期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
人胸苷激酶基因cDNA克隆 被引量：7
1
作者 丁克祥 郑永晨 +4 位作者 吴朝阳 王攀 张杰 胡燕祝 吕沅津 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期932-934,共3页
目的　克隆人胸苷激酶基因cDNA。方法采用逆转录PCR方法扩增胸苷激酶cDNA ,用十二烷基氟波酯 (TPA)刺激人外周血细胞的mRNA为模板 ;扩增的PCR产物经TA克隆重组和内切酶鉴定 ,以及DNA序列分析确定克隆基因的序列。结果经逆转录PCR扩增出... 目的　克隆人胸苷激酶基因cDNA。方法采用逆转录PCR方法扩增胸苷激酶cDNA ,用十二烷基氟波酯 (TPA)刺激人外周血细胞的mRNA为模板 ;扩增的PCR产物经TA克隆重组和内切酶鉴定 ,以及DNA序列分析确定克隆基因的序列。结果经逆转录PCR扩增出一个 70 0bp左右的DNA片段 ,TA克隆出现 1 6个阳性克隆 ,选择其中的一个克隆 (TKTA8)进行DNA序列分析 ,序列分析结果表明TKTA8克隆重组的序列是人胸苷激酶的cDNA序列。结论从外周血细胞中得到了hTK完整的开放读码框架。 展开更多
关键词 胸苷激酶基因 逆转录PCR 扩增 DNA序列分析 克隆基因 人外周血 读码框架 阳性克隆 CDNA克隆 PCR产物
下载PDF
人胸苷激酶单克隆抗体的制备 被引量：5
2
作者 丁克祥 郑永晨 +4 位作者 吴朝阳 王攀 张杰 吕沅津 胡燕祝 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期54-55,共2页
目的制备人胸苷激酶单克隆抗体。方法用大肠杆菌表达和纯化的人胸苷激酶免疫Balb/C小鼠,免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,HAT选择培养和ELISA筛选阳性克隆,阳性克隆杂交瘤注入小鼠腹腔制备腹水,用ELISA和免疫组化鉴定胸苷激酶单克隆抗... 目的制备人胸苷激酶单克隆抗体。方法用大肠杆菌表达和纯化的人胸苷激酶免疫Balb/C小鼠,免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,HAT选择培养和ELISA筛选阳性克隆,阳性克隆杂交瘤注入小鼠腹腔制备腹水,用ELISA和免疫组化鉴定胸苷激酶单克隆抗体。结果经细胞融合和筛选得到37个阳性单克隆杂交瘤,其中有二株杂交瘤可以稳定地产生人胸苷激酶的特异性抗体,制备的腹水中有高效价的抗体活性。结论用原核表达的人胸苷激酶免疫小鼠可以制备出人胸苷激酶特异性单克隆抗体。 展开更多
关键词 单克隆抗体 人胸苷激酶 杂交瘤
下载PDF
hTK1质量放大压电石英晶体免疫传感器研究 被引量：5
3
作者 丁克祥 吴朝阳 +5 位作者 郑永晨 王攀 周颖 曹国彬 胡燕祝 吕沅津 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1064-1067,共4页
目的研制高灵敏度的质量放大压电石英晶体免疫传感器用于人血清中癌症标志物胸苷激酶1(hTK1) 的检测.方法将半胱氨自组装膜用戊二醛活化,共价固定hTK1抗原,通过和待测抗原竞争与一定浓度的酶标抗体反应,应用4-氯-1萘酚和H2O2质量放大体... 目的研制高灵敏度的质量放大压电石英晶体免疫传感器用于人血清中癌症标志物胸苷激酶1(hTK1) 的检测.方法将半胱氨自组装膜用戊二醛活化,共价固定hTK1抗原,通过和待测抗原竞争与一定浓度的酶标抗体反应,应用4-氯-1萘酚和H2O2质量放大体系,测得样品中待测抗原的浓度.结果 hTK1 的浓度在 0.1～10 ng/ml 范围内,与传感器频率的变化之间呈良好的线性关系.应用此方法对患有不同癌症病人血清进行测定,发现正常血清与癌症血清的频移值存在显着差异.结论基于质量放大原理的压电石英晶体免疫传感器可定量测定血清中的 ng 水平的 hTK1 抗原,有望用于癌症的早期诊断和临床检测. 展开更多
关键词 人血清中胸苷激酶1 压电石英晶体 质量放大 免疫传感器 肿瘤早期诊断
下载PDF
人胸苷激酶基因在大肠杆菌中的表达 被引量：1
4
作者 丁克祥 郑永晨 +4 位作者 吴朝阳 王攀 张杰 胡燕祝 吕沅津 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1029-1031,共3页
目的　在大肠杆菌中表达人胸苷激酶 (hTK)。方法　用内切酶将hTKTA克隆中的hTK基因切下 ,并与同样内切酶切的载体PET2 8a+连接 ,转化大肠杆菌 ,筛选阳性克隆 ,酶切和DNA序列分析鉴定 ,用IPTG诱导培养阳性克隆 ;SDS -PAGE鉴定hTK在大肠... 目的　在大肠杆菌中表达人胸苷激酶 (hTK)。方法　用内切酶将hTKTA克隆中的hTK基因切下 ,并与同样内切酶切的载体PET2 8a+连接 ,转化大肠杆菌 ,筛选阳性克隆 ,酶切和DNA序列分析鉴定 ,用IPTG诱导培养阳性克隆 ;SDS -PAGE鉴定hTK在大肠杆菌中的表达。结论　hTK基因重组入PET2 8a +的EcoRI和XhoI位点 ,IPTG可以明显诱导hTK在大肠杆菌中表达。 展开更多
关键词 人胸苷激酶 大肠杆菌 DNA重组
下载PDF
压电免疫传感器用于人胸苷激酶及其与单克隆抗体反应亲和常数的测定 被引量：1
5
作者 张万强 吴朝阳 +6 位作者 丁克祥 郑永晨 王攀 周颖 马道新 胡燕祝 吕沅津 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期248-250,共3页
目的用自制单克隆抗体构建人胸苷激酶(hTK)压电免疫传感器,测定免疫反应亲和常数,评价抗体的活性。方法在压电石英晶体的金电极上自组装一层蛋白A,定向固定hTK单克隆抗体,测定不同浓度hTK引起的频移值。结果根据Scatchard绘图法,对免疫... 目的用自制单克隆抗体构建人胸苷激酶(hTK)压电免疫传感器,测定免疫反应亲和常数,评价抗体的活性。方法在压电石英晶体的金电极上自组装一层蛋白A,定向固定hTK单克隆抗体,测定不同浓度hTK引起的频移值。结果根据Scatchard绘图法,对免疫反应亲和常数进行了估算,为1.85×106mol/L。结论该压电免疫传感器可直接测定溶液中的hTK,得到免疫反应的亲和常数,并证实实验室制备的单克隆抗体具有较高活性。 展开更多
关键词 压电免疫传感器 人胸苷激酶 TK单克隆抗体 亲和常数
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部