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靶向ER-α36的vshRNA真核表达慢病毒载体的构建、鉴定及其对胃癌细胞增殖的影响 被引量：1
1
作者 王绪明 黄萱 +4 位作者 付政祺 邹丰 张尚昆 王兆一 刘丽江 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2113-2119,共7页
目的:针对雌激素受体(ER)-α36基因的特异性靶序列,构建并鉴定靶向ER-α36基因RNAi慢病毒载体,研究ER-α36沉默后对胃癌细胞增殖的影响。方法:筛选确定的ER-α36基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,与慢病毒载体(GV307)连接,测... 目的:针对雌激素受体(ER)-α36基因的特异性靶序列,构建并鉴定靶向ER-α36基因RNAi慢病毒载体,研究ER-α36沉默后对胃癌细胞增殖的影响。方法:筛选确定的ER-α36基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,与慢病毒载体(GV307)连接,测序鉴定。转染293T细胞,包装产生慢病毒,感染胃癌SGC7901细胞株。荧光显微镜下观察SGC7901感染后荧光表达情况,real-time PCR和Western blotting方法检测ER-α36的表达变化。用1×10-10mol/L的17β-雌二醇处理沉默ER-α36的SGC7901细胞,用细胞计数法观察细胞增殖能力的变化及检测相关下游信号通路分子Src、ERK1/2、cyclin D1表达的变化。结果:阳性克隆PCR及测序证明成功构建慢病毒载体LV-ER-α36-RNAi,倒置显微镜下观察LV-ER-α36-RNAi慢病毒载体感染率达80%以上。Real-time PCR和Western blotting方法证实四环素(Te T)诱导下LV-ER-α36-RNAi明显抑制SGC7901细胞内ER-α36 mRNA和蛋白质的表达。与对照组相比,沉默ER-α36的SGC7901细胞增殖能力减弱,Src、ERK1/2、cyclin D1蛋白表达明显降低,Src蛋白活化能力减弱(P<0.05)。结论:我们构建的Te T诱导靶向ER-α36的vshRNA慢病毒载体LVER-α36-RNAi,可明显沉默ER-α36的表达,为研究ER-α36蛋白的作用机理提供实验依据,ER-α36与胃癌细胞等肿瘤细胞的增殖有关。 展开更多
关键词 SGC7901细胞 雌激素受体α36 慢病毒载体
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B型超声引导下半自动活检穿刺联合免疫组织化学标记在肺肿瘤术前组织学诊断中的评价
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作者 王绪明 李凡彩 +2 位作者 曾思恩 李艳 刘丽江 《中国实验诊断学》 2015年第10期1737-1739,共3页
肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,据2013年中华人民共和国卫生与计划生育委员会统计显示,在中国肺癌患者死亡率居恶性肿瘤患者死亡率的第一位[1]。目前肺癌的早期诊断还比较困难,半自动穿刺活检对患者损伤小,结合免疫组织化学检测,能在... 肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,据2013年中华人民共和国卫生与计划生育委员会统计显示,在中国肺癌患者死亡率居恶性肿瘤患者死亡率的第一位[1]。目前肺癌的早期诊断还比较困难,半自动穿刺活检对患者损伤小,结合免疫组织化学检测,能在术前明确肺部肿瘤的良恶性、甚至病理组织学分型,对早期提高肺肿瘤患者的术前诊断正确率和生存率具有重要的意义。 展开更多
关键词 肺肿瘤 B型超声引导 活检穿刺 联合免疫 化学标记 穿刺活检 肺部肿瘤 组织学诊断 穿刺标本 间叶源性
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