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塑料大棚小气候的模拟和检测(英文) 被引量:7
1
作者 王绍金 朱松明 DeltourJ. 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第4期139-144,共6页
为了研究大棚内外空气热量的物质交换的机理,该文把用在大玻璃温室的让布鲁温室动态模型应用于小塑料大棚。此模型考虑了温室内三层土壤、作物层、空气层、覆盖物和保温幕之间的传导、对流、太阳辐射和热辐射以及潜热交换,在此基础上... 为了研究大棚内外空气热量的物质交换的机理,该文把用在大玻璃温室的让布鲁温室动态模型应用于小塑料大棚。此模型考虑了温室内三层土壤、作物层、空气层、覆盖物和保温幕之间的传导、对流、太阳辐射和热辐射以及潜热交换,在此基础上进行了在不同气候条件下模拟的实测结果的比较分析。其结果表明,模型达到较高精度。 展开更多
关键词 塑料大棚 温室动态模型 有效性 模拟
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温室温度和热流通量的动态模拟 被引量:5
2
作者 王绍金 崔绍荣 +1 位作者 J.Deltour J.Nijskens 《浙江农业大学学报》 CSCD 1993年第2期159-162,共4页
提出了温室气候的动态模型,在模型中考虑到了温室内三层土壤、作物层、室内空气和覆盖物之间的传导、对流、太阳辐射和热辐射以及潜热交换,在此基础上,研究了比利时典型天气条件下温室内的温度和热流通量的变化,认为室内气温主要取决于... 提出了温室气候的动态模型,在模型中考虑到了温室内三层土壤、作物层、室内空气和覆盖物之间的传导、对流、太阳辐射和热辐射以及潜热交换,在此基础上,研究了比利时典型天气条件下温室内的温度和热流通量的变化,认为室内气温主要取决于室外气温、太阳辐射和热辐射,所以,对玻璃温室的对流传热损失和塑料大棚的热辐射损失必须引起足够重视。 展开更多
关键词 温室 动态模似 温度 热流通量
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温室主要结构参数对其气候的影响(英文) 被引量:3
3
作者 王绍金 J.Deltour 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1995年第3期101-107,共7页
本文描述了温室气候的动态模型及其精确分析解,基于转换因子变化的分析解,研究了温室主要十个参数对其气侯的影响。结果表明,影响最大的参数为温室覆盖材料对太阳辐射和热辐射的透射率以及作物占温室土壤表面积的比例。此研究将对室内... 本文描述了温室气候的动态模型及其精确分析解,基于转换因子变化的分析解,研究了温室主要十个参数对其气侯的影响。结果表明,影响最大的参数为温室覆盖材料对太阳辐射和热辐射的透射率以及作物占温室土壤表面积的比例。此研究将对室内模拟条件对相应检测结果的调整起重要作用。 展开更多
关键词 分析解 动态模拟 气候 转换因子 温室 结构参数
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温室加热系统中各种控制方法的模拟(英文) 被引量:1
4
作者 王绍金 崔绍荣 +1 位作者 J.Deltour J.Nijskans 《浙江农业大学学报》 CSCD 1992年第4期97-102,共6页
模拟方法可用来研究控制规律和温室模型的工作动态特性.本文提供了一个基于实际温室加热系统的模型,以探求各种控制器的操作特性和主要的适宜参数值,此方法还可研制较为复杂的温度设定程序,以满足植物的需要和达到节能的目的.
