺癌细胞)为研究对象,采用RT-qPCR验证miR-4443在这两种细胞株中的表达水平。通过电转染法将miR-4443 mimics(miR-4443模拟物)、mimics-NC(miR-4443模拟物的对照物)或miR-4443 inhibitors(miR-4443抑制物)、inhibitors-NC(miR-4443抑制物的对照物)转染至不同的细胞株,利用RT-qPCR检测miR-4443在转染前后的表达水平,使用流式细胞分析仪分析miR-4443表达水平的变化对乳腺癌细胞凋亡的影响,使用划痕实验和Transwell侵袭实验检测miR-4443表达水平的变化对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。使用生物信息学软件预测miR-4443潜在的靶基因,并进一步使用双荧光素酶报告基因系统验证。采用RT-qPCR和Western blot分别检测不同细胞株中PEBP1(重组人磷脂酰乙醇胺结合蛋白1)在mRNA和蛋白水平的表达。结果高通量测序技术检测发现在乳腺癌组织中miR-4443的表达远高于癌旁组织(P<0.01)。TCGA数据分析显示,与正常乳腺组织想比,miR-4443在乳腺癌组织中的表达升高(P<0.01)。RT-qPCR显示,与MCF-7细胞相比,MDA-MB-231细胞中miR-4443的表达升高(P<0.01)。与转染mimics-NC相比,MCF-7细胞转染miR-4443 mimics后,miR-4443的表达上调(P<0.01);而转染miR-4443 inhibitors的MDA-MB-231细胞,其表达下调(P<0.01)。转染miR-4443 mimics的MCF-7细胞的凋亡率与阴性对照和空白对照差异无统计学意义(P>0.05),并且转染miR-4443 inhibitors的MDA-MB-231细胞的凋亡率与阴性对照和空白对照亦差异无统计学意义(P>0.05)。划痕实验及Transwell侵袭实验显示转染miR-4443 inhibitors的MDA-MB-231细胞的迁移及侵袭能力减弱(P<0.01)。相� 展开更多
关键词 微小RNA 磷脂酰乙醇胺结合蛋白1 肿瘤转移 乳腺癌
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