关键词 温室 加热系统 控制
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非洲猪瘟病毒p30基因的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量:28
5
作者 吴竞 王西西 +2 位作者 吴映彤 任肖 郭晓宇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第12期3555-3562,共8页
为建立检测血清中非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)抗体的间接ELISA方法,本试验将ASFVp30基因进行原核表达,采用SDS-PAGE和Western blotting方法对重组蛋白进行表达鉴定和免疫原性分析,随后以纯化的重组蛋白为包被抗原,经... 为建立检测血清中非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)抗体的间接ELISA方法,本试验将ASFVp30基因进行原核表达,采用SDS-PAGE和Western blotting方法对重组蛋白进行表达鉴定和免疫原性分析,随后以纯化的重组蛋白为包被抗原,经条件优化、特异性试验、敏感性试验和重复性试验,建立一种血清中ASFV抗体的检测方法。结果显示,ASFVp30基因成功克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,获得pET-32a-p30重组质粒;转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达,得到P30重组蛋白,重组蛋白大小约为42ku,主要以包涵体形式存在;Western blotting结果显示,纯化后的蛋白具有良好的免疫原性;以纯化的P30重组蛋白为包被抗原,建立了检测ASFV抗体的间接ELISA方法,通过方阵试验对间接ELISA方法进行优化,最终确定了抗原最佳包被浓度为1.2μg/mL,待检血清最佳稀释倍数为1∶100,最佳封闭液为1%BSA,酶标抗体最佳稀释度为1∶4 000,以此建立的ASFV间接ELISA方法临界值为0.322。本方法仅与ASFV阳性血清发生特异性反应,与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型及猪流行性腹泻病毒阳性血清均无交叉反应,具有较强的特异性。该方法检测ASFV阳性血清灵敏度可达到1∶1 600;批内重复性和批间重复性变异系数均<10%。本试验建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、灵敏度和重复性,可初步应用于ASFV抗体的检测。 展开更多
关键词 非洲猪瘟(ASFV) P30基因 原核表达 重组蛋白 间接ELISA
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非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备 被引量:11
6
作者 王西西 吴映彤 +3 位作者 吴竞 陈鸿军 郭晓宇 朱鸿飞 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第5期10-15,共6页
本研究旨在采用原核表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1毒株毒力基因UK,获得重组蛋白(DP96R),进一步制备并鉴定DP96R重组蛋白的多克隆抗体。首先构建原核重组表达质粒pET-28a-UK并转化BL21感受态... 本研究旨在采用原核表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1毒株毒力基因UK,获得重组蛋白(DP96R),进一步制备并鉴定DP96R重组蛋白的多克隆抗体。首先构建原核重组表达质粒pET-28a-UK并转化BL21感受态细胞,在16℃、0.4 mmol/L IPTG条件下诱导10 h后,检测到目的蛋白以可溶性表达为主,蛋白分子量约为15 kDa。然后采用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗DP96R蛋白多克隆抗体。ELISA结果表明制备的多抗具有良好反应性,Western blot和免疫荧光实验(immunofluorescence assay,IFA)表明制备的多抗能特异性识别真核表达的DP96R蛋白。DP96R重组蛋白及多克隆抗体的制备为进一步研究DP96R蛋白的生物学功能以及建立ASFV毒株鉴别诊断的血清学检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 UK基因 DP96R蛋白 原核表达 多克隆抗体
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非洲猪瘟病毒Georgia 2007/1株CD2v蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 被引量:10
7
作者 任肖 吴竞 +4 位作者 于海男 林伟东 侯绍华 郭晓宇 朱鸿飞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第12期3698-3706,共9页
本研究旨在通过原核表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1株EP 402 R基因,获得其编码的CD2v重组蛋白,并针对纯化的CD2v重组蛋白制备多克隆抗体。将ASFV EP 402 R全长基因进行密码子优化后连入pET-28... 本研究旨在通过原核表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1株EP 402 R基因,获得其编码的CD2v重组蛋白,并针对纯化的CD2v重组蛋白制备多克隆抗体。将ASFV EP 402 R全长基因进行密码子优化后连入pET-28a(+)表达载体,构建原核重组表达质粒,经1 mmol/L IPTG于16℃诱导12 h后,利用SDS-PAGE和Western blotting对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析。以纯化的CD2v重组蛋白为免疫原制备鼠源抗CD2v多克隆抗体,随后以间接ELISA方法、间接免疫荧光试验及Western blotting分别检测多克隆抗体的效价和特异性。结果显示,ASFV EP 402 R基因克隆至pET-28a(+)获得pET-28a-EP402R重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后经诱导表达获得CD2v重组蛋白,其大小约为47 ku,重组蛋白主要以包涵体形式存在,部分也可以融合表达蛋白形式存在。Western blotting结果显示,其可溶性上清经镍柱纯化后能被ASFV阳性血清识别,具有良好的反应原性。间接ELISA检测该多克隆抗体效价可达1∶512000,间接免疫荧光试验和Western blotting表明该多克隆抗体可特异性识别真核表达的CD2v蛋白。以上结果表明,通过原核表达的ASFV CD2v重组蛋白具有较好的免疫原性,利用重组蛋白制备的多克隆抗体具有较高的抗体效价和特异性,为进一步研究ASFV EP402R生物学功能及基因缺失毒株的鉴别诊断和疫苗开发提供技术储备。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒(ASFV) EP 402 R基因 CD2v重组蛋白 原核表达 多克隆抗体
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不同玻璃对温室内植物生长环境的影响 被引量:4
8
作者 何法才 苗香雯 +1 位作者 余根墀 台勒图尔 《浙江农业大学学报》 CSCD 北大核心 1997年第3期261-264,共4页
测试了多种玻璃在190nm至50μm波长范围内的透射光谱,以及实际可见光透射率和太阳辐射透射率,并对各个波段内的透射率进行了计算,同时还对玻璃的传热特性做了比较试验,并测试了不同玻璃覆盖下的植物光合作用速率.研究结果... 测试了多种玻璃在190nm至50μm波长范围内的透射光谱,以及实际可见光透射率和太阳辐射透射率,并对各个波段内的透射率进行了计算,同时还对玻璃的传热特性做了比较试验,并测试了不同玻璃覆盖下的植物光合作用速率.研究结果表明,比利时镀膜玻璃最适合用于冬季温室覆盖。 展开更多
关键词 玻璃材料 温室 透射率 传热 光合速率
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非洲猪瘟病毒多基因家族成员MGF360-12L RPA检测方法的建立 被引量:7
9
作者 吴映彤 王西西 +3 位作者 吴竞 陈鸿军 朱鸿飞 郭晓宇 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第2期20-25,共6页
为建立一种简便、快速的针对非洲猪瘟病毒(ASFV)多基因家族成员MGF360-12L的分子检测方法,基于MGF360-12L基因序列,设计并合成引物,建立重组酶聚合酶扩增(RPA)等温检测方法。结果表明,于35℃恒温反应30 min,即可实现对目的片段的稳定扩... 为建立一种简便、快速的针对非洲猪瘟病毒(ASFV)多基因家族成员MGF360-12L的分子检测方法,基于MGF360-12L基因序列,设计并合成引物,建立重组酶聚合酶扩增(RPA)等温检测方法。结果表明,于35℃恒温反应30 min,即可实现对目的片段的稳定扩增;以含有MGF360-12L基因的重组质粒为模板,RPA反应的检测限达到10~3个拷贝,同普通PCR方法检测限一致;此外,该RPA方法仅特异性扩增非洲猪瘟病毒MGF360-12L基因,对PEDV、FMDV、CSFV、PRRSV、PRV 和 PCV-2基因组cDNA或DNA没有扩增。本研究建立的RPA方法操作简单、反应快速、检测成本低,能够为ASFV相关基因缺失毒株的鉴别诊断提供一定技术支持。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 MGF360-12L RPA
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2株猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病性分析 被引量:4
10
作者 李志 隋修锟 +5 位作者 吴竞 鑫婷 李明 高新桃 姜一曈 侯绍华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第5期1477-1483,共7页
为追踪猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)分离株的变异特点,本研究于2016年从河北和福建疑似猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)发病猪场采集病料,接种Marc-145细胞,产生合胞体样细胞病变,... 为追踪猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)分离株的变异特点,本研究于2016年从河北和福建疑似猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)发病猪场采集病料,接种Marc-145细胞,产生合胞体样细胞病变,RT-PCR和间接免疫荧光试验鉴定为HP-PRRSV,将其分别命名为PRRSV CZ16A和NP16A。为研究PRRSV分离株CZ16A和NP16A对猪的致病性,将分离毒株经噬斑纯化后分别接种PRRSV抗原、抗体双阴性的60日龄健康仔猪,通过临床观察、解剖病理变化及病毒血症检测等指标初步探讨两株PRRSV的致病性。结果表明,分离株CZ16A和NP16A感染猪后均能够在动物体内复制,并引起体温升高,但两株PRRSV分离株均未引起试验动物的发病和死亡,剖检结果显示NP16A分离株能引起动物肺部实变、淋巴结肿大,其毒力比CZ16A分离株稍强。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离鉴定 致病性分析
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牛分枝杆菌MarP蛋白的表达纯化及其单克隆抗体制备 被引量:1
11
作者 林伟东 隋修锟 +5 位作者 王召阳 贾红 房立春 王海春 朱良全 鑫婷 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第6期1774-1782,共9页
为制备能够特异性识别牛分枝杆菌(M.bovis)抗酸蛋白酶(MarP)的特异性单克隆抗体(MAb),本研究利用大肠杆菌表达系统表达了MarP蛋白的胞浆区,并以β-casein为底物、DTT为抑制剂检测MarP的丝氨酸蛋白酶活性。以具有活性的MarP蛋白免疫小鼠... 为制备能够特异性识别牛分枝杆菌(M.bovis)抗酸蛋白酶(MarP)的特异性单克隆抗体(MAb),本研究利用大肠杆菌表达系统表达了MarP蛋白的胞浆区,并以β-casein为底物、DTT为抑制剂检测MarP的丝氨酸蛋白酶活性。以具有活性的MarP蛋白免疫小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,并加入饲养层细胞轻轻摇匀分装于96孔培养板,置于37℃、5%CO2培养箱内培养10 d,通过IFA和间接ELISA筛选阳性细胞株进行亚克隆,制备能分泌针对MarP MAb的杂交瘤细胞株,并通过Western blotting和ELISA检测MAb与重组表达和天然的MarP蛋白的反应性。结果显示,重组表达的MarP具有良好的丝氨酸蛋白酶活性,能够在12 h内将30μg的β-casein酶解完全,DTT能够抑制MarP的酶活性。具有活性的MarP蛋白免疫小鼠后,获得5株针对MarP的MAb,均能够特异性识别重组和牛分枝杆菌天然表达的MarP蛋白的线性表位,而不与大肠杆菌(E.coli)和耻垢分枝杆菌(M.smegmatis)的蛋白反应。本研究成功制备了MarP蛋白及MAb,为进一步研究MarP的作用底物及其在牛分枝杆菌抗酸胁迫中作用机制提供了必备材料。 展开更多
关键词 牛分枝杆菌 抗酸 抗酸蛋白酶(MarP) 单克隆抗体(MAb) 丝氨酸蛋白酶
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新的高致病性PRRSV毒株FZ16A的分子特征及其致病性的研究 被引量:3
12
作者 隋修锟 侯绍华 +7 位作者 林伟东 张珊 贾红 郭晓宇 袁维峰 姜一曈 鑫婷 朱鸿飞 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1511-1521,共11页
为了掌握猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)分离株的遗传变异特点,从福建省某疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病猪场采集病料并分离病原,采用RT-PCR、间接免疫荧光试验及基因测... 为了掌握猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)分离株的遗传变异特点,从福建省某疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病猪场采集病料并分离病原,采用RT-PCR、间接免疫荧光试验及基因测序等方法将其鉴定为HP-PRRSV,命名为FZ16A株。对FZ16A株ORF5基因进行克隆和测序,并进行分子生物学研究。将分离毒株接种PRRSV抗原、抗体双阴性的60日龄仔猪,通过观察临床症状、病理解剖变化及其病理切片等指标初步探讨分离毒株的致病性。结果,FZ16A株是北美(NA)基因型高致病性PRRSV(HP-PRRSV)变异株。同源性分析显示,FZ16A株ORF5基因与北美株VR-2332核苷酸(氨基酸)序列的相似性为87.9%(85.1%),与JXA1的相似性为98.8%(97%),与欧洲典型菌株Lelystad病毒的相似性为63.3%(56.9%)。系统发育分析表明,FZ16A属于NA基因型,与其他高致病性PRRSV毒株具有相同的亚型。氨基酸序列分析表明,与VR-2332株相比,FZ16A在信号肽、跨膜区(TM)、初级中和表位(PNE)、非中性表位和N-糖基化位点方面有不同程度的变异。抗原性分析显示,FZ16A ORF5基因产物与JXA1具有相似的抗原性,抗原表位主要位于aa32-37、aa50-55、aa127-133、 aa136-142、aa147-156、aa159-171、aa174-185和aa193-198区域。致病性分析表明,该分离毒株感染猪后能引起体温升高、咳嗽、食欲下降等临床症状,但并未引起试验动物死亡。剖检结果显示,FZ16A分离株能引起试验动物肺部组织实变,淋巴结肿大。肺脏病理切片可见FZ16A感染组动物有明显的间质增生性肺炎,肺泡壁毛细血管扩张充血,肺泡壁增厚等变化。以上结果表明,本研究分离的FZ16A株是新的变异毒株,丰富了该地区的PRRSV基因数据库,并为该地区PRRSV分子流行病学研究及防控奠定了一定基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离鉴定 ORF5基因 分子特征 致病性分析
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蛋白质激发子Hrip1对小麦黄矮病的诱抗作用 被引量:2
13
作者 李琳 王双超 +2 位作者 杨秀芬 Frederic FRANCIS 邱德文 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2020年第1期97-104,共8页
小麦黄矮病是由大麦黄矮病毒(barley yellow dwarf virus,BYDV)引起的一种小麦病毒病,其传播介体是小麦蚜虫,在小麦生产中造成巨大的经济损失。近年来,植物诱导抗性作为一种新兴的植物病虫害防治措施引起了广泛的关注。蛋白质激发子Hrip... 小麦黄矮病是由大麦黄矮病毒(barley yellow dwarf virus,BYDV)引起的一种小麦病毒病,其传播介体是小麦蚜虫,在小麦生产中造成巨大的经济损失。近年来,植物诱导抗性作为一种新兴的植物病虫害防治措施引起了广泛的关注。蛋白质激发子Hrip1可以激活多种植物的免疫防御反应诱导植物产生广谱抗性。本研究评价了Hrip1对小麦黄矮病的诱抗效果。用30μg/m L的Hrip1溶液进行小麦浸种和幼苗喷雾,随后接种BYDV,接种后第14 d,Hrip1对小麦黄矮病控制效果在50%以上,接种后第21 d控制效果仍在30%以上。实时荧光定量PCR检测结果显示,在Hrip1处理的小麦幼苗体内,BYDV外壳蛋白m RNA的数量显著低于对照组;EPG结果显示,在Hrip1处理的小麦幼苗上,麦二叉蚜寻找叶片刺吸位点和韧皮部取食位点的时间增加。以上结果表明:Hrip1能够有效地抑制BYDV在小麦体内的增殖;影响传毒媒介麦二叉蚜的取食行为,抑制其传毒能力。此外,Hrip1处理小麦能有效缓解BYDV引起的叶片黄化和植株矮化的症状。因此,Hrip1可以作为生物诱导剂综合控制小麦黄矮病。 展开更多
关键词 Hrip1 大麦黄矮病毒 传毒能力 病毒增殖
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牛分枝杆菌PPE68与Mb1230以及PPE57和PE-PGRS35的表达纯化及其在牛结核病血清学诊断中的初步应用 被引量:2
14
作者 李明 张雅娜 +7 位作者 林伟东 隋修锟 贾红 侯绍华 姜一曈 房立春 朱鸿飞 鑫婷 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期20-28,共9页
为筛选和评估牛分枝杆菌毒力菌株与卡介苗(BCG)基因差异区域(region of differences,RD)蛋白在牛结核病诊断中的效果,本研究表达了牛分枝杆菌RD1区的PPE68、RD9区的Mb1230、R11区的PPE57和RD2区的PE-PGRS35,并纯化得到纯度大于90%的重... 为筛选和评估牛分枝杆菌毒力菌株与卡介苗(BCG)基因差异区域(region of differences,RD)蛋白在牛结核病诊断中的效果,本研究表达了牛分枝杆菌RD1区的PPE68、RD9区的Mb1230、R11区的PPE57和RD2区的PE-PGRS35,并纯化得到纯度大于90%的重组蛋白。通过优化条件建立了间接ELISA检测方法,并采用该方法检测了结核病阳性牛和健康牛血清中针对PPE68、Mb1230、PPE57和PE-PGRS35的IgM和IgG抗体水平,评价其在牛结核病血清学诊断中的潜力。结果显示,在结核病阳性牛中,针对PPE68、Mb1230、PPE57和PE-PGRS35的IgG抗体检出率分别为13.3%、43%、50%和30%,IgM抗体检出率分别为30%、10%、36%和33%。结果表明,R11区的PPE57和RD2区的PE-PGRS35有潜力作为牛结核病血清学检测的候选抗原,用于牛结核病的诊断。 展开更多
关键词 牛分枝杆菌 血清学检测 重组蛋白 IgG IGM
